魔芋葡甘聚糖/纳米羟基磷灰石/壳聚糖骨替代支架成骨诱导机制的研究
发布时间：2020-12-07 23:25
[目的]课题组前期研究表明万古霉素阳离子脂质体复合魔芋葡甘聚糖／纳米羟基磷灰石/壳聚糖（konjac glucomannan/nano-hydroxyapatite/chitosan, KHC）骨替代支架材料对兔感染性骨缺损模型具有良好的抗感染性及骨修复活性,KHC骨替代支架是如何诱导新骨形成是KHC骨替代材料研发过程中必须搞清楚的一个问题,通过体外实验研究KHC骨替代支架对骨髓间充质干细胞、成骨细胞增殖、分化等细胞生物学行为的影响,从BMPs信号通路及FGFS/FGFR信号通路探讨KHC骨替代支架材料的成骨诱导机制。[方法]第一部分1.采用全骨髓贴壁法培养扩增C57BL小鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）.通过形态学及生物功能鉴BMSCs。2.在倒置相差显微镜、扫描电镜下观察BMSCs在KHC骨替代支架上的生长、形态和黏附情况。3.KHC骨替代支架与BMSCs复合培养于24孔板中,以单纯的BMSCs培养为阴性对照,以0.64%苯酚与BMSCs复合培养为阳性对照,在24h、48h、72h收集样本,利用MTT法检测BM...
【文章来源】：昆明医科大学云南省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１骨形成过程??
??图１－１１扫描电镜下ＫＨＣ骨替代支架ＢＭＳＣｓ形貌（Ｘ５００）?．．??图１－１２扫描电镜下ＫＨＣ骨替代支架ＢＭＳＣｓ形貌（ｘｌＯＯＯ）??扫描电镜下ＫＨＣ表面呈现凹凸不平多孔的表面形貌，能谱分析分析结果表明??ＫＨＣ骨替代支架表面主要含有巧、憐、氧、碳元素。（图１－１３）??７．６??Ｃａ??６．１?－??４．６?—??ＫＣｎｔ??３。－?Ｐ??１．Ｓ?－?〇??ｌｌｉ—．．．．－－??１．６０?２．００?３．００?４．０Ｄ?５．００?６．００?７．００?８．００??Ｅｎｅｒｇｙ?－?ｋｅＶ??图１－１３?ＫＨＣ
为了研巧ＫＨＣ骨替代支架对成骨细胞的影响，本研究利用ｑＰＣＲ方法对ＫＨＣ骨??替代支架上ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１成骨细胞的成骨分化基因（Ｒｕｎｘ２，?ＢＭＰ－４，?ＢＭＰＲ－１?Ａ，??ＦＧＦＲ－ｌ）进行定量分析。实验结果如图２－５所示，阴性诱导组Ｒｕｎｘ２在２ｗ时表达??量达到最高，ＫＨＣ骨替代支架材料在Ｉｗ和３ｗ时表达受抑制，在２ｗ时表达量达最??高，在３ｗ时同种异体人工骨Ｒｕｎｘ２表达量达最高。随着时间的推移各组ＢＭＰ－４表??达置逐渐増高，２Ｗ时各组ＢＭＰ－４表达水平达到最高，ＫＨＣ骨替代支架诱导培养??组ＢＭＰ－４明盈高于其他组，３ｗ时各沮ＢＭＰ－４表达量均略有下降。随着时间推移??ＫＨＣ骨替代支架普通培养基培养組ＢＭＰ艮Ｉ?Ａ表达量逐渐升高，第３ｗ时达３．２倍。??随着时间的推移各姐ＦＧＦＲ－１表达量组建增高，在第Ｈｗ达到最高峰，前两周??ＦＧＦＲ－１表达均受到不同程度的抑制，在第３ｗ时ＦＧＦＲ－１化学诱导组表达量高于未??诱导组
【参考文献】：
期刊论文
[1]纳米羟基磷灰石复合重组人骨形态发生蛋白-2人工骨治疗骨缺损的研究[J]. 曾建华,熊龙,李经堂,严亮,凌蒙. 南昌大学学报(医学版). 2014(08)
[2]全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性及优势[J]. 李双月,戚媛,陈若琳,王哲敏,刘爽,朴丰源. 中国组织工程研究. 2014(10)
[3]透明质酸钠/魔芋葡甘聚糖复合多孔膜的制备及性能研究[J]. 朱维波,王端诚,颜廷亭,冷崇燕,陈庆华. 材料导报. 2014(04)
[4]魔芋止血剂的止血作用及局部用药的安全性评价[J]. 夏忠玉,孙国兵. 华西药学杂志. 2013(04)
[5]壳聚糖/魔芋葡甘露聚糖复合膜对实质脏器创伤外科止血的实验研究[J]. 任波,毕京峰,刘芳婷,董刚,徐晨,毕振华,王兆海,吴红. 中国医药导刊. 2013(06)
[6]影响羧甲基魔芋胶骨架片体外释药的处方和工艺因素[J]. 刘蔚,张瑜,杨磊,宋卫中. 河南大学学报(医学版). 2012(04)
[7]载苦参碱的魔芋葡甘聚糖多孔杂化水凝胶缓释胶囊的制备和体外释放评价[J]. 刘艳华,马妍妮,王文苹. 宁夏医科大学学报. 2012(10)
[8]万古霉素阳离子脂质体复合纳米羟基磷灰石/壳聚糖/魔芋葡甘聚糖治疗兔慢性感染性骨缺损[J]. 黄金亮,马涛,唐辉,范新宇,徐永清. 中国修复重建外科杂志. 2012(02)
[9]大鼠骨髓间充质干细胞向肝样细胞的定向诱导分化[J]. 陈鹏飞,吴小翎,周伟,彭阳,芦曦. 中国生物制品学杂志. 2011(01)
[10]κ-卡拉胶/魔芋胶骨架片的体外释药特性研究[J]. 张瑜,杜才伟,王玲. 中成药. 2010(05)
硕士论文
[1]羟基磷灰石/壳聚糖/魔芋葡甘聚糖复合骨组织工程支架的制备及研究[D]. 洪东峰.昆明理工大学 2009
本文编号：2904064
【文章来源】：昆明医科大学云南省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１骨形成过程??
