牛磺熊去氧胆酸经抑制Kupffer细胞功能对大鼠肝移植后肝脏缺血再灌注损伤的影响

发布时间：2020-05-10 07:18

【摘要】：目的:本实验旨在探讨牛磺熊去氧胆酸(Tauroursodeoxycholic Acid,TUDCA)经下调IRE1/TRAF2/NF-κB通路阻断Kupffer细胞功能对大鼠肝移植后肝脏缺血再灌注损伤的影响。方法:分离雄性Sprague Dawley(SD)大鼠Kupffer细胞培养,按不同浓度梯度给予TUDCA体外处理24h,收集细胞上清液并提取蛋白和mRNA进行分析。检测炎症因子、IRE1α/TRAF2/NF-κB通路活性、P65入核程度。雄性SD大鼠于术前3天经腹腔注射TUDCA(400mg/kg/d)或者等量生理盐水后,建立大鼠肝移植模型。各组大鼠分别于再灌注3h、6h、24h后收取肝组织标本以及血液标本进行分析。检测肝脏病理改变、肝功能、肝细胞凋亡程度、肝脏炎症因子、IRE1α/TRAF2/NF-κB通路活性。结果:TUDCA处理活化的Kupffer细胞后,IL-1β、IL-6、TNF-α(p0.05)分泌减少,并且IRE1α、TRAF2、p-IKKα、p-IκB、p-P65表达降低(p0.05),P65入核程度降低。TUDCA干预大鼠肝移植模型后,肝组织中气球样变性、点灶坏死,汇管区大量中性粒细胞、淋巴细胞浸润,肝血窦变窄等病理改变显著减轻,肝功能标志物水平下降(p0.05)、肝实质细胞凋亡数量减少(p0.05),并且IL-1β、IL-6、TNF-α分泌减少(p0.05),IRE1α、TRAF2、p-IKKα、p-IκB、p-P65表达降低(p0.05)。结论:TUDCA能够减轻大鼠肝移植后肝脏缺血再灌注损伤程度,其机制可能是经下调IRE1α/TRAF2/NF-κB通路活性抑制了Kupffer细胞功能。结论:TUDCA能够减轻大鼠肝移植后肝脏缺血再灌注损伤程度,其机制可能是经下调IRE1α/TRAF2/NF-κB通路活性抑制了Kupffer细胞功能。
【图文】：

肝脏缺血再灌注损伤,肝细胞凋亡,炎症因子

TUNEL 实验对各组肝组织中肝细胞凋亡程度的分析。（A）Sham 组；（B）I/R 组；（C）I/R+TUDCA组；（D）各组凋亡指数分别为 5±3.2、56±17.5 、29±12.3，*p＜0.05。图 5 TUDCA 有效的减轻肝移植后肝脏缺血再灌注损伤引起的肝细胞凋亡。Fig 5. TUDCA alleviates the degree of apoptosis of hepatic cells induced by hepatic I/Rinjury.2.6.TUDCA 能够抑制 Kupffer 细胞功能减轻 I/R 引起的炎症反应Kupffer 细胞的活化以及其下游炎症因子在肝移植后肝脏缺血再灌注损伤的进程中有着重要的作用。首先，我们提取各时间大鼠血清标本，对各组标本中 IL-1β、IL-6 以及 TNF-α表达水平进行了检测。根据 ElISA 实验结果（图 6A），于Sham 组相比，I/R 组血清中，IL-1β、TNF-α以及 IL-6 显著升高，，但是 TUDCA 组较 I/R 组相比，上述各指标显著下降。因此我们认为 TUDCA 能够在体内经下调Kupffer 细胞各炎症因子的表达，从而减轻肝脏缺血再灌注损伤引起的肝脏炎症反
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R657.3

【参考文献】