骨盆骨折尿道损伤临床探讨和压力性尿失禁的膜片治疗的实验研究

发布时间：2020-04-29 16:25

【摘要】：目的:本研究回顾性分析在我院行经会阴尿道成形术的骨盆骨折尿道损伤患者,明确尿道成形术后狭窄复发的危险因素。压力性尿失禁是骨盆骨折尿道损伤的并发症之一,我们应用脂肪干细胞膜片结合纳米纱构建组织工程吊带和膜片碎片尿道内注射两种方式,从组织学,尿流动力学方面探讨膜片技术对压力性尿失禁的治疗效果。材料和方法:回顾性分析2005-2015年间在我院行经会阴尿道成形术的928例骨盆骨折尿道损伤患者,年龄,具体损伤原因,狭窄部位,狭窄长度,急诊处理方式,之前手术失败史,并发伤和手术处理方式,明确尿道成形术后狭窄复发的危险因素。应用脂肪干细胞膜片结合水纺纳米纱构建组织工程吊带,扫描电子显微镜(SEM)观察纳米纱和膜片的微观结构,HE,masson染色观察膜片和尿道的组织学改变,漏尿点压力检测各组的尿流动力学变化。脂肪干细胞膜片碎片尿道内注射,漏尿点压力检测各组的尿流动力学变化,免疫组化和免疫荧光检测平滑肌,血管和神经的转化情况。结果:单因素分析发现急诊处理方式,失败的尿道内切开,失败尿道成形术,前列腺移位,狭窄长度可以影响尿道成形术的手术复发率,而进一步多因素分析发现两次以上的尿道内切开,失败的尿道成形术,前列腺移位和狭窄长度大于3cm为经会阴尿道成形术术后复发的危险因素。SEM检测显示纳米纱孔径较传统纳米纤维大,更利于细胞生长。组织学检测发现膜片纳米纱吊带细胞排列规则紧密,与尿道融合更好,尿流动力学与正常组无明显差异。膜片碎片尿道内注射,可以恢复尿流动力学改变,同时更多的细胞分化为平滑肌细胞,同时促进血管和神经再生。结论:经会阴尿道成形术时,前列腺移位,狭窄长度大于3cm,之前有失败尿道成形术病史和两次以上内切开病史是术后狭窄复发的高危因素。膜片纳米纱吊带可以使吊带在与尿道交界产生大量胶原,与尿道融合较好,同时细胞排列紧密规则,增加了吊带的机械性能。膜片碎片尿道内注射可以增强细胞在尿道内的存活时间,同时更多的细胞分化为平滑肌细胞,同时促进血管和神经再生。这两种方式为压力性尿失禁的治疗提供了新的方向。
【图文】：

3. 结果3.1 脂肪干细胞形态学特征及成脂、成骨诱导我们应用老鼠腹股沟脂肪组织，通过酶消化法成功培养出了脂肪干细胞，脂肪干细胞培养 24h 贴壁，2 天后，细胞融合度达 50%，细胞形态较为一致呈短梭形（图 1A）。初次传代后，3 天可以再次达到融合状态。我们选取第二代进行成脂和成骨诱导。脂肪干细胞给予成脂诱导液孵育 21 天后，用油红 O 脂肪染色法染色，发现细胞质内染成红色的脂肪滴出现（图 1B）。同样给予成骨诱导液孵育 21 天后，茜素红染色发现细胞外有染成橘红色的钙盐沉积。综上，原代培养的脂肪干细胞有成脂和成骨分化能力。

3.2 脂肪干细胞表型鉴定：取第二代脂肪干细胞用流式细胞学技术检测干细胞相关抗原 CD29CD45，CD90，，其中 CD29，CD44，CD90 为干细胞表面标记物，CD45 为表面标记物，结果显示，CD29，CD44，CD45，CD90 的阳性率分别为：（图 2A）、99.41%（图 2B）和 0.15%（图 2C）96.37%（图 2D），因此，细胞表达干细胞标记物，不表达血细胞标记物。符合脂肪干细胞表型标
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R683.3;R699.6

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本文编号：2644766