兔离断后肢深低温保存灌注方法的改进

发布时间：2020-05-06 18:43

【摘要】：目的以兔离断后肢为模型,进一步改进二甲基亚砜(DMSO)灌注方法,并检验该灌注方法的有效性以及对复合组织深低温冻存的保护效果,为复合组织深低温冷冻再植提供理论依据。方法实验分两部分进行。第一部分:19%DMSO-30min+10%DMSO-10min改良灌注方法灌注兔离断后肢模型有效性的检测。取健康新西兰大白兔9只,获得18只兔离断后肢模型,随机分为1组、2组及3组,每组6只离断后肢模型。1组为改良灌注组,经股动脉给予19%DMSO灌注30min,继而给予10%DMSO灌注10min;2组为灌注组,经股动脉给予19%DMSO灌注40min;3组为对照组,经股动脉给予生理盐水(NS)灌注40min,用于磁共振波谱技术的基线调整。各组采用磁共振波谱技术定量测量相同部位血管、肌肉组织中DMSO的具体浓度,1组、2组获得的各样本数据进行对比,并行统计学分析。第二部分:兔离断后肢模型不同灌注方法经冷冻复温再植后微观形态学变化的观察。取健康新西兰大白兔24只,随机分为A组、B组、C组及D组,每组6只。A组为改良灌注组,首先经股动脉给予19%DMSO灌注30min,然后给予10%DMSO灌注10min;B组为灌注组,直接经股动脉给予19%DMSO灌注40min;C组为对照组,经股动脉给予生理盐水(NS)灌注40min;D组为空白组,不进行冷冻再植,直接取样本。A组、B组、C组先行兔右后肢离断,进行灌注后给予慢速冷冻、快速复温后再植并取样本,D组直接取新鲜样本,各样本行苏木精-伊红(HE)染色后标记并保存,观察并对比各组间血管、骨骼肌及神经微观形态学变化。结果第一部分:1组、2组血管周围DMSO浓度存在显著统计学差异,P值=0.0000004;1组血管周围DMSO平均浓度为6.8550±1.97581%;2组血管周围DMSO平均浓度为18.6367±0.35359%。1组、2组肌肉周围DMSO浓度无显著统计学差异,P值=0.784,1组肌肉周围DMSO平均浓度为9.4633±2.48194%,2组肌肉周围DMSO平均浓度为9.7517±1.54743%。第二部分:各组样本血管组织损伤程度:D组A组B组C组;各组样本肌肉、神经组织损伤程度:A组与B组损伤程度相当,明显优于C组,但与新鲜组D组相比,仍有较大差距。结论本实验证明,兔离断肢体模型经19%DMSO灌注30min后应用10%DMSO灌洗血管的改良灌注方法,可在保证肌肉内接近10%有效保护浓度的基础上,显著降低血管中DMSO浓度,从而降低了DMSO对血管的毒性损伤。
【图文】：

实验前行溶液配制图注：从右往左依次为①19%DMSO溶液②10%DMSO溶液③灌洗液

实验动物固定体位图注：行右后肢消毒、备皮，避免损伤手术区域皮肤，，固定四肢于操作台
【学位授予单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R658.1

【参考文献】

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本文编号：2651698