异丙酚通过SIRT1信号通路减轻肝脏缺血再灌注损伤

发布时间：2019-09-20 23:17

【摘要】：背景与目的:异丙酚在多种器官中具有保护作用,包括肝脏。Sirt1是一种NAD+依赖的去乙酰化酶,具有抗炎和抗氧化作用,本研究的目的在于探讨异丙酚的肝保护作用是否与Sirt1蛋白有关。方法:小鼠应用异丙酚预处理后构建肝脏缺血再灌注损伤模型,通过评估肝功能、氧化应激水平、抗氧化能力、细胞因子表达量和细胞凋亡标志蛋白探讨异丙酚对肝脏缺血再灌注损伤的影响。并通过免疫组化和蛋白免疫印迹实验评估Sirt1表达量,通过蛋白免疫印迹实验评估NF-κb/p65、IκBα、Bcl-2和Bax的表达含量。结果:小鼠经过肝脏70%缺血再灌注手术后,给予异丙酚预处理能够减轻肝损伤、提升抗炎和抗氧化应激能力,以及减少肝细胞凋亡水平。另外,本研究还表明异丙酚通过介导Sirt1蛋白过表达和抑制NF-κB蛋白表达减轻肝脏缺血再灌注损伤。结论:本研究是首次证实异丙酚预处理能够通过调控Sirt1蛋白表达,增加抗炎和抗氧化应激能力,减轻肝脏缺血再灌注损伤。本研究表明异丙酚可能是减轻肝胆外科手术中肝缺血再灌注损伤的有效治疗策略。
【图文】：

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第 3 章实验结果第 3 章实验结果3.1 肝脏缺血再灌注损伤模型构建2%的戊巴比妥钠按照 50mg/kg 的剂量腹腔注射麻醉小鼠，麻醉成功后，仰卧位固定小鼠的头部和四肢，参考文献以制备 70%肝脏缺血模型。取上腹正中切开进腹，暴露肝脏，分离韧带和系膜，显露第一肝门。用无创血管夹钳夹供应肝中叶和左叶的血管分支，造成 70%的肝脏缺血，保持肝右叶和尾状叶血液通畅，避免造成门脉系统的淤血，持续 45min 后松开血管夹恢复血流，用 0 号丝线缝合切口。

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图 3.2 异丙酚减轻肝脏缺血再灌注损伤：(A) 70%肝脏缺血再灌注 4 小时和 24 小时候，sham和实验组血清 AST 和 ALT 的表达水平；（B）70%肝脏缺血再灌注 4 小时后，sham 和实验组肝脏组织学H&E染色（×40, ×100）（；C）Suzuki评分。(X±S), *P<0.05与WT组比较, &P<0.05与 intralipid 组比较, ΔP<0.05 与 sham 组比较; #P<0.05 与 IR4h 组比较, n=6 只每组。3.3 异丙酚减轻肝脏缺血再灌注的氧化应激、炎症和细胞凋亡水平炎症和氧化应激是早期缺血再灌注损伤的主要机制，为了评估异丙酚预处理对肝脏炎症和氧化应激水平的影响，我们收集了缺血再灌注 4h 时点的血液和组织样本，检测抗氧化酶 SOD 的活性和膜脂质过氧化指标 MDA 的水平。如图 3.3所示，与 IR4h 组比较，IR4h+Pro0.1 组 MDA 含量明显下降，而 SOD 活性明显上升，，表明异丙酚预处理能够减轻肝脏缺血再灌注的氧化应激。另外，我们还应用 ELISA 法评估了细胞因子 TNF-α 和 IL-6 水平，结果显示与 IR4h 组比较，IR4h+Pro0.1 组 TNF-α 和 IL-6 的血清含量明显降低，表明异丙
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R614

【参考文献】