HMGB1参与异种心脏移植急性血管性排斥反应的初步研究

发布时间：2019-07-24 11:07

【摘要】：目的:通过EP阻断HMGB1表达,研究HMGB1在异种心脏移植急性血管性排斥反应(AVR)中的作用。方法:以SD大鼠为受体,ICR小鼠为供体,运用改良Cuff法建立小鼠至大鼠颈部异位心脏移植模型,作为研究AVR的动物模型。将实验分为两组:模型对照(CON)组(n=5):心脏移植后每6小时给予实验组同剂量的生理盐水腹腔内注射;丙酮酸乙酯(EP)处理组(n=5):移植手术即刻给予HMGB1阻断剂EP(40mg/kg大鼠体重)注射液腹腔内注射,以后每6小时重复注射一次,直至研究终点。移植心脏跳动超过12小时表明移植成功。以心脏移植物停跳为研究终点,观察比较两组心脏移植物存活时间的差别。HE染色观察各组心脏移植物病理变化。ELISA检测各组大鼠血清中干扰素γ(IFN-γ)、白介素17A(IL-17A)的表达。PCR法检测各组心脏移植物中的HMGB1、晚期糖基化终产物受体(RAGE)、toll样受体4(TLR4)、白介素6(IL-6)、IL-17A、IFN-γ的表达。使用Anti-Myeloperoxidase抗体、Anti-CD3抗体、Anti-Cytokeratin 20抗体行免疫组织化学染色观察炎症细胞浸润情况。结果:1.运用改良Cuff法建立的小鼠至大鼠颈部异位心脏移植模型对照组心脏移植物平均存活时间38.80±13.16h,而EP处理组心脏移植物平均存活时间91.20±18.20h,EP处理延长了异种心脏移植物存活时间(P0.05)。2.对照组的心脏移植物在移植终点产生主要的AVR,以大量间质出血、血管内血栓形成、中等的单核细胞浸润为特征。而EP处理组移植在48h时表现出缓和的病理损害,但在移植终点时也产生了主要的AVR。3.对照组在移植终点大鼠血清中IFN-γ浓度为64.89±23.81pg/ml,EP处理组移植48h后大鼠血清中IFN-γ浓度为48.77±5.88pg/ml,较对照组移植终点降低(P0.05),对照组大鼠在移植终点血清中IL-17A浓度为5.62±1.14pg/ml,EP处理组移植48h后大鼠血清中IL-17A浓度为3.42±0.67pg/ml,较对照组移植终点降低(P0.05)。4.对照组移植终点心脏移植物中的HMGB1及其受体RAGE、TLR4均高表达,心脏移植物中大鼠炎性因子IL-17A、IL-6、IFN-γ均高表达,而EP处理组移植48h后其表达均在较低水平,差异有统计学意义(P0.01)。5.免疫组织化学染色中,EP处理组移植48h后心脏移植物与对照组移植终点的心脏移植物相比显著抑制中性粒细胞(MPO+细胞)、T细胞(CD3+细胞)、和B细胞(CD20+细胞)浸润。结论:1.细胞外HMGB1是异种心脏移植中AVR的重要引发介质。2.运用EP阻断HMGB1后可减少炎性因子的分泌,减轻炎症细胞的浸润,从而有效延长异种心脏移植物生存时间。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R654.2

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