【摘要】：目的：观察隔日限食疗法(every-other-day fasting, EODF)对大鼠急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)后运动功能、脊髓神经细胞凋亡、炎性因子及血清炎性因子的影响,了解神经细胞凋亡、炎性反应和运动功能恢复之间的关系,从抗凋亡、抗炎方面初步探讨EODF对ASCI的神经保护作用及其可能机制。为EODF用于临床治疗ASCI提供实验依据。方法：将48只雌性成年Wistar大鼠,随机分成EODF组(A组,n=16)、正常饮食对照组(B组,n=16)、假手术组(C组,n=16)。采用改良Aleln's打击法建立Wistar大鼠胸段脊髓损伤模型。A组于术后立即给予EODF, B组及C组给予正常饮食。各组大鼠分别于术后6h、1d、3d、7d行动物行为学BBB评分(Basso Beattie and Bresnahan scores, BBB scores)观察大鼠运动功能变化后处死,取损伤段脊髓组织行石蜡切片后,通过苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色来观察脊髓组织结构变化,并通过免疫组化检测(SP法)观察凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达情况,观察炎性因子白介素-6(Interleukin-6, IL-6)、白介素-10(Interleukin-10, IL-10)的表达情况;运用ELISA法检测各组大鼠血清中IL-6、IL-10的含量。结果：1.行为学观察结果：脊髓损伤后6h,A、B两组均表现出双后肢瘫痪的严重运动功能障碍,BBB评分均为0.00±0.00,与C组比较,差异有统计学意义(P0.01)；随时间延长,A、B两组BBB评分均呈上升趋势,在脊髓损伤3d后,A、B两组比较,差异有统计学意义(P0.01),A组出现后肢三个关节(髋、膝、踝关节)的轻微活动,BBB评分为4.00±0.82,而B组仅出现髋、膝一到两个关节的轻微活动,评分为1.75±0.50；至脊髓损伤7d后,A、B两组差异有统计学意义(P0.01),A组可见足底负重位及足背负重步行,BBB评分为9.00±0.82,而B组仅见两个关节轻微活动及一个关节的较大幅度活动,BBB评分为5.50±1.29。2.HE染色结果：A、B两组经造模后脊髓组织均可见不同程度的出血灶、炎性细胞浸润以及空洞形成,可见明显的神经细胞变性,灰白质界限欠清；较之于B组,A组经EODF干预后病理学改变可见改善；C组脊髓结构规则,灰白质界限分明,白质致密,无明显出血、水肿、炎细胞浸润。3.免疫组化结果：(1) Caspase-3、Bax:脊髓损伤6h后,与C组比较,A、B两组Caspase-3表达(分别为34.67±0.98,35.94±3.17)及Bax表达(分别为39.09±0.82,40.16±1.09)均明显增加,差异有统计学意义(P0.01)；随时间延长,A、B两组Caspase-3及Bax表达均呈先升后降趋势,峰值均出现在1d,在脊髓损伤3d后,A组Caspase-3、Bax表达均值(26.87±0.77,37.93±0.84)小于B组(31.47±1.56,39.69±0.88),差异有统计学意义(P0.01)；至脊髓损伤7d后,A组Caspase-3、Bax表达均值(21.75±0.99,31.36±1.90)明显小于B组(31.43±2.09,39.01±1.65),差异有统计学意义(P0.01)。提示EODF可减少脊髓组织中Caspase-3、Bax的表达。(2)Bcl-2：与C组比较,脊髓损伤6h后,A、B两组Bcl-2表达(分别为12.05±1.12,10.78±0.72)均明显增加,差异有统计学意义(P0.01)；随时间延长,A、B两组Bel-2表达均呈先升后降趋势,峰值出现在3d,在脊髓损伤1d、3d、7d后,A组Bcl-2表达均值(27.25±0.85,37.11±0.57,31.53±0.82)均大于B组(20.41±0.75,25.23±0.71,22.23±0.97),差异有统计学意义(P0.01)。提示EODF可增加脊髓组织中Bcl-2的表达。