右美托咪定预处理通过PERK通路减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

发布时间：2021-01-12 00:05

　　目的:（1）观察右美托咪定预处理是否通过抑制过度的内质网应激及PERK通路介导的细胞凋亡对缺血再灌注损伤心肌起保护作用;（2）探讨PERK通路与?₂肾上腺素能受体的关系。方法:将符合实验标准的60只雄性SD大鼠随机分为5组（n=12）:（1）对照组（Control组）:用K-H溶液持续灌注205min;（2）缺血再灌注组（I/R组）:平衡灌注15min后,K-H溶液持续灌注30min,继之停止灌注40min,随后再灌注120min;（3）右美托咪定预处理组（DEX组）:平衡灌注15min后,用含右美托咪定（10 nM）的K-H溶液持续灌注30min,余处理同I/R组;（4）?₂肾上腺素能受体阻滞剂育亨兵处理组（YOH组）:平衡灌注15min后,用含育亨兵（1?M）的K-H溶液持续灌注30min,余处理同I/R组;（5）右美托咪定预处理+育亨兵处理组（DEX+YOH组）:用含有右美托咪定（10 nM）以及育亨兵（1?M）的K-H溶液持续灌注30min,余处理同I/R组。经Lab Chart系统记录大鼠平衡末（T₁）、缺血前... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

心脏Langendorff离体灌注及缺血再灌注模型实验分组图

⑥一抗反应、洗膜：用 TBST 稀释一抗(anti-GRP78，1/1000；anti-PERK，1/1000；anti-p-PERK，1/1000； anti-eIF2α，1/1000；anti-p-eIF2α，1/1000；anti-ATF4，1/1000；anti- CHOP，1/1000； anti-GAPDH，1/1000)，将⑤中的 PVDF 膜加入一抗工作液，在 4 ℃条件下，孵育过夜，继之用 TBST 洗涤 3 次；⑦二抗反应、洗膜：用 TBST 按照 1：10000 稀释荧光二抗，并将⑥中反应膜加入到二抗工作液里避光孵育 2h，接着用 TBST 洗膜 2 次；⑧显色、成像、测定：按照 ECL 试剂盒说明，将 1：1 混合后的液体在 PVDF 膜上均匀铺上，而后在室温中孵育 4min，接着倒掉 PVDF 膜上多余液体，最后目标蛋白用ECL 系统测定。1.3.8 实验流程图

21图 3 各组实验大鼠在不同时点心功能比较(A)各组大鼠在 T1、T2、T3时点 HR 的比较；(B)各组大鼠在 T1、T2、T3时点 RPP 的比较；(C)各组大鼠在 T1、T2、T3时点+dp/dtmax的比较；(D)各组大鼠在 T1、T2、T3时点-dp/dtmax的比较；(E)各组大鼠在 T1、T2、T3时点 LVDP的比较；(F)各组大鼠在 T1、T2、T3时点 LVEDP 的比较注：与 T1时点比较， P 0.05;T3时点，与 Control 比较，#P 0.05；与 I/R 组比较， P 0.05；与 DEX 组比较， P 0.05

【参考文献】：
期刊论文
[1]针灸对心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡信号转导通路影响的研究进展[J]. 肖燕,丁亮,顾一煌.  针刺研究. 2017(05)
[2]缺血后处理抑制内质网应激PERK通路减轻大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤[J]. 邹麓,吴楠,李晓岩,刘春婷,贾大林.  解剖科学进展. 2017(04)
[3]内质网应激的信号通路以及调控机制（英文）[J]. Jing GONG,Xing-zhi WANG,Tao WANG,Jiao-jiao CHEN,Xiao-yuan XIE,Hui HU,Fang YU,Hui-lin LIU,Xing-yan JIANG,Han-dong FAN.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2017(01)
[4]耐力训练对心肌PERK/eIF2α/ATF4信号通路激活的影响[J]. 王蕴红,王智强,刘晓然,陈怡月,李丁丁,余海燕,姚政立.  首都体育学院学报. 2016(03)
[5]内质网整合应激反应[J]. 陶天琪,刘秀华.  生理科学进展. 2013(04)



本文编号：2971736