新型磷酸钙颗粒治疗兔股骨头坏死的探究

发布时间：2020-06-16 14:24

【摘要】：背景股骨头坏死是一种常见的骨科疾病,在手术治疗中常用到的一种手术方式是不带血运的骨移植术,是指将自体骨或骨替代材料填压到坏死区域,从而促进坏死骨组织的修复。作为骨替代材料的一种,磷酸钙陶瓷因在化学成分上与天然骨质的成分更为接近,所以具有不错的前景。在该课题中我们致力于研制出一种性能优秀的磷酸钙材料,使其拥有令人满意的骨修复能力。方法使用a/β-磷酸三钙、聚乙二醇等为原料制备新型磷酸钙颗粒。通过X射线衍射分析、扫描电子显微镜、Micro-CT等方法检测颗粒的组成和性质。构建兔股骨头坏死模型并行影像学检测造模效果,再将颗粒植入造模后的兔股骨头内,于术后1个月、2个月时,使用Micro-CT对兔股骨头进行影像学评价和骨定量评价,使用软组织切片和HE染色法、天狼星红染色法对股骨头进行组织学评价。将颗粒浸提液与小鼠前成骨细胞MC3T3-E1共培养,使用CCK-8法检测颗粒对MC3T3-E1增殖的影响。将颗粒浸提液与成人骨髓间充质干细胞hMSC共培养,使用ALP染色和茜素红染色研究细胞ALP的活性和钙沉积情况。结果1.X射线衍射分析得出颗粒的主要成分为羟基磷灰石(HA)和α/β-磷酸三钙。扫描电镜下可见颗粒表面凹凸不平,周围沉积有HA结晶,颗粒表面与内部存在互通的孔道。Micro-CT显示大部分孔道的直径为0.11mm。2.体内实验:股骨头坏死的造模成功,影像学中可见清晰的钻孔隧道直到股骨头部位。Micro-CT结果显示,实验组坏死部位有骨小梁形成,对照组无明显骨小梁再生。骨定量分析发现实验组的骨密度明显高于对照组(P0.05)。HE染色病理切片显示,实验组在孔道周围可见新生骨小梁,内含大量骨陷窝和骨细胞,对照组只可见少量骨小梁再生,内见空骨陷窝。天狼星红染色病理切片显示,实验组中存在大量的高亮橘红色纤维,对照组中只有少量的高亮橘红色纤维。3.体外实验:CCK-8实验结果显示,实验组和对照组的OD值在1、3、5天均具有统计学差异(P0.05),对照组的OD值大于同期的实验组。单独对于实验组来说,随着时间的推移,实验组细胞的OD值也在逐渐的增加(P0.05)。ALP染色结果显示在培养14天后,实验组ALP染色的阳性率显著高于对照组。茜素红染色结果显示,在培养14天后,实验组钙结节的密度显著高于对照组。结论新型磷酸钙颗粒可以有效促进hMSC的成骨分化,可有效治疗兔股骨头坏死,且具有较好的细胞相容性,具有作为人股骨头坏死的治疗方法的潜力。
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R681.8
【图文】：

（图１：克氏针的进针方向与股骨干成４５°角。）逡逑酸钙颗粒治疗兔股骨头坏死（实验组）逡逑麻醉、备皮、消毒等术前准备与３．邋３．邋２中相同。沿之前，找到上次手术所建立的孔道，将约１００颗多孔磷酸钙远端，即股骨头处，使颗粒充分填满股骨头缺损部位。毕肌肉注射青霉素３０万单位，待兔子醒后带回牢笼正物的饲养逡逑使用的新西兰大白兔均饲养于北京协和医院实验动物中术后３天、１个月、２个月后，分别处死对应组别的大研。逡逑

图２．制备出的多孔磷酸钙颗粒。逡逑２．多孔磷酸钙颗粒相关性质的检测逡逑２．邋１多孔磷酸钙颗粒的Ｘ射线衍射图（ＸＲＤ）逡逑在制作多孔磷酸钙颗粒的过程中，把２．邋５％磷酸氢二钠溶液与颗粒相混合物逡逑混合后得到水泥状混合物，之后还需要经过塑形（ｍｏｌｄｉｎｇ）、滤去聚乙二醇并干燥逡逑（ｌｅａｃｈ邋ｏｆ邋ＰＥＧ邋ａｎｄ邋ｄｒｙ）、高压灭菌（ａｕｔｏｃｌａｖｉｎｇ）等工序，才能得到最终的成逡逑品。我们把上述阶段的材料通过Ｘ射线衍射仪进行分析，得到了如图所示的结果（图逡逑３）。代表ａ－磷酸三钙（ａ－ＴＣＰ）、羟基磷灰石（ＨＡ）、聚乙二醇（ＰＥＧ）的峰值均在逡逑图中标出。逡逑

【参考文献】

相关期刊论文 前6条

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本文编号：2716157