关节腔内缓释GM-CSF抗体对骨关节炎治疗作用的初步探究

发布时间：2020-08-13 21:53

【摘要】：研究背景骨关节炎是常见的退行性关节病变,以进行性软骨破坏、关节内和关节周围组织炎症为主要特征。常见症状包括慢性疼痛,僵硬,畸形,最终会导致关节功能丧失。近些年的研究认为炎症因素和免疫系统在骨关节炎的病理改变过程中发挥了重要的作用。免疫细胞的侵入和炎症相关细胞因子的过量表达是骨关节炎关节内组织的特征之一。调控免疫系统,减轻炎症反应成为骨关节炎治疗新的方向之一。粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)被发现具有激活炎症细胞,刺激炎症相关细胞因子分泌的作用。降低关节炎组织中GM-CSF浓度,被认为可以减弱炎症反应,进而保护关节软骨,减轻骨关节炎症状。研究目的使用明胶微球作为药物载体,研究关节腔内缓释GM-CSF抗体对骨关节炎的治疗作用。研究方法1.对实验使用的明胶微球进行体外载药率和释放曲线测定。2.使用关节腔注射碘乙酸钠(2mg,单次注射)的方式建立大鼠骨关节炎模型。大鼠分为5组:健康组,建模对照组,微球组,抗体组和微球+抗体组。健康组仅注射PBS,建模对照组仅进行建模,其余3组在建模基础上,微球组注射2mg明胶微球,抗体组注射20ugGM-CSF抗体,微球+抗体组注射2mg微球和20ug抗体(注射前完成载药)。治疗注射时间为建模后第2天,注射液体总量均为50ul。在治疗开始第一周末和第二周末,处死大鼠,取建模侧膝关节,脱钙切片后行HE染色,番红-固绿染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色实验。对试验结果进行mankin's评分和免疫组化光密度测定。研究结果1.明胶微球对GM-CSF抗体的载药率为76%,药物释放曲线稳定,在一定时间内实现了较好的缓释效果。2.建模对照组和微球组切片软骨破坏情况明显,mankin's评分最高,且二者之间没有明显区别(P0.05);抗体组和微球+抗体组第一周和第二周的软骨破坏情况优于建模对照组(P0.05),但抗体组第二周软骨破坏较第一周明显加重(P=0.022)。Ⅱ型胶原方面,4组骨关节炎建模组平均IOD均明显低于健康组(P0.01),第一周抗体组和微球+抗体组平均IOD略高于建模对照组和微球组(P0.01),第二周抗体组平均IOD明显下降,和建模对照组无显著差异(P=0.14),而微球+抗体组仍好于对照组(P0.01)。结论GM-CSF抗体可以有效延缓骨关节炎的病理改变,对骨关节炎具有较好的治疗作用。以明胶微球为载体,在关节腔内缓释GM-CSF抗体可以在较长时间内实现治疗效果。
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R684.3
【图文】：

无论是单纯ＰＢＳ溶液中还是在含有胶原酶的ＰＢＳ溶液中，体浓度均随孵育时间延长而逐渐增加，增长过程较为稳定，表明明体可以实现对ＧＭ－ＣＳＦ的缓释作用。逡逑关节腔注射碘乙酸钠进行骨关节炎建模的效果逡逑节腔注射碘乙酸钠１０天后处死大鼠（１周组），切开双侧关节腔后，侧，可见建模侧关节明显肿大，软骨明显变黄，表面粗糙（图２），射碘乙酸钠建模有效。逡逑

Ｄ：抗体组，Ｅ：微球＋抗体组。可见建模对照组和微球组均有明显软骨破坏，软骨下逡逑骨组织入侵软骨层；抗体组和微球＋抗体组未见明显软骨破损，但也存在较明显的软骨变性逡逑图４为第二周组结果，相对第一周，第二周各组软骨破坏均更为严重，且对比逡逑第一周，最为明显的是抗体组开始出现明显的软骨结构破坏，而微球＋抗体组软骨逡逑

邋？邋－邋？邋｜逡逑Ｅ逡逑图３第一周组大鼠膝关节切片ＨＥ染色结果（ｘｌ00倍）。Ａ：健康组，Ｂ：建模对照组，Ｃ：逡逑微球组，Ｄ：抗体组，Ｅ：微球＋抗体组。可见建模对照组和微球组均有明显软骨破坏，软骨下逡逑骨组织入侵软骨层；抗体组和微球＋抗体组未见明显软骨破损，但也存在较明显的软骨变性逡逑图４为第二周组结果，相对第一周，第二周各组软骨破坏均更为严重，且对比逡逑第一周，最为明显的是抗体组开始出现明显的软骨结构破坏，而微球＋抗体组软骨逡逑破坏程度最轻，说明单次注射ＧＭ－ＣＳＦ抗体作用周期较短，而本实验使用的明胶微逡逑球缓释ＧＭ－ＣＳＦ抗体可以在更长的时期内实现减缓骨关节炎进展的作用。逡逑２１逡逑

【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 金丽霞;;药物缓释载体材料在医药领域中的研究及应用[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年25期

2 康思宁;刘强;;骨关节炎病理过程与关节软骨特性的改变[J];中华关节外科杂志(电子版);2007年04期

本文编号：2792574