成纤维细胞生长因子受体3（FGFR3）调节的巨噬细胞在关节炎中的作用及其机制研究
发布时间：2021-01-11 14:36
研究目的骨性关节炎（Osteoarthritis,OA）是一种累及全关节的退行性疾病,是导致老年人出现关节疼痛症状甚至致残的重要原因,随着老龄化社会的到来,OA的发病率和患病人数逐年增加。OA发病原因复杂,目前为止,仍然缺乏较好的预防和治疗手段,使关节置换术成为晚期OA患者的唯一选择,给家庭和社会带来沉重经济负担。前期研究发现,慢性、低度的滑膜炎症反应是OA重要的病理特征之一,在OA疾病的发生发展过程中发挥重要作用。此外,异常的滑膜巨噬细胞募集和活化是介导滑膜炎症反应及软骨损伤的重要因素。近期本课题组报道成纤维细胞生长因子受体3（FGFR3）在OA疾病过程中对关节软骨发挥着重要的保护作用,但其对巨噬细胞及滑膜炎症的调控作用尚未见报道。本研究旨在揭示单核/巨噬细胞中的FGFR3在小鼠关节炎疾病过程中的作用及其具体机制,为关节炎的治疗新策略提供实验依据。研究方法1.建立FGFR3髓系细胞特异性敲除小鼠将杂合子FGFR3条件性敲除小鼠(FGFR3flox/+)与髓系细胞特异性表达cre的LysMcre小鼠杂交,获得同时含有FGFR3flo...
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：124 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
FGFR3flox/flox;LysMcre小鼠繁殖示意图
℃ 30 秒 35℃ 30 秒 35℃ 40 秒 35℃ 10 分钟 1 保存) 凝胶电泳鉴定基因型:取 0.9g 琼脂糖加入锥形瓶，加入 90mL 0.5X TBE，微波炉加热至琼脂糖热过程中应该时不时摇晃锥形瓶使液体受热均匀，避免液体沸出。待琼后停止加热，加入 Goldview 3μl，混匀。将液体倒入凝胶槽中，配成含 G凝胶；泳条件：160v，20 分钟。果判定：FGFR3-flox 带（KO band）为 380 bp，野生带（WT band）为带约为 500bp。详见下图（图 2-2）
图 2-3 小鼠尾静脉注射(4) 将小鼠尾巴浸泡于热水中 5-10 秒，使其尾静脉充分扩张，然后迅速擦干棉球消毒；(5) 将提前准备好的荧光微球从一侧尾静脉注入，每只小鼠注射 250μl。(6) 注射完毕后压迫止血，将小鼠放回笼内，小鼠活动正常，可进一步放入养，3 天后对小鼠进行取材，观察荧光微球标记的细胞在关节滑膜组织的聚2.3.16 小鼠灌注固定取材灌注固定可以对组织进行更加充分的固定，缩短固定时间，在荧光微球示踪为了保证荧光信号不过多衰减，我们采用了灌注固定的方式对小鼠进行固定骤如下：(1) 按体重给小鼠腹腔注射戊巴比妥麻醉小鼠；(2) 小鼠麻醉后将其四肢朝上固定于支架上，剪开胸腔暴露心脏；(3) 将连接有头皮针的 20mL 注射器（预先装入 4%PFA）刺入左心室，可见
【参考文献】：
期刊论文
[1]Role of FGF/FGFR signaling in skeletal development and homeostasis: learning from mouse models[J]. Nan Su,Min Jin,Lin Chen. Bone Research. 2014(01)
[2]Advances in NF-κB Signaling Transduction and Transcription[J]. Weihua Xiao~1 1 University of Science and Technology of China,China.2 Laboratory of Molecular Immunoregulation,NCI-Frederick,Frederick.MD 21702.USA.. Cellular & Molecular Immunology. 2004(06)
本文编号：2970953
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：124 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
FGFR3flox/flox;LysMcre小鼠繁殖示意图
℃ 30 秒 35℃ 30 秒 35℃ 40 秒 35℃ 10 分钟 1 保存) 凝胶电泳鉴定基因型:取 0.9g 琼脂糖加入锥形瓶，加入 90mL 0.5X TBE，微波炉加热至琼脂糖热过程中应该时不时摇晃锥形瓶使液体受热均匀，避免液体沸出。待琼后停止加热，加入 Goldview 3μl，混匀。将液体倒入凝胶槽中，配成含 G凝胶；泳条件：160v，20 分钟。果判定：FGFR3-flox 带（KO band）为 380 bp，野生带（WT band）为带约为 500bp。详见下图（图 2-2）
图 2-3 小鼠尾静脉注射(4) 将小鼠尾巴浸泡于热水中 5-10 秒，使其尾静脉充分扩张，然后迅速擦干棉球消毒；(5) 将提前准备好的荧光微球从一侧尾静脉注入，每只小鼠注射 250μl。(6) 注射完毕后压迫止血，将小鼠放回笼内，小鼠活动正常，可进一步放入养，3 天后对小鼠进行取材，观察荧光微球标记的细胞在关节滑膜组织的聚2.3.16 小鼠灌注固定取材灌注固定可以对组织进行更加充分的固定，缩短固定时间，在荧光微球示踪为了保证荧光信号不过多衰减，我们采用了灌注固定的方式对小鼠进行固定骤如下：(1) 按体重给小鼠腹腔注射戊巴比妥麻醉小鼠；(2) 小鼠麻醉后将其四肢朝上固定于支架上，剪开胸腔暴露心脏；(3) 将连接有头皮针的 20mL 注射器（预先装入 4%PFA）刺入左心室，可见
【参考文献】：
期刊论文
[1]Role of FGF/FGFR signaling in skeletal development and homeostasis: learning from mouse models[J]. Nan Su,Min Jin,Lin Chen. Bone Research. 2014(01)
[2]Advances in NF-κB Signaling Transduction and Transcription[J]. Weihua Xiao~1 1 University of Science and Technology of China,China.2 Laboratory of Molecular Immunoregulation,NCI-Frederick,Frederick.MD 21702.USA.. Cellular & Molecular Immunology. 2004(06)
本文编号：2970953
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