间接共培养人髌下脂肪垫干细胞与骨关节炎软骨细胞的实验研究

发布时间：2020-03-23 06:25

【摘要】：目的将人髌下脂肪垫干细胞(IPFPSCs)及骨关节炎软骨细胞(OACs)进行间接共培养,促进OACs软骨表型的恢复及诱导IPFPSCs向软骨细胞分化。方法体外分离、培养人IPFPSCs及OACs,分为单独IPFPSCs组、单独OACs组及IPFPSCs和OACs间接共培养组,体外成软骨诱导21 d后,通过HE染色、Alcian蓝染色、免疫荧光细胞染色检测细胞的形态学,1型胶原蛋白(Coll)、Col2、CollO、聚集蛋白聚糖(aggrecan)及SOX-9的表达情况(各组细胞成软骨诱导分化情况)。结果共培养组OACs聚集成微球,IPFPSCs呈椭圆形;单独组OACs聚集分布,排列松散,单独组IPFPSCs呈长梭形。HE染色显示共培养组OACs聚集成团,核染色深,IPFPSCs呈椭圆形,胞质丰富,呈旋涡状生长;单独组OACs聚集分布,核染色浅;单独组IPFPSCs呈长梭形,核染色浅。阿尔新蓝染色显示共培养组OACs及IPFPSCs蛋白多糖分泌多,单独OACs及IPFPSCs组分泌少。免疫荧光染色显示共培养组IPFPSCs及OACs中Co12、aggrecan及SOX-9表达较强,Col 1与Co110表达较弱;而单独培养的IPFPSCs及OACs组则相反。结论IPFPSCs和OACs间接共培养可以促进OACs软骨细胞表型的恢复及诱导IPFPSCs向软骨细胞分化。
【图文】：

３？第邋３邋代邋ＩＰＦＰｓ邋（４０邋倍）；逦４？第邋３邋代邋ＩＰＦＰｓ邋（１００邋倍）逡逑图２细胞形态学逡逑２．２单独培养ＩＰＦＰＳＣｓ组、单独培养ＯＡＣｓ组、ＩＰＦＰＳＣｓ和ＯＡＣｓ逡逑间接共培养组中ＯＡＣｓ及ＩＰＦＰＳＣｓ逡逑间接共培养组ＩＰＦＰＳＣｓ呈椭圆形，，排列紧密，旋涡样生长，细胞逡逑外基质较多，ＯＡＣｓ自发聚集成微球状，聚集紧密，细胞密度高；单逡逑独ＩＰＦＰＳＣｓ大多数呈长梭形，形态转变少，细胞外基质少，单独ＯＡＣｓ逡逑聚集分布，排列较松散，细胞密度低。详见图３。逡逑

外基质较多，ＯＡＣｓ自发聚集成微球状，聚集紧密，细胞密度高；单逡逑独ＩＰＦＰＳＣｓ大多数呈长梭形，形态转变少，细胞外基质少，单独ＯＡＣｓ逡逑聚集分布，排列较松散，细胞密度低。详见图３。逡逑２６逡逑
【学位授予单位】：湖南师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R684.3

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本文编号：2596334