抵抗素诱导椎间盘退变的作用及其分子机制的研究
发布时间：2021-01-07 08:36
椎间盘退变及椎间盘退变所引起的腰腿痛为目前世界性难题也是造成全球经济损失的一个重要原因。研究表明椎间盘退变（Intervertebral Disc Degeneration,IVDD）及其继发的一系列疾病（如腰椎管狭窄症、腰椎滑脱症、退变性脊柱侧凸症、腰椎间盘突出症等）是腰痛的主要病因,也是目前临床上存在的常见病多发病,与广大人民群众的健康问题密切相关。因此对导致椎间盘退变的分子机制进行研究可以让我们深入的了解调节椎间盘退变的因素及其机制,从而为我们更好研发新的生物治疗打下坚实的基础。这对于降低腰痛发病率、改善患者生活质量、降低医疗费用等具有十分重要的社会意义。抵抗素（Resistin）是由一段108个氨基酸的前肽构成,得名于它的胰岛素抵抗作用,大部分由脂肪细胞产生和分泌,作用于骨骼肌细胞、干细胞和脂肪细胞,降低其对胰岛素的敏感。随着研究发现抵抗素与多种疾病如糖尿病、骨性关节炎、高血压等的发生机制存在着密切的关系,但其在椎间盘中的作用尚未见报道。既往研究表明,椎间盘退变的主要病理改变为细胞外基质降解酶（MMPs、ADAMTS等）表达增加、趋化因子表达升高导致的炎性细胞浸润等。而Resi...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：106 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１、ＭＴＴ方法检验ｒｅｓｉｓｔｉｎ处理髓核细胞后的髓核细胞活性的改变
图２：?Ｒｅｓｉｓｔｉｎ上调髓核细胞内ＡＦＡＭＴＳ５的表达。髓核细胞经过１００ｎｇ／ｍｌ的ｒｅｓｉｓｔｉｎ处理??不同时间点（４小时、８小时、２４小时）后，ＲＴ－ｑＰＣＲ结果（Ａ）显示随着ｒｅｓｉｓｔｉｎ处理时??间的延长，ｒｅｓｉｓｔｉｎ刺激髓核细胞内ＡＤＡＭＴＳ５的表达量也递增，处理４小时后升高２．５６??倍、处理８小时后升高３．９２倍、处理２４小时后升高４．２１倍（ｐ＜０．０５）。（Ｂ）髓核细胞经过??不同浓度的ｒｅｓｉｓｔｉｎ处理２４小时后，ＲＴ－ｑＰＣＲ结果显示随着ｒｅｓｉｓｔｉｎ使用浓度的递增，髓核??细胞内的ＡＤＡＭＴＳ５的表达量也随之递增，２５ｎｇ／ｍｌ升高２．３１倍、５０ｎｇ／ｍｌ升高３．７６倍、??１００ｎｇ／ｍｌ升高４＿３４倍（ｐ＜０．０５）。（Ｃ和Ｅ）?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ以及灰度量化分析检测了髓核细胞??经过１００ｎｇ／ｍｌ的ｒｅｓｉｓｔｉｎ分别处理８小时与２４小时后髓核细胞内ＡＤＡＭＴＳ５的表达量的变??化，结果显示髓核细胞内ＡＤＡＭＴＳ５的表达量随着ｒｅｓｉｓｔｉｎ处理的时间延长而递增，处理８??小时后升高１．４６倍、处理２４小时后升高２．４６倍（ｐ＜０．０５）。（Ｄ）?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ以及灰度量??化分析结果显示使用不同浓度的ｒｅｓｉｓｔｉｎ处理髓核细胞２４小时后，髓核细胞内的ＡＤＡＭＴＳ５??的表达量随着ｒｅｓｉｓｔｉｎ使用浓度的递增而递增，２５ｎｇ／ｍｌ升高３．１２倍、５０ｎｇ／ｍｌ升高４．３６倍、??ｌＯＯｎｇ／ｍｌ升高７．８４倍（ｐ＜０．０５）。上述实验证实了?ｒｅｓｉｓｔｉｎ可以刺激髓核细胞内ＡＤＡＭＴＳ５??
