孕酮对大鼠缺血随意皮瓣成活的影响及机制研究

发布时间：2020-11-07 14:40

　　 目的:临床上,随意皮瓣已经成为修复组织缺损的常见技术之一。然而随意皮瓣因不含知名血管,当其长宽比超越1.5-2:1,其远端将部分或者完全坏死,从而影响随意皮瓣在组织创面修复等中的临床使用。孕酮,又称黄体酮、黄体激素,具有促进血管内皮生长因子(VEGF)表达、下调炎性细胞因子水平及较强的抗氧化应激等能力。本课题旨在研究探讨孕酮对大鼠缺血随意皮瓣成活的影响及可能机制。方法:建立改良的McFarlane大鼠缺血随意皮瓣模型。将雄性成年Sprague-Dawley大鼠按随机对数表法分为孕酮实验组和生理盐水对照组。孕酮组/生理盐水组分别予腹腔注射1Omg/kg孕酮/生理盐水,一天给药1次,接连注射7天。根据随意皮瓣血供情况,将皮瓣三等分为皮瓣近端区(Ⅰ区)、中间区(Ⅱ区)和远端区(Ⅲ区)。术后观察随意皮瓣存活大体情况及测算皮瓣存活面积比;术后第2天,测定大鼠Ⅱ区组织超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)水平;术后第7天苏木精-伊红(HE)染色评估皮瓣组织病理学情况;免疫组化法测定VEGF表达;激光多普勒血流测量仪检测皮瓣血流灌注情况;明胶-氧化铅血管造影观测皮瓣新生血管情况。结果:1、术后第7天,孕酮实验组皮瓣存活面积比为(81.62±1.86)%,显著高于生理盐水对照组(49.78± 1.36)%,差异有统计学意义(P0.01)。2、术后第2天,孕酮实验组皮瓣Ⅱ区,每毫克蛋白SOD活性表达量(61.40 ±2.29)U显著高于生理盐水对照组(29.95±2.91)U(P0.01)。孕酮组每毫克蛋白MDA表达量(16.25±3.08)nmol显著低于生理盐水组(62.32±5.38)nmol(P0.01)。3、术后第7天,HE染色示:皮瓣Ⅱ区,孕酮组出现大量的新生血管,微血管密度(MVD)计数为(33.64±3.04)个/mm2显著高于生理盐水组(15.95±3.65)个/mm2(P0.01)。4、孕酮组皮瓣Ⅱ区中性粒细胞浸润(30.10±2.67个/mm2)显著少于生理盐水组(44.80±3.54个/mm2)(P0.01)。5、皮瓣Ⅱ区,孕酮组VEGF阳性表达量为(3479±68)ⅠA显著高于生理盐水组(1923±43)ⅠA(P0.01)。6、孕酮实验组皮瓣Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区组织血流灌注分别为(406.82±15.21)PU、(210.45±6.93)?PU、(109.95±4.91)PU,显著高于生理盐水组各区(P0.01)。7、明胶-氧化铅造影示孕酮组皮瓣中端及远端血管增生显著(P0.01)。结论:孕酮可以促进大鼠缺血随意皮瓣的成活,其机制可能:1、孕酮上调皮瓣血管内皮生长因子的表达、刺激皮瓣远端血管新生,改善皮瓣血供,从而提高皮瓣的成活面积;2、孕酮可以减轻组织炎症反应促进皮瓣存活;3、孕酮可以拮抗组织脂质过氧化反应、抑制皮瓣缺血再灌注损伤,促进随意皮瓣存活。
【学位单位】：南方医科大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R622
【部分图文】：

