鸦胆子油乳对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响及其机制的初步探讨

发布时间：2020-04-29 17:04

【摘要】：目的:研究鸦胆子油乳(Brucea javanica oil emulsion,BJOE)对增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblasts,HSFs)增殖、I型胶原合成、波形蛋白(Vimentin)表达量和ERK1/2 MAPK信号通路的影响。方法:收集人来源增生性瘢痕组织,行HSFs体外培养及鉴定;以不同浓度(0.5、1、5、10、20、50mg/ml)的BJOE作用HSFs 24h后,计算出24h半数抑制浓度(IC50)。实验分为两组:以近IC50浓度的BJOE作用HSFs 24、48、72h为实验组,对照组为常规培养的HSFs,采用CCK-8法检测HSFs的增殖和活力,观察近IC50浓度的BJOE作用HSFs 24h后细胞的形态学变化,采用流式细胞术(FCM)进行细胞的周期检测。采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测I型胶原、波形蛋白、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及其磷酸化蛋白p-ERK1/2的表达。结果:BJOE的24h IC50为1.176mg/ml,故选择1mg/ml浓度的BJOE进行后续实验。在1mg/ml浓度的BJOE下作用HSFs 24、48、72h后,BJOE对HSFs的抑制率分别为(53.13±2.40)%、(75.07±2.67)%、(88.65±0.32)%,差异具有统计学意义(P0.05)。BJOE作用下HSFs数目明显减少,细胞间隔增宽,细胞突起明显缩短,甚至消失,细胞变圆。实验组S期细胞百分比逐渐减少,HSFs中I型胶原、波形蛋白和p-ERK1/2的表达明显受到抑制(P0.05),而ERK1/2的表达无明显变化(P0.05)。结论:鸦胆子油乳对HSFs的增殖及I型胶原的合成具有抑制作用,其机制与抑制ERK1/2磷酸化及波形蛋白的表达有关。
【图文】：

生长曲线,鸦胆子油乳,增生性瘢痕成纤维细胞,抑制率

别为（36.78±2.09）%、（53.13±2.40）%、（64.72±1.61）%、（70.28±1.37）%、（72.10±1.51）%、（73.52±1.42）%。并绘制生长曲线图，见图2-1。药物浓度在0.5~5mg/ml之间，BJOE浓度越高，，对HSFs的生长抑制率越高。且具有统计学意义（p<0.05）。药物浓度大于5mg/ml后，BJOE对HSFs的抑制率仍呈上升趋势，但无统计学意义 (p>0.05)。BJOE对HSFs的24h IC50为1.176mg/ml，故选择1mg/ml浓度的BJOE进行后续实验。(2) 1mg/ml浓度鸦胆子油乳作用增生性瘢痕成纤维细胞不同时间的时-效关系：1mg/ml浓度BJOE作用HSFs24、48、72h后的抑制率分别为（53.13±2.40）%、（75.07±2.67）%、（88.65±0.32）%，绘制生长曲线。见图2-2。随着时间的延长，BJOE对HSFs的抑制率呈上升趋势。差异具有统计学意义（p<0.05?

生长曲线,增生性瘢痕成纤维细胞,鸦胆子油乳,抑制率

-效关系：1mg/ml浓度BJOE作用HSFs24、48、72h后的抑制率分别为（53.13±2.40）%、（75.07±2.67）%、（88.65±0.32）%，绘制生长曲线。见图2-2。随着时间的延长，BJOE对HSFs的抑制率呈上升趋势。差异具有统计学意义（p<0.05）。图 2-1不同浓度鸦胆子油乳作用下对增生性瘢痕成纤维细胞的抑制率图2-21mg/ml 浓度鸦胆子油乳在不同时间作用下对增生性瘢痕成纤维细胞的抑制率
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R622

【参考文献】