髌下脂肪垫源干细胞应用于软骨修复的实验研究

发布时间：2021-01-11 14:35

　　研究目的关节软骨缺乏自我再生和愈合能力,软骨病损后的修复问题仍是临床上的一项重大难题。再生医学的发展带来了治疗软骨病损的希望,在一些国家和地区已经开展使用干细胞修复关节软骨的临床试验。目前这些研究仍处于摸索、试错阶段,为了提高软骨修复效果,众多研究者开始把重心投在能够优化、改善干细胞治疗功能的策略上,包括干细胞的来源、预处理以及辅助材料上。本研究目的旨在评价IPFP-SCs作为干细胞来源用于修复软骨的可行性,并从PRP的优化选择和细胞分离途径两个方面分别进行研究,探讨IPFP-SCs修复关节软骨的方法,为临床应用提供思路和参考。研究内容及结果本实验研究由三部分组成。第一部分,使用酶消化法提取兔IPFP-SCs并进行体外培养、表型鉴定以及三向分化能力检测;使用两次离心法制备含白细胞PRP（L-PRP）与乏白细胞PRP（P-PRP）,通过体外实验分析比较两种不同形式PRP对IPFP-SCs的影响,如细胞增殖速率、细胞表型以及基因表达,并检测L-PRP与P-PRP对IPFP-SCs的成软骨能力之间的差异。第二部分,使用无酶非消化的方法分离、提取、培养IPFP-SCs,与传统酶消化法获取的IP... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：113 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

软骨病损的治疗途径

ESCs:胚胎干细胞；iPSCs:诱导多能干细胞；CSPCs:软骨源干/祖细胞ADSCs的应用策略主要从几个方面去考虑：应用形式（SVF或扩增的ADSCs）、细胞来源的选择、诱导分化技术、细胞递送的辅助物等几个方面，如图2所示。在应用形式的选择上，虽然SVF中ADSCs只是其中的成分之一，不能像扩增培养的ADSCs可以高效地达到一定的高剂量，但由于SVF已经在一些国家和地区的监管部门批准使用，而ADSCs仍被广泛认为是需要严格临床试验和监管批准的药品[6]，所以目前临床试验中大多数还是以SVF形式提供ADSCs。除了监管问题的优势，SVF的递送可以在当天同一手术室作为单一手术完成，这样避免耗时的细胞培养过程并减少污染的风险。不过很多学者还是认为经扩增培养的ADSCs除了能够便于提供剂量上的优势

图 1-1：酶消化法分离提取 IPFP-SCs 示意图。通过手术方法切取兔 IPFP，剪碎后加入0.1%I 型胶原酶溶液中，恒温振荡消化后经过过滤、离心获取 SVF，再接种到培养瓶中进行传代培养。（2）IPFP-SCs 的表征①细胞形态学观察：使用倒置光学显微镜观察 IPFP-SCs 的形态。在 6 孔

【参考文献】：
期刊论文
[1]Application of platelet-rich plasma with stem cells in bone and periodontal tissue engineering[J]. Gabriela Fernandes,Shuying Yang.  Bone Research. 2016(04)



本文编号：2970950