(3)IL-6：脊髓损伤6h后,A、B两组IL-6表达(分别为31.30±2.57,31.64±1.73)与C组比较均明显增加,差异有统计学意义(P0.01);随时间延长,A组IL-6表达呈先升后降趋势,峰值在1d,B组IL-6表达呈上升趋势,在脊髓损伤3d、7d后,A组IL-6表达均值(28.41±1.68,27.09±1.34)小于B组(34.64±2.69,35.16±2.75),差异有统计学意义(P0.01)。提示EODF可减少脊髓组织中IL-6的表达。(4)IL-10：与C组比较,脊髓损伤6h后,A、B两组IL-10表达(分别为15.98±0.88,15.60±1.33)均明显增加,差异有统计学意义(P0.01)：随时间延长,A、B两组IL-10表达均呈上升趋势,在脊髓损伤1d后,A组IL-10表达均值(17.62±0.85)大于B组(16.39±1.38),差异有统计学意义(P0.05)；至脊髓损伤3d、7d后,A组IL-10表达均值(20.47±1.87,16.75±1.70)大于B组(23.51±1.85,17.13±1.22),差异有统计学意义(P0.01)。提示EODF可增加脊髓组织中IL-10的表达。4血清IL-6、IL-10含量的ELISA结果：(1)IL-6：脊髓损伤6h后,A、B两组血清IL-6含量(分别为87.07±3.72,87.77±4.41)与C组比较均明显增加,差异有统计学意义(P0.01)；随时间延长,A、B两组血清IL-6含量呈先升后降趋势,A组峰值在1d,B组峰值在3d,在脊髓损伤3d、7d后,A组血清IL-6含量均值(101.56±8.55,51.42±6.29)小于B组(121.79±4.69,108.24±4.56),差异有统计学意义(P0.01)。提示EODF可减少血清IL-6的产生。(2)IL-10：脊髓损伤6h后,A、B两组血清IL-10含量(分别为21.83±0.27,21.71±0.64)与C组比较均明显增加,差异有统计学意义(P0.01)；随时间延长,A、B两组血清IL-10含量均呈上升趋势,在脊髓损伤3d、7d后,A组血清IL-10含量均值(29.11±0.54,34.41±0.57)小于B组(25.76±0.64,26.12±1.61),差异有统计学意义(P0.01)。提示EODF可减少血清IL-10的产生。5. EODF组相关性分析结果：Caspase-3、Bax、脊髓IL-6阳性细胞表达及血清IL-6与BBB评分之间均呈负相关(r=-0.756、-0.730、-0.774、-0.734,P0.01);Bcl-2、脊髓IL-10阳性细胞表达及血清IL-10与BBB评分之间均呈正相关(r=0.899、0.933、0.951,P0.01)；脊髓IL-6阳性细胞表达与血清IL-6含量之间呈正相关(r=0.636,P0.01)；脊髓组织IL-10阳性细胞表达与血清IL-10含量之间呈正相关(r=0.882,P0.01)。结论：1. EODF可改善ASCI大鼠后肢运动功能,提示其对SCI具有治疗作用；2. EODF能够减轻ASCI后神经细胞凋亡及炎性反应,具有神经保护作用,其作用机制可能与抑制促凋亡因子Caspase-3、Bax的表达及促炎性因子IL-6的产生,增加抗凋亡因子Bcl-2的表达及抗炎因子IL-10的产生来抑制细胞凋亡及炎性反应,减轻继发性损伤,促进功能恢复有关。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R651.2
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 郑联合,王育才,孙宏慧,廖博,尚保生;急性脊髓损伤患者围急性呼吸窘迫综合征的临床特点[J];中国急救医学;2003年07期
2 马永刚,刘世清,刘敏;血清单核细胞趋化蛋白-1水平与急性脊髓损伤的诊断研究[J];中国康复医学杂志;2004年09期
3 穆卫东,周东生,王鲁博;急性脊髓损伤后应激性溃疡大出血的手术治疗[J];中国急救医学;2004年09期
4 黄平,董英海;急性脊髓损伤非手术治疗的进展[J];中国骨伤;2004年11期
5 费志强;徐建广;;急性脊髓损伤的治疗现状和进展[J];中国临床康复;2006年28期
6 王国宾;游洪波;孙凯;;急性脊髓损伤的药物治疗进展[J];医药导报;2010年03期
7 崔婷婷;赵丽娟;刘岩;姜伟;邓贺民;;72例急性脊髓损伤应用单唾液酸神经节苷脂临床研究[J];中国医药指南;2010年14期
8 许锦兰;;注射用甲泼尼龙琥珀酸钠治疗急性脊髓损伤的疗效观察[J];中国当代医药;2011年32期
