锌离子的变化对大鼠脊髓损伤影响的相关研究

发布时间：2019-11-17 10:57

【摘要】：第一部分:大鼠脊髓损伤后caspase-9表达和脊髓神经细胞凋亡相关性研究目的:研究Allen‘s法致大鼠脊髓损伤后不同时间点脊髓神经细胞凋亡及caspase-9的表达及意义。方法:成年SD大鼠30只,随机分为3组:空白组10只大鼠。假手术组10是大鼠(SD大鼠不损伤脊髓仅行椎板减压)。手术组10只大鼠(损伤脊髓)。3组分别在处理前做CBS评分,对应的6h、12h、24h时间点做CBS评分后取材,所得脊髓标本行HE染色,TUNEL染色及免疫组化检测caspase-9的表达。结果:3组大鼠术前CBS评分均为100分,术后手术组评分明显降低,而假手术组与空白组基本无变化。HE染色结果显示:手术组不同时间点脊髓组织的充血水肿明显,而空白组和假手术组未见明显改变。TUNEL检测结果显示:空白组和假手术组不同时间点仅有少量脊髓神经细胞凋亡,而手术组在不同时间点脊髓神经细胞凋亡与其他两组比较明显升高,其中12h时凋亡细胞最多。免疫组化检测结果显示:在假手术组和空白组偶见。手术组随时间推移逐渐增多且在12h时达最高峰,与空白组及假手术组比较,手术后不同时间点损伤脊髓组织中Caspase-9的表达均明显升高,(P0.05)。12h和24h手术组损伤脊髓组织中Caspase-9的表达高于6h手术组(P0.05);24h和12h手术组Caspase-9的表达量差异无统计学意义(P0.05),。结论:重物打击大鼠脊髓损伤后出现神经细胞凋亡,且此凋亡的发生可能与Caspase-9的表达有关。第二部分:大鼠脊髓损伤后锌离子变化与caspase-9表达之间的相关性研究目的:研究Allen‘s法致大鼠脊髓损伤后不同时间点脊髓中的锌离子的变化,探讨锌离子与caspase-9之间相关性。方法:成年SD大鼠72只,重量在200-250g。分为3组,空白组16只。假手术组16只(不损伤脊髓,大鼠仅行椎板减压)。手术组40只。3组分别在处理前做CBS评分,对应的6h、12h、24h时间点做CBS评分后取材,所得脊髓标本行微量元素检测,HE、TUNEL、免疫组化检测。。结果:3组大鼠脊髓中含有锌离子,且浓度含量不高。空白组、假手术组与手术组相比三组锌离子浓度有差异无统计学意义。结论:大鼠脊髓损伤后,损伤段锌离子的总体浓度与Caspase-9表达之间无关联,对于锌离子是否参与脊髓细胞凋亡还需经一步研究。
【图文】：

病理改变,脊髓,灰质,神经元

与空白对照组比较：**P＜0.01，与假手术组比较：## P＜0.012 不同组大鼠脊髓组织病理改变结果光镜下结果显示：假手术组组织结构完好（图1A）。手术组6 h时脊髓结构出现破坏，损伤节段灰质出血水肿（图1 B图中箭头所示区域）严重并出现神经元坏死，前后角神经元存在。手术组12h时脊髓破坏进一步加重，灰质中有少量神经元，仅存在后角；白质中可见肿胀轴突和大量空泡（图1 C箭头所示区域）。24h时脊髓结构破坏和神经元坏死区域从损伤节段向周围扩散，损伤程度与12h相比没有明显差别。表 3 大鼠脊髓损伤后不同时间点 CBS 评分值（x±s）术前术后 6h 术后 12h 术后 24h空白组 100±0 100±0 100±0 100±0假手术组 100±0 97.5±0.5 97.86±0.25 97.5±0.5手术组 100±0 5.5±0.86**##8.0±2.0**##7.33±1.44**##

细胞凋亡,情况,凋亡,细胞数

3 TUNEL法检测脊髓组织中细胞凋亡情况结果利用光学显微镜观察3组TUNEL染色的切片，阳性细胞即为凋亡细胞，，凋亡的细胞呈紫蓝色，凋亡的细胞核呈现褐色。假手术组偶有阳性细胞的表达，且数量很少。（图2A箭头所指）不同时间点手术组脊髓组织中凋亡的细胞数均比假手术组和空白组明显升高（P<0.05）。手术组在6h时出现阳性细胞，主要位于灰质（图2B箭头所示），此后逐渐增多，在12h阳性细胞素达最高（图2C箭头所示）。手术组在12h、24h时脊髓组织中凋亡的细胞数均高于6h时（P<0.05）；手术组在12h和24h时凋亡的细胞数无差异无统计学意义（P>0.05）。具体数值见（表4）。A 假手术组 B 手术组术后 6h C 手术组术后 12h D 手术组术后 24h图2 脊髓组织细胞凋亡情况（TUNEL×200）
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R651.2

【共引文献】