富氢盐水对大鼠烧伤后急性肾损伤的保护作用及相关机制研究

发布时间：2020-05-06 14:18

【摘要】：目的探讨富氢盐水对大鼠烧伤后急性肾损伤的保护作用并对其相关机制进行研究。方法将56只SD大鼠按随机数表法随机分为分为假伤组(8只)、烧伤组(24只)、富氢盐水组(24只)。假伤组大鼠背部采用温水浴(20 ℃,15 s)模拟致伤,烧伤组和富氢盐水组大鼠背部采用沸水浴法(100℃,15 s)致Ⅲ度30%TBSA的重度烫伤(以下称烧伤)。富氢盐水组大鼠伤后立即一次性腹腔注射富氢水10mL/kg,假伤组和烧伤组大鼠伤后立即注射同等剂量生理盐水。假伤组于伤后72 h,烧伤组和富氢盐水组分别于伤后6、24、72h选取8只大鼠,取腹主动脉血后处死取肾脏组织,行苏木素-伊红染色观察组织病理学情况和损伤评分,临床血生化分析仪测定血肌酐和血尿素氮水平,免疫组织化学染色观察肾脏组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6的表达分布,实时荧光定量反转录-聚合酶链反应检测肾脏组织中TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达,蛋白质印迹法检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的蛋白表达。对数据行Kruskal-Wallis检验、Dunn's检验、单因素方差分析、Bonferroni事后检验。结果(1)假伤组大鼠伤后72h肾小管管腔结构完整,无炎性细胞浸润、细胞变形坏死。烧伤组大鼠自伤后6h肾小管结构逐步开始出现细胞空泡变形、管腔内碎裂蛋白聚集等损伤变化,并随着时间增加,损伤变化逐步加重。富氢盐水组大鼠肾脏组织伤后各时间点损伤情况较烧伤组同时间点有不同程度的减轻。与假伤组伤后72h比较,烧伤组、富氢盐水组大鼠伤后6、24、72h的肾小管损伤评分均明显升高(p0.05);与烧伤组比较,富氢盐水组大鼠伤后6、24、72h的肾小管损伤评分均明显下降(P0.05)。(2)除富氢水组伤后6、72 h外(p0.05),烧伤组和富氢盐水组大鼠余时间点血肌酐水平明显高于假伤组伤后72 h(p0.01);除富氢盐水组伤后6 h外(p0.05),烧伤组和富氢盐水组大鼠余时间点血尿素氮水平明显高于假伤组伤后72 h(p0.01)。富氢盐水组大鼠伤后6、24、72 h血肌酐和血尿素氮水平分别明显低于烧伤组相应时间点(p0.05)。(3)假伤组大鼠伤后72h肾脏组织中有一定程度的TNF-α、1L-1β、IL-6阳性表达,主要集中在肾小管上皮细胞细胞质。烧伤组大鼠伤后6、24、72h肾脏组织中以上炎症因子的表达较假伤组多。富氢盐水组大鼠伤后各时间点肾脏组织中以上炎症因子的表达较烧伤组少。(4)与假伤组伤后72h比较,烧伤组大鼠伤后6、24、72h的TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达均明显增加(P0.01);富氢盐水组大鼠仅伤后6、24h的TNF-α的mRNA表达增加(p0.05或p0.01),伤后6h的IL-6的mRNA表达增加(p0.01)。与烧伤组各时间点比较,富氢盐水组大鼠除伤后6h的TNF-α的mRNA表达无明显差异外(p0.05),余各时间点的TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达均明显降低(p0.05)。(5)与假伤组伤后72 h(0.39±0.03)比较,烧伤组大鼠伤后6、24、72 h肾脏组织中HMGB1的蛋白表达(1.19±0.07、1.00±0.06、0.80±0.05)均明显上调(p0.05),而富氢盐水组大鼠伤后6、24、72 h肾脏组织中HMGB1的蛋白表达(0.35±0.08、0.47±0.06、0.42±0.06)无明显差异(p0.05)。与烧伤组比较,富氢盐水组大鼠伤后6、24、72 h肾脏组织中HMGB1的蛋白表达均明显下调(p0.05)。结论富氢盐水可以一定程度减轻重度烧伤大鼠急性肾损伤,而其这一作用通过调控肾脏组织炎症因子释放实现。
【图文】：

细胞及裂解的蛋白质聚集等典型损伤表现并随着时间增加，，损伤变化逐步加重。逡逑富氢盐水组大鼠肾脏组织伤后各时间点损伤情况较烧伤组同时间点有不同程度的逡逑减轻。见图１。逡逑W逡逑W＿＿逡逑图１假伤及烧伤各组大鼠伤后各时间点肾脏组织病理学观察逡逑苏木素－伊红Ｘ４００，图中标尺为５０邋ｐｍ。１Ａ．假伤组伤后７２邋ｈ肾皮质组织中肾逡逑小管管腔结构完整，肾小管上皮细胞规律排列，无炎性细胞浸润、细胞变形坏死。逡逑１Ｂ、１Ｃ、１Ｄ．分别为烧伤组伤后６、２４、７２ｈ肾皮质组织结构变化，均可见肾小管逡逑明显的空泡化及变形（ ）、碎裂蛋白聚集（ ），具有这些损伤变现的肾小管数逡逑量，随着时间变化而增加；１Ｅ、１Ｆ、１Ｇ．分别分别为富氢盐水组伤后６、２４、７２邋ｈ逡逑肾皮质组织结构变化，分别较图１Ｂ、１Ｃ、ＩＤ肾脏俎织中出现损伤变化的肾小管逡逑数量明显减少，结构损伤有所缓解逡逑与假伤组伤后７２ｈ比较

主要集中在肾小管上皮细胞细胞质。烧伤组大鼠伤后６、２４、７２ｈ肾脏组织中以逡逑上炎症因子的表达较假伤组多。富氢盐水组大鼠伤后各时间点肾脏组织中以上炎逡逑症因子的表达较烧伤组少。见图２、图３、图４。逡逑图２假伤及烧伤各组大鼠伤后各时间点肾脏组织中肿瘤坏死因子ａ邋（ＴＮＦ－ａ）表逡逑徶（棕黄色）情况逡逑９逡逑
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R644;R692

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本文编号：2651403