关节腔注射玻璃酸钠联合有氧训练对大鼠膝骨关节炎软骨基质的影响

发布时间：2020-10-17 01:59

　　 目的:通过对膝骨关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)模型大鼠进行关节腔注射玻璃酸钠并联合有氧训练,观察KOA关节软骨变化情况,测定关节软骨基质中聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的表达情况,明确玻璃酸钠联合有氧训练治疗是否较单纯注射玻璃酸钠疗效更佳。方法:1.实验对象:40只8周龄SD雄性大鼠,采用随机数字表法标记,平均分成四组:空白对照组、模型组、玻璃酸钠组(SH组)、玻璃酸钠联合有氧训练组(综合组)。空白对照组大鼠仅笼内饲养;另外三组均采用L-半胱氨酸及木瓜蛋白酶混合液诱导KOA模型,4周后进行干预。2.干预措施:模型组仅笼内饲养,不进行干预处理;SH组:关节腔内注射玻璃酸钠0.02ml/次,每周1次,连续4周;综合组:玻璃酸钠注射后次日开始进行有氧训练(中等强度跑步训练20米/分,每次30分钟,每天1次,每周6次),连续治疗4周,然后采取扯尾断颈法处死所有实验大鼠取关节软骨,并对软骨及指标进行观察。3.观察指标:(1)肉眼观察关节软骨形态结构;(2)HE染色下观察软骨细胞及基质的变化情况;(3)免疫组化测定软骨细胞基质中Aggrecan和Ⅱ型胶原的表达情况。4.采用SPSS20.0进行统计学分析。结果:1.各组膝关节软骨肉眼观:空白对照组软骨表面非常光滑,色泽明亮,关节腔内未见粘连及积液,不伴有任何裂隙及软化;模型组软骨表面很粗糙,色泽暗淡无光,滑膜有不同程度的充血、水肿、增生、粘连,少数软骨甚至出现全层缺损,部分标本关节边缘可见增生及骨赘形成;关节腔粘连及积液明显;SH组软骨表面部分稍显不平整,色泽呈淡黄色,未见明显裂纹及糜烂,关节腔偶有积液;综合组表面基本平整,色泽明亮,未见裂隙及软化,个别滑膜轻度充血,关节腔积液少见。按改良Mankin's评分方法,对所统计结果进行秩和检验,与模型组相比,SH组及综合组具有统计学差异(P0.05)。2.HE染色观察:空白对照组软骨基质着染均匀,细胞数目及形态大小一致,排列整齐,潮线完整。模型组软骨层厚度变薄明显,同时细胞基质染色减退,软骨细胞排列紊乱,数目明显减少,潮线紊乱不完整。SH组软骨层轻度变薄,软骨细胞略减少,排列相对整齐,个别潮线不完整;综合组软骨表面较SH组光滑,软骨层厚薄基本均匀,软骨基质着染更均匀,各层软骨细胞数目和分布较均匀,潮线基本完整。按改良Mankin's评分方法,将HE染色观察结果进行分析,与模型组相比,SH组及综合组均具有统计学意义(P0.05),其中综合组改善最为明显。3.免疫组化检测结果:光镜下Ⅱ型胶原阳性表达显示被染成蓝色。Aggrecan阳性表达为关节软骨基质中被染成棕黄色。模型组Aggrecan和Ⅱ型胶原呈弱阳性表达,空白对照组、SH组及综合组表达明显。与模型组相比,SH组及综合组关节软骨Aggrecan和Ⅱ型胶原的表达具有统计学差异(P0.05),而综合组较SH组表达也具有统计学差异(P0.05)。结论:有氧训练可以促进玻璃酸钠对软骨基质Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的合成。
【学位单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R684.3
【部分图文】：

后于左后侧膝关节外侧进针向腔内注射玻璃酸钠 0.02ml/次，每周 1 次，连续 4 周（图 1）。综合组：10 只，笼内饲养、自由饮食 1 周，左后侧膝关节腔内注射 4%木瓜蛋白酶及 0.03mol/L 的 L-半胱氨酸混合液造模，观察 4 周，造模成功后于左后侧膝关节腔内注射玻璃酸钠 0.02ml/次，每周 1 次，连续 4 周；并于注射后次日开始进行有氧训练（即该处选择跑步训练，用薄木板隔成独立跑道的改装版动物跑步机进行训练，每个跑道的长、宽、高分别为 100cm15cm、30cm，为避免大鼠偷懒，在跑道尾部挡板固定有大头针，图 2），每天 1 次（中等强度：20 米/分钟，每次 30 分钟），每周 6 次，连续 4 周

后于左后侧膝关节外侧进针向腔内注射玻璃酸钠 0.02ml/次，每周 1 次，连续 4 周（图 1）。综合组：10 只，笼内饲养、自由饮食 1 周，左后侧膝关节腔内注射 4%木瓜蛋白酶及 0.03mol/L 的 L-半胱氨酸混合液造模，观察 4 周，造模成功后于左后侧膝关节腔内注射玻璃酸钠 0.02ml/次，每周 1 次，连续 4 周；并于注射后次日开始进行有氧训练（即该处选择跑步训练，用薄木板隔成独立跑道的改装版动物跑步机进行训练，每个跑道的长、宽、高分别为 100cm15cm、30cm，为避免大鼠偷懒，在跑道尾部挡板固定有大头针，图 2），每天 1 次（中等强度：20 米/分钟，每次 30 分钟），每周 6 次，连续 4 周

构评分为：4 分有 2 只，3 分有 7 只，2 分有 1 只（见表 2）。SH 组：软骨表面稍呈黄色，透明度尚可，较光滑，有光泽，光泽度较空白对照组差但优于模型组。炎性表现相比模型组轻。且亦未见裸露的软骨下骨。滑膜仅有轻度充血肿胀，关节液较清亮，关节腔内未见明显粘连（见图 5）。根据改良 Mankin's 评分标准，软骨结构评分为：3 分有 1 只2 分有 1 只，1 分有 8 只（见表 2）。综合组：膝关节软骨表面基本光滑，色泽明亮，光泽度优于 SH 组，透明度可，未见裂隙及软化，个别滑膜轻度充血，关节腔内未见粘连（见图 6）。根据改良 Mankin's 评分标准，软骨结构评分为：3 分有 0 只，2 分有 1 只，1 分有 4 只，0 分 5 只（见表 2）。
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本文编号：2844099