缝隙连接改造剂对右美托咪定引起的心肌电生理特性改变的影响及机制探讨

发布时间：2020-05-01 23:12

【摘要】：目的:观察缝隙连接改造剂对右美托咪定引起的心肌电生理特性改变的影响,并探讨其可能机制。方法:健康成年SD大鼠18只,雌雄不拘,体重(300±30)g,制备Langendorff离体心脏灌注模型,K-H液平衡灌注15 min后,随机分为三组(n=6):空白对照组(C组)继续灌注37℃K-H液30 min;右美托咪定组(D组)灌注含50 ng/ml右美托咪定的K-H液30 min,右美托咪定+ZP123组(ZD组)灌注含50 ng/ml右美托咪定+80 nmol/L ZP123的K-H液30min。于平衡灌注15 min(T_0)末、继续灌注15 min(T_1)、30 min(T_2)时记录心率(heart rate,HR),内层心肌和外层心肌单相动作电位(monophasic action potential,MAP),并计算50%单相动作电位时程(50%monophasic action potential duration,MAPD_(50)),90%单相动作电位时程(90%monophasic action potential duration,MAPD_(90)),单相动电位振幅(monophasic action potential amplitude,MAPA)和最大去极化速度(maximum rate of depolarization,Vmax)。给药30 min后行程控刺激和S1S1增频电刺激,分别用以记录左心室有效不应期(ventricular effective refractory period,VERP)和最早诱发室性心律失常(ventricular arrhythmia,VA)的起搏周长(pacing cycle length,PCL)记作诱发VA的PCLmax(VA-PCLmax),记录VA发生情况,并计算VERP与MAPD_(90)的比值(VERP/MAPD_(90)比值)。实验结束后,取左心室心肌,运用蛋白印迹法(western blot,WB)和免疫组织化学法检测左心室心肌(connexin43,Cx43)蛋白的表达。结果:与T_0时比较,T_1、T_2时D组HR明显减慢(P0.05);T_1、T_2时D组HR明显慢于C组和ZD组(P0.05),C组和ZD组各时点HR组间差异无统计学意义(P0.05)。与T_0时比较,T_1、T_2时D组心肌MAPD_(50)、MAPD_(90)明显延长(P0.05);T_1、T_2时D组心肌MAPD_(50)、MAPD_(90)明显长于C组和ZD组(P0.05),C组和ZD组各时点MAPD_(50)、MAPD_(90)组间差异均无统计学意义(P0.05)。三组内外两层心肌MAPA和Vmax组间差异均无统计学意义(P0.05)。与C组比较,D组VERP延长(P0.05),VERP/MAPD_(90)比值减小(P0.05),VA-PCLmax延长(即诱发VA的阈值降低)(P0.05),VA发生率升高(P0.05);与D组比较,ZD组VERP明显缩短(P0.05),VERP/MAPD_(90)比值增大(P0.05),VA-PCLmax缩短(即诱发VA的阈值增高)(P0.05),VA发生率降低(P0.05);与C组比较,ZD组VERP缩短(P0.05),VERP/MAPD_(90)比值,VA-PCLmax和VA发生率组间差异均无统计学意义(P0.05)。生化指标显示,与C组相比,D组心肌组织Cx43表达下调,端端连接比例下降(P0.05)。与D组比较,ZD组Cx43表达上调,且端端连接比例有所增加(P0.05)。C组和ZD组相比,Cx43表达组间差异无统计学意义(P0.05)。结论:缝隙连接改造剂ZP123通过上调Cx43蛋白的表达,可逆转右美托咪定引起的心肌电生理特性的改变。
【图文】：

有效不应期,间期

图 1-2 有效不应期的记录Fig.1-2 the record of effective refractory period1.2.7.3 诱发 VAVERP 记录结束后，采用 DF-5A 心脏刺激仪，行 S1S1 增频电刺激诱发 VA。设置 S1S1 间期即 PCL 为 250 ms，设置刺激时间 5 s，设置 PCL 递减间期 5 s，，设置两次刺激间隔 5 s，VA 持续时间超过 2 s 即定义为 VA 可诱发，PCL=60 ms仍未诱发 VA，记录诱发 VA 的 PCL 定义为<60 ms。记录最早诱发 VA 的 PCL 记作诱发 VA 的 PCLmax（VA-PCLmax）和 VA 的发生情况，记录的 VA 的诱发见图 1-3。

室性心律失常,间期

图 1-2 有效不应期的记录Fig.1-2 the record of effective refractory period1.2.7.3 诱发 VAVERP 记录结束后，采用 DF-5A 心脏刺激仪，行 S1S1 增频电刺激诱发 VA。设置 S1S1 间期即 PCL 为 250 ms，设置刺激时间 5 s，设置 PCL 递减间期 5 s，设置两次刺激间隔 5 s，VA 持续时间超过 2 s 即定义为 VA 可诱发，PCL=60 ms仍未诱发 VA，记录诱发 VA 的 PCL 定义为<60 ms。记录最早诱发 VA 的 PCL 记作诱发 VA 的 PCLmax（VA-PCLmax）和 VA 的发生情况，记录的 VA 的诱发见图 1-3。
【学位授予单位】：贵州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R614

【参考文献】