??图１－１１扫描电镜下ＫＨＣ骨替代支架ＢＭＳＣｓ形貌（Ｘ５００）?．．??图１－１２扫描电镜下ＫＨＣ骨替代支架ＢＭＳＣｓ形貌（ｘｌＯＯＯ）??扫描电镜下ＫＨＣ表面呈现凹凸不平多孔的表面形貌，能谱分析分析结果表明??ＫＨＣ骨替代支架表面主要含有巧、憐、氧、碳元素。（图１－１３）??７．６??Ｃａ??６．１?－??４．６?—??ＫＣｎｔ??３。－?Ｐ??１．Ｓ?－?〇??ｌｌｉ—．．．．－－??１．６０?２．００?３．００?４．０Ｄ?５．００?６．００?７．００?８．００??Ｅｎｅｒｇｙ?－?ｋｅＶ??图１－１３?ＫＨＣ
为了研巧ＫＨＣ骨替代支架对成骨细胞的影响，本研究利用ｑＰＣＲ方法对ＫＨＣ骨??替代支架上ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１成骨细胞的成骨分化基因（Ｒｕｎｘ２，?ＢＭＰ－４，?ＢＭＰＲ－１?Ａ，??ＦＧＦＲ－ｌ）进行定量分析。实验结果如图２－５所示，阴性诱导组Ｒｕｎｘ２在２ｗ时表达??量达到最高，ＫＨＣ骨替代支架材料在Ｉｗ和３ｗ时表达受抑制，在２ｗ时表达量达最??高，在３ｗ时同种异体人工骨Ｒｕｎｘ２表达量达最高。随着时间的推移各组ＢＭＰ－４表??达置逐渐増高，２Ｗ时各组ＢＭＰ－４表达水平达到最高，ＫＨＣ骨替代支架诱导培养??组ＢＭＰ－４明盈高于其他组，３ｗ时各沮ＢＭＰ－４表达量均略有下降。随着时间推移??ＫＨＣ骨替代支架普通培养基培养組ＢＭＰ艮Ｉ?Ａ表达量逐渐升高，第３ｗ时达３．２倍。??随着时间的推移各姐ＦＧＦＲ－１表达量组建增高，在第Ｈｗ达到最高峰，前两周??ＦＧＦＲ－１表达均受到不同程度的抑制，在第３ｗ时ＦＧＦＲ－１化学诱导组表达量高于未??诱导组
【参考文献】：
期刊论文
[1]纳米羟基磷灰石复合重组人骨形态发生蛋白-2人工骨治疗骨缺损的研究[J]. 曾建华,熊龙,李经堂,严亮,凌蒙. 南昌大学学报(医学版). 2014(08)
[2]全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性及优势[J]. 李双月,戚媛,陈若琳,王哲敏,刘爽,朴丰源. 中国组织工程研究. 2014(10)
[3]透明质酸钠/魔芋葡甘聚糖复合多孔膜的制备及性能研究[J]. 朱维波,王端诚,颜廷亭,冷崇燕,陈庆华. 材料导报. 2014(04)
[4]魔芋止血剂的止血作用及局部用药的安全性评价[J]. 夏忠玉,孙国兵. 华西药学杂志. 2013(04)
[5]壳聚糖/魔芋葡甘露聚糖复合膜对实质脏器创伤外科止血的实验研究[J]. 任波,毕京峰,刘芳婷,董刚,徐晨,毕振华,王兆海,吴红. 中国医药导刊. 2013(06)
[6]影响羧甲基魔芋胶骨架片体外释药的处方和工艺因素[J]. 刘蔚,张瑜,杨磊,宋卫中. 河南大学学报(医学版). 2012(04)
[7]载苦参碱的魔芋葡甘聚糖多孔杂化水凝胶缓释胶囊的制备和体外释放评价[J]. 刘艳华,马妍妮,王文苹. 宁夏医科大学学报. 2012(10)
[8]万古霉素阳离子脂质体复合纳米羟基磷灰石/壳聚糖/魔芋葡甘聚糖治疗兔慢性感染性骨缺损[J]. 黄金亮,马涛,唐辉,范新宇,徐永清. 中国修复重建外科杂志. 2012(02)
[9]大鼠骨髓间充质干细胞向肝样细胞的定向诱导分化[J]. 陈鹏飞,吴小翎,周伟,彭阳,芦曦. 中国生物制品学杂志. 2011(01)
[10]κ-卡拉胶/魔芋胶骨架片的体外释药特性研究[J]. 张瑜,杜才伟,王玲. 中成药. 2010(05)
硕士论文
[1]羟基磷灰石/壳聚糖/魔芋葡甘聚糖复合骨组织工程支架的制备及研究[D]. 洪东峰.昆明理工大学 2009
本文编号：2904064
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