创伤性脊髓损伤后DNA 5羟甲基化胞嘧啶水平对相关基因表达影响的研究

发布时间：2021-01-17 02:53

　　目的:建立脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）的大鼠模型。通过检测不同损伤时间点大鼠的脊髓组织中的整体DNA（deoxyribonucleic acid,脱氧核糖核酸）的5hmC（5 hydroxymethylated cytosine,5羟甲基化胞嘧啶）的水平,研究脊髓损伤后脊髓组织整体DNA的5hmC水平与损伤时间的关系。检测损伤组的脊髓组织和对照组的脊髓组织,通过QPCR（Real-time Quantitative PCR Detecting System,实时荧光定量核酸扩增检测系统）检测相关TET（ten-eleven translocation）基因的转录水平,通过Western blot来检测TET蛋白的表达变化。通过抑制TET2蛋白的表达来检测脊髓组织的损伤范围的改变。通过抑制TET2蛋白的表达来检测脊髓组织与坏死性相关及与保护相关的基因的表达的改变情况。方法:建立脊髓损伤模型。选取32只5-6月龄的SD大鼠,按照时间点分为8组（对照组,损伤3h组,损伤6h组,损伤12h组,损伤24h组,损伤48h组,损伤3d组,损伤7d组）,每组4只老鼠。按照选... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：39 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

脊髓损伤后DNA5hmC的整体水平变化

脊髓损伤后 TET 酶的变化。（A）脊髓损伤后 24h，对照组和 SCI 组 TET1 / 2/3 mR的 qPCR 分析，GAPDH 用作对照。 （B）同时提取脊髓组织中的蛋白质。通过蛋白析检查对照组和 SCI 组中的 TET2 蛋白水平,并进行 TET2 蛋白的定量分析。 *与对组相比，P <0.05。 N = 4制 TET2 活性增强脊髓损伤后的坏死体积了确定脊髓损伤后 5hmC 的变化是否会影响继发性脊髓损伤，将一种 TE抑制剂 SC-1 注射到大鼠的脊髓组织中再进行损伤造模[13]。在造模完成后间点，迅速从损伤部位取出脊髓，然后切成 1mm 切片，用 0.2％TTC 孵n。结果显示 SC1 可增加脊髓组织的坏死体积（图 3）。这些结果表明 TE的 5hmc 修饰在脊髓损伤中起关键作用。

S、SCI、SCI+S 分别表示：对照组，SC-1 组，SCI 组，S后的坏死面积。脊髓损伤后，用 SC-1 处理大鼠 24 小时示了 TTC 的代表性图片。 （B）进行坏死体积的定量分比，P <0.05; #P <0.05，与 SCI 组相比。 N =4。


本文编号：2982055