Pokemon对乳腺癌细胞RFC4表达的影响及其相关性研究

发布时间：2020-10-10 21:36

　　 目的:观察Pokemon沉默对人乳腺癌细胞RFC4表达的影响,并分析两者在临床表达中的相关性。方法:以体外培养的人乳腺癌MDA-MB-231、HS578T、MCF-7、T-47D四个细胞系为研究对象,按照Pokemon序列设计特异性si RNA,将si RNA瞬时转染至乳腺癌细胞内,通过q RT-PCR方法从m RNA转录水平研究沉默Pokemon对RFC4表达的影响,通过蛋白免疫印迹法从蛋白水平检测沉默Pokemon对RFC4表达的影响。应用组织芯片结合免疫组织化学染色法检测100例乳腺非特殊性浸润性导管癌组织中Pokemon与RFC4的表达情况,分析二者在临床表达中的相关性。结果:Pokemon沉默对乳腺癌细胞中RFC4的影响:采用si RNA瞬时转染沉默MDA-MB-231、HS578T、MCF-7、T-47D四个细胞系中的Pokemon表达后,RFC4的m RNA表达水平下调,说明沉默Pokemon能从m RNA转录水平上抑制RFC4的表达。采用si RNA瞬时转染沉默MDA-MB-231、HS578T、MCF-7、T-47D四个细胞系中的Pokemon后,RFC4的蛋白表达水平下调,说明沉默Pokemon能从蛋白水平上抑制RFC4的表达。Pokemon与RFC4在临床表达中的相关性:通过对100例人乳腺癌组织(非特殊性浸润性导管癌)进行免疫组化分析,结果显示Pokemon与RFC4表达存在着相关性,随着Pokemon的表达增加,RFC4的阳性表达率也增加,Pokemon的表达与RFC4的升高呈明显正相关,差异有统计学意义?结论:1)沉默Pokemon可抑制乳腺癌细胞RFC4的m RNA及蛋白表达水平。2)在乳腺癌组织中Pokemon与RFC4的表达呈正相关性。
【学位单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R737.9
【部分图文】：

18T-47D图 1 沉默 Pokemon 基因抑制乳腺癌细胞中 RFC4 mRNA 的表达注：con 组：阴性对照组，siRNA 组：pokemon 沉默组，n=3，*P < 0.05，**p<0.01，***p<0.0014.1.2 沉默 Pokemon 抑制人乳腺癌细胞中 RFC4 蛋白水平的表达为了验证沉默 Pokemon 对乳腺癌细胞 RFC4 蛋白表达的影响，先瞬时转染pokemon-siRNA 分别入 MDA-MB-231、HS578T、MCF-7、T-47D 细胞，48h 后，再通过蛋白质印迹法检测，结果显示：低表达 Pokemon 的乳腺癌细胞 RFC4 蛋白表达

图 2 沉默 Pokemon 基因抑制乳腺癌细胞 RFC4 蛋白的表达2 Pokemon 与 RFC4 在乳腺癌组织中蛋白表达的相关性）Pokemon 及 RFC4 在乳腺癌组织中的表达为了观察 Pokemon、RFC4 在乳腺癌组织中的表达情况，收集 100 例非特性导管癌组织及 10 例边缘组织芯片（编号 BC081120b）,运用免疫组织法观察了 100 例浸润性导管癌组织，依据细胞显色强度评定为阴性（色；弱阳性（+）：浅棕色，阳性细胞数处于 25%以下；阳性（++）：细胞数处于 25%-49%之间；强阳性（+++）：棕褐色，阳性细胞数处于。结果显示：99 例乳腺癌组织标本中，Pokemon 阳性表达率为 94.9%(9 阳性表达率为 96.0%（95/99）。Pokemon 在乳腺癌组织中的典型阳

图 3 乳腺浸润性导管癌组织中 pokemon、RFC4 的表达（免疫组化，200×）注：图 3B、3C 分别为一名 34 岁女性乳腺癌患者乳腺组织中的 Pokemon、RFC4 的表达，呈强阳性（+++）表达，图 3E、3F 分别为一名 46 岁女性乳腺癌患者乳腺组织中的 Pokemon、RFC4 的表达，呈弱阳性表达（+）。
【参考文献】

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1 刘鑫远;禹亮;张健;王磊;;Pokemon及其在肿瘤中的研究进展[J];现代生物医学进展;2014年03期

2 杨红伟;张勇;金秀丽;;原癌基因pokemon在人胶质瘤中的表达研究[J];中国医疗前沿;2012年09期

3 赵心恺;宁巧明;孙晓宁;田德安;;POKemon和NF-κB p65在肝癌细胞中的信号调控[J];肿瘤;2012年01期

4 崔金全,石一复,周怀君;不同妊娠滋养细胞疾病组织中RFC2、PCNA表达的研究[J];癌症;2004年02期

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1 周茜;Pokemon对人乳腺癌MCF-7细胞增殖能力的影响[D];南华大学;2015年

本文编号：2835621