9 FraserA;Edmonds-SealJ;江学成;;在急性脊髓损伤中麻醉医生面临的问题[J];国外医学.麻醉学与复苏分册;1984年03期
10 ;治疗急性脊髓损伤的药物[J];国外医药.合成药.生化药.制剂分册;1994年04期
相关会议论文 前10条
1 杨松成;王鸿丽;韩静;魏开华;;基于质谱的蛋白质组学应用于大鼠急性脊髓损伤及其电针治疗的研究[A];中国化学会第十五届全国有机分析及生物分析学术研讨会论文集[C];2009年
2 孙凯;易成腊;游洪波;郭风劲;白祥军;陈安民;;急性脊髓损伤药物治疗进展[A];湖北省暨武汉市病理生理学会第十四届学术年会论文汇编[C];2008年
3 张炳云;吴建民;;急性脊髓损伤药物治疗[A];2011年浙江省骨质疏松与骨矿盐疾病学术年会暨《骨质疏松症诊治进展》专题研讨会论文汇编[C];2011年
4 辛国强;袁绍纪;卢培刚;金善;李景德;;急性脊髓损伤的药物治疗及展望[A];2011中华医学会神经外科学学术会议论文汇编[C];2011年
5 钟玉平;林军;周荣;;甲强龙治疗急性脊髓损伤的临床观察[A];2004年浙江省骨科学术会议论文汇编[C];2004年
6 赵庆华;贾连顺;;急性脊髓损伤药物临床试验研究现状[A];第八届全国脊柱脊髓损伤学术会议论文汇编[C];2007年
7 周先虎;冯世庆;孔晓红;陈家童;李晖;侯巍;王沛;郭世绂;;自体激活冒旺细胞移植治疗急性脊髓损伤的实验研究[A];第八届全国脊柱脊髓损伤学术会议论文汇编[C];2007年
8 王秋莎;;高压氧联合激素治疗急性脊髓损伤52例[A];中华医学会第十三次全国高压氧医学学术会议论文汇编[C];2004年
9 张伦;王文涛;;急性脊髓损伤救治探讨[A];中国医师协会神经外科医师分会首届全国代表大会论文汇编[C];2005年
10 万勇;徐磊;谢显彪;;重组人红细胞生成素治疗大鼠急性脊髓损伤的实验研究[A];第八届全国脊柱脊髓损伤学术会议论文汇编[C];2007年
相关博士学位论文 前10条
1 杨立利;急性脊髓损伤后外周血淋巴细胞亚群的改变及其意义[D];第二军医大学;2003年
2 吴玉杰;急性脊髓损伤的药物治疗研究[D];第二军医大学;2006年
3 唐勇;大鼠急性脊髓损伤后肺水肿的机制及黄芪多糖对肺水肿的保护作用的初步研究[D];第二军医大学;2010年
4 王慧敏;中药治疗急性脊髓损伤的实验研究[D];广州中医药大学;2001年
5 孙刚;急性脊髓损伤后某些血清元素的变化及其临床意义[D];山东大学;2004年
6 侯勇;诱发电位在实验性急性脊髓损伤中的应用研究[D];山东大学;2004年
7 马天文;表皮局部制冷致硬膜外亚低温对兔急性脊髓损伤的影响[D];复旦大学;2005年
8 叶添文;急性脊髓损伤与高血糖的基础与临床研究[D];第二军医大学;2005年
9 刘阳;FK506治疗急性脊髓损伤的实验研究[D];大连医科大学;2009年
10 张磊;VEGF修饰胚胎神经干细胞移植治疗大鼠急性脊髓损伤的实验研究[D];华中科技大学;2007年
相关硕士学位论文 前10条
1 梁振星;赖氨酰氧化酶在大鼠急性脊髓损伤后细胞内表达的实验性研究[D];华北理工大学;2015年
2 吕越昌;Neuroserpin对大鼠急性脊髓损伤后神经功能的修复作用及其机制的初步研究[D];复旦大学;2013年
3 杨贝贝;脊髓损伤模型大鼠鞘内注射甲基强的松龙后的蛋白质组学变化[D];新疆医科大学;2015年
4 李磊;赖氨酰氧化酶在大鼠急性脊髓损伤修复过程中的作用[D];华北理工大学;2015年
5 白晶晶;急性脊髓损伤脑脊液中差异蛋白组学的研究[D];新疆医科大学;2015年
6 贾志强;大鼠急性脊髓损伤后线粒体的形态与功能的时间表征[D];辽宁医学院;2015年
7 刘建成;隔日限食疗法对大鼠急性脊髓损伤后神经保护作用的机制研究[D];成都中医药大学;2015年
8 王鸿丽;急性脊髓损伤及电针治疗大鼠的比较蛋白质组研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2009年
9 逯强;褪黑素对大鼠急性脊髓损伤保护作用的实验研究[D];中国医科大学;2006年
10 张建军;应用SELDI-TOF-MS技术对大鼠急性脊髓损伤后脑脊液蛋白组学的研究[D];新疆医科大学;2011年
，
本文编号：
2421608
