缺氧复氧环境对成骨细胞自噬水平的影响

发布时间：2021-01-14 10:20

　　目的:探讨缺氧复氧环境对成骨细胞自噬水平的影响。方法:取24⁴8 h内新生SD大鼠的头盖骨,通过组织块贴壁法培养和差速离心法纯化成骨细胞,采用茜素红染色和碱性磷酸酶染色法对成骨细胞矿化钙结节及成骨细胞生物学特性进行鉴定。将第3代成骨细胞在正常状态下培养,并随机分为4组:A组在正常状态下培养36 h;B组在正常状态下培养18 h,再在缺氧状态下培养18h;C组在缺氧状态下培养36 h;D组在缺氧状态下培养18 h,再在正常状态下培养18 h。培养结束后观察4组细胞形成矿化钙结节的能力,同时采用CCK-8法检测细胞增殖活性。随后采用定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测自噬特异性基因Beclin1、微管相关蛋白轻链3（LC3）及成骨细胞特异性基因胶原蛋白Ⅰ（COL-Ⅰ）和骨形态发生蛋白2（BMP-2）的表达。免疫蛋白印记技术检测成骨细胞自噬蛋白Beclin 1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及自噬选择性底物P62蛋白的表达。组间数据比较采用单因素方差分析。结果:4组成骨细胞培养18d后通过茜素红染色发现A组成骨细胞矿化钙结节能力最强,而B、C和D组矿化钙结节能力明显降低,且D组... 

【文章来源】：皖南医学院安徽省

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

成骨细胞造模后4组成骨细胞茜素红染色图（×40）

图 1 成骨细胞的生物学性质检测：A 为成骨细胞茜素红染色，可见成团的红色钙结节（×40）；B 为碱性磷酸酶染色，可见细胞形态呈现梭形、多边形，细胞内有紫褐色颗粒（×40）2 缺氧复氧对成骨细胞生物学性质的影响成骨细胞培养 18 d 后，A 组在正常培养皿培养后成骨细胞钙化能力最强，和 A

【参考文献】：
期刊论文
[1]氧环境对成骨细胞活性的影响[J]. 武成,郑伟伟,杨民.  中华医学杂志. 2017 (03)
[2]白藜芦醇诱导细胞自噬在神经退行性疾病进展中的作用[J]. 董雯,王蓉.  药学学报. 2016(01)
[3]原发性骨质疏松症的病因学研究进展[J]. 王方,邹德威,吴继功,马华松.  中国骨质疏松杂志. 2012(07)
[4]缺氧条件对成骨细胞VEGF和TGF-β1表达影响的实验研究[J]. 关键,王健平,车笑非,李德超.  中国修复重建外科杂志. 2008(08)
[5]丹参对人成骨细胞缺血-再灌注损伤的保护作用[J]. 王福生,王立德,谷玲,宋淑云,洪新,李素凤.  中国现代医学杂志. 2000(05)

硕士论文
[1]缺氧及缺氧复氧环境对成骨细胞影响的研究[D]. 武成.皖南医学院 2017
[2]缺氧对大鼠成骨细胞作用机制的研究[D]. 顾九君.兰州大学 2007



本文编号：2976719