?附图???的上调。??Ｆｉｇｕｒｅ２．?Ｃｈａｎｇｅ?ｉｎ?ＡＤＡＭＴＳ－５?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ａｆｔｅｒｒｅｓｉｓｔｉｎ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．?ＲＴ－ＰＣＲ?（Ａ），?ｗｅｓｔｅｒｎ??ｂｌｏｔｔｉｎｇ（Ｃ），?ａｎｄ?ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ?ｄｅｎｓｉｔｏｍｅｔｒｉｃ?ａｎａｌｙｓｅｓ?（Ｅ）?ｓｈｏｗｅｄ?ｔｈａｔ?ＡＤＡＭＴＳ－５?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ??ｗａｓ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ?ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄ?ｉｎ?ａ?ｔｉｍｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｍａｎｎｅｒ．ＲＴ－ＰＣＲ?（Ｂ），?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ?（Ｄ），?ａｎｄ??ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ?ｄｅｎｓｉｔｏｍｅｔｒｉｃ?ａｎａｌｙｓｅｓ?（Ｆ）?ｓｈｏｗｅｄ?ｔｈａｔ?ＡＤＡＭＴＳ－５?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ｗａｓ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ??ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄ?ｉｎ?ａ?ｄｏｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｍａｎｎｅｒ．?（Ｐ?＜?０．０５）?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ；?Ｐ?＜?０．０５??ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｇｒｏｕｐ?ｏｆ?ｒｅｓｉｓｔｉｎ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ?ｆｏｒ?２４?ｈ?ｉｎ?Ａ?ａｎｄ?Ｅ；?Ｐ＜?０．０５?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ??ｇｒｏｕｐ?ｏｆ?ｒｅｓｉｓｔｉｎ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ?ａｔ?１００?ｎｇ／ｍＬ?ｉｎ?Ｂ?ａｎｄ?Ｆ）．??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Adipokines: Biomarkers for osteoarthritis?[J]. Thitiya Poonpet,Sittisak Honsawek. World Journal of Orthopedics. 2014(03)
本文编号：2962242
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：106 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１、ＭＴＴ方法检验ｒｅｓｉｓｔｉｎ处理髓核细胞后的髓核细胞活性的改变
图２：?Ｒｅｓｉｓｔｉｎ上调髓核细胞内ＡＦＡＭＴＳ５的表达。髓核细胞经过１００ｎｇ／ｍｌ的ｒｅｓｉｓｔｉｎ处理??不同时间点（４小时、８小时、２４小时）后，ＲＴ－ｑＰＣＲ结果（Ａ）显示随着ｒｅｓｉｓｔｉｎ处理时??间的延长，ｒｅｓｉｓｔｉｎ刺激髓核细胞内ＡＤＡＭＴＳ５的表达量也递增，处理４小时后升高２．５６??倍、处理８小时后升高３．９２倍、处理２４小时后升高４．２１倍（ｐ＜０．０５）。（Ｂ）髓核细胞经过??不同浓度的ｒｅｓｉｓｔｉｎ处理２４小时后，ＲＴ－ｑＰＣＲ结果显示随着ｒｅｓｉｓｔｉｎ使用浓度的递增，髓核??细胞内的ＡＤＡＭＴＳ５的表达量也随之递增，２５ｎｇ／ｍｌ升高２．３１倍、５０ｎｇ／ｍｌ升高３．７６倍、??１００ｎｇ／ｍｌ升高４＿３４倍（ｐ＜０．０５）。（Ｃ和Ｅ）?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ以及灰度量化分析检测了髓核细胞??经过１００ｎｇ／ｍｌ的ｒｅｓｉｓｔｉｎ分别处理８小时与２４小时后髓核细胞内ＡＤＡＭＴＳ５的表达量的变??化，结果显示髓核细胞内ＡＤＡＭＴＳ５的表达量随着ｒｅｓｉｓｔｉｎ处理的时间延长而递增，处理８??小时后升高１．４６倍、处理２４小时后升高２．４６倍（ｐ＜０．０５）。（Ｄ）?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ以及灰度量??化分析结果显示使用不同浓度的ｒｅｓｉｓｔｉｎ处理髓核细胞２４小时后，髓核细胞内的ＡＤＡＭＴＳ５??的表达量随着ｒｅｓｉｓｔｉｎ使用浓度的递增而递增，２５ｎｇ／ｍｌ升高３．１２倍、５０ｎｇ／ｍｌ升高４．３６倍、??ｌＯＯｎｇ／ｍｌ升高７．８４倍（ｐ＜０．０５）。上述实验证实了?ｒｅｓｉｓｔｉｎ可以刺激髓核细胞内ＡＤＡＭＴＳ５??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]Adipokines: Biomarkers for osteoarthritis?[J]. Thitiya Poonpet,Sittisak Honsawek. World Journal of Orthopedics. 2014(03)
本文编号：2962242
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