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内体转运信号在脊索样髓核细胞退变中的效应研究

发布时间:2021-01-11 23:54
  第一部分脊索样髓核细胞的分离提取目的:分别通过percoll密度梯度离心法以及细胞筛法分离并培养大鼠尾椎来源的脊索样髓核细胞,通过形态学手段观察鉴定脊索样髓核细胞,比较两种技术分离脊索样髓核细胞方法的效率,为下一步细胞学分析鉴定实验基础。方法:取4周龄的SD大鼠30只,随机分成无筛组、percoll密度梯度离心组与细胞筛组。取大鼠尾椎髓核组织,分别通过无筛组、percoll密度梯度离心法与细胞筛法分离出髓核细胞。光镜下观察各组方法下细胞形态学标记并分类计数,透射电镜下观察脊索样髓核细胞形态。结果:无筛组提取细胞总数较多(p<0.05),有“液泡”结构细胞/视野下细胞总数比例低于两种筛选提取法(p<0.05)。percoll组提取的有“液泡”结构的细胞较细胞筛组更多(p<0.05),percoll组提取的细胞总数也高于细胞筛组(p<0.05)。percoll组下观察到有“液泡”结构细胞/视野下细胞总数的比例与细胞筛法无明显统计学差异(p>0.05)。电镜可见脊索样髓核细胞多为20-30μm大小,细胞胞浆内富含大小不等的各类空泡,是一种由不完整的胞浆单层胞膜包... 

【文章来源】:东南大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:90 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

内体转运信号在脊索样髓核细胞退变中的效应研究


图1:两种方式提取脊索样髓核细胞(200x)?:A细胞筛法;Bpercoll密度梯度离心法??

形态图,脊索,空泡,髓核


?第一部分眢索样髓核细胞的分萬提取???用高倍显微镜可见胞浆内明显大而猜亮空泡的脊索祥髄核细胞(图2D).??議??图2脊索样髓核细胞形态观察:ABC透射电镜下脊索细脃约20-30/jm,胞浆内空泡为不连续单层胞膜结构;??D光镜下脊索细胞可见胞内空泡大而清亮。??27??

空白图,髓核,脊索,形态学


?第一部分脊索样髓核细胞的分离提取???3实验结果及数据分析??3.1?BFA组、对照组和空白组脊索样髓核细胞形态学观察:??A?B??_?_??c?-??:遍囊??图3:对照组(A)、BFA组(B)和空白组(C)脊索样髓核细胞形态学观察??如图3可见,2〇(k倒置光学显微镜下,较对照组与空白组(图3??AC)内多角形细胞内较多大而致密的细胞内空泡,BFA处理后的脊索??样髓核细胞虽外形维持为多角形,但胞质内空泡减少,且较为细碎。??使用ImageJ软件计算空泡在细胞内的面积。如表3,BFA组细胞??空抱空泡面积比较其余两组较小(P<〇.〇5),空白组与对照组内无差??别(p>0.〇5)。BFA处理后确实对脊索样髓核细胞内空泡形成有抑制??作用。??32??

【参考文献】:
期刊论文
[1]大鼠尾椎与腰椎髓核组织及细胞的分离培养以及髓核表型的对比研究[J]. 康新桂,吴小涛,王锋,时睿,蔡峰,朱厚毅.  东南大学学报(医学版). 2016(03)
[2]Hedgehog信号转导通路与软骨细胞[J]. 肖良,徐宏光.  国际骨科学杂志. 2016(02)
[3]渗透压负荷对兔椎间盘器官培养模型的影响[J]. 牛朋彦,熊伟,李锋,周松,陈文坚,霍喜卫.  中国脊柱脊髓杂志. 2009(10)

博士论文
[1]脊索细胞体外诱导骨髓间充质干细胞定向分化及联合移植阻止兔椎间盘退行性变的实验研究[D]. 张彦男.华中科技大学 2011
[2]脊索细胞遗迹与脊索瘤发生的相关性研究[D]. 沈军.苏州大学 2010



本文编号:2971721

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