件适宜且相同。??■３ｋ??图１－１、大鼠背部缺血随意皮瓣模型建立Ｍ??（Ａ．大鼠背部皮瓣设计图及双侧知名髂动脉走形示意图Ｂ．术中暴露血管并割断）??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１、Ｔｈｅ?ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ?ｏｆ?ｉｓｃｈｅｍｉｃ?ｒａｎｄｏｍ?ｓｋｉｎ?ｆｌａｐ?ｍｏｄｅｌ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｂａｃｋ?ｏｆ?ｒａｔ??（Ａ．?Ｄｅｓｉｇｎ?ｄｒａｗｉｎｇ?ｏｆ?ｄｏｒｓａｌ?ｆｌａｐ?ｏｆ?ｒａｔ?ａｎｄ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｖｅｓｓｅｌ?ｓｈａｐｅ?ｏｆ?ｋｎｏｗｎ?ｉｌｉａｃ?ａｔｅｒｉｅｓ?Ｂ．??Ｅｘｐｏｓｕｒｅ?ａｎｄ?ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ?ｏｆ?ｖｅｓｓｅｌｓ?ｄｕｒｉｎｇ?ｔｈｅ?ｏｐｅｒａｔｉｏｎ?）??ｉ?－…一…：．??丨ａ圓１—丨Ｈ—?ｈ??图１－２、大鼠皮瓣术后佩戴自主设计颈部固定环：３１］??（Ａ．大鼠有自残现象，撕咬皮瓣?Ｂ．术后颈套固定）??Ｆｉｇｕｒｅ?１?－２?Ｒａｔｓ?ｗｅｒｅ?ｇｉｖｅｎ?ａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ?ｄｅｓｉｇｎｅｄ?ｎｅｃｋ?ｃｏｌｌａｒｓ?ａｆｔｅｒ?ｏｐｅｒａｔｉｏｎ??（Ａ．?Ｒａｔｓ?ｈａｖｅ?ｓｅｌｆ－ｍｕｔｉｌａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｗｉｌｌ?ｂｉｔｅ?ｆｌａｐｓ?Ｂ．Ｆｉｘｅｄ?ｗｉｔｈ?ｎｅｃｋ?ｃｏｌｌａｒｓ?ａｆｔｅｒ?ｏｐｅｒａｔｉｏｎ）??１．２．６实验动物分组及数据统计??将１２只ＳＤ雄性大鼠按随机数字表法（乱数表法）分为孕酮实验组??６??

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图１－３、术后７ｄ孕酮实验组和生理盐水对照组两组大鼠缺血随意皮瓣存活情况。??后７ｄ，孕酮实验组和生理盐水对照组两组皮瓣存活区和坏死区之间的边界清晰。孕酮验组的远端区域（区域ＩＩＩ）与生理盐水对照组相比，皮下组织水肿、炎症反应较轻。??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３．?Ｄｉｇｉｔａｌ?ｐｈｏｔｏｇｒａｐｈｓ?ｓｈｏｗｉｎｇ?ｆｌａｐｓ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｔｈｅ?ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ?ｇｒｏｕｐ?ａｎｄ?ｃｏｎｔｒｏｕｐ．?Ｏｎ?ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ?ｄａｙ?７，?ｔｈｅ?ｂｏｕｎｄａｒｙ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｔｈｅ?ｓｕｒｖｉｖｉｎｇ?ａｎｄ?ｎｅｃｒｏｔｉｃ?ａｒｅａ?ｗａｓ?ｃｌｅａｒｃｈ?ｆｌａｐ．?Ｔｈｅ?ｄｉｓｔａｌ?ａｒｅａ?（ａｒｅａ?ＩＩＩ）?ｉｎ?ｔｈｅ?ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ?ｇｒｏｕｐ?ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ?ｌｅｓｓ?ｏｅｄｅｍａ，?ｉｎｆｌａｍｍａｔｒｅｓｐｏｎｓｅ?ｔｈａｎ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ．??．１．２．皮瓣存活面积比检测结果??孕酮实验组皮瓣存活面积百分比为（８１．６２±?１．８６）?％。生理盐水对照组面积百分比为（４９．７８±?１．３６）?％，两组比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）
【参考文献】

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本文编号：2874084