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骨折固定术后感染临床预后的年龄效应及相关实验研究

发布时间:2021-01-23 15:42
  背景:骨折固定术后感染(IAFF)会增加骨不连、骨髓炎和内固定失效等风险。年龄与感染的相关性研究已经成为近年来的热点,研究发现严重损伤、严重疾病和开放性胫骨骨折术后,儿童感染率低而预后更好,并且与炎症细胞因子、固有免疫细胞及骨髓间充质干细胞(BMSCs)相关。目前少有针对儿童与成年患者闭合性四肢骨折术后感染的大样本临床研究,以及抗感染机制中年龄效应的相关动物模型研究。目的:结合临床研究结果,建立小鼠股骨闭合性髓内微骨折、髓内针固定及金黄色葡萄球菌急性感染、具有幼年与成年可比性的动物模型,并进一步研究炎症反应中的年龄效应。方法:回顾分析2012-2016年间因闭合性四肢骨折在厦门大学附属福州第二医院和南方医科大学附属南方医院治疗的儿童组2405例和成年组1422例病例资料;选C57BL/6小鼠幼年组(Young、5 Week)和成年组(Adult、8 Mon),行股骨远端髓内微骨折髓内针固定(IN)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)感染、急性期取材;幼年和成年小鼠均分空白Control、IN、IN+S.aureus组。通过组织及心脏血细菌梯度培养、组织HE染色改良Smeltzer评分、... 

【文章来源】:南方医科大学广东省

【文章页数】:119 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

骨折固定术后感染临床预后的年龄效应及相关实验研究


图2-1?Fig.2-l.X线摄片,幼年与成年小鼠股骨髓腔分别置入相应长度和直径的不锈钢髓内??

细菌鉴定,镊子


?Young?Adult??图2-1?Fig.2-l.X线摄片,幼年与成年小鼠股骨髓腔分别置入相应长度和直径的不锈钢髓内??针.??2.2.7造模后感染细菌鉴定??采用前述腹腔注射方法麻醉后,70%酒精浸泡消毒(有齿镊夹住耳朵,保留??头部通气)5分钟,使用无菌剪剪开胸部皮肤及肋骨,暴露心脏,直视下使用lml??注射器进行心脏穿刺采血,每只小鼠取心脏血400ul;小鼠失血性休克死亡后置??于超净台内准备好的70%酒精杯内,再次全身浸泡消毒5min。消毒完毕后,将小??鼠置于10cm培养皿内。试验前一天,高压灭菌好两套器械,每套包含剪刀、??28??

细菌鉴定


琼脂培养皿置于37°C恒温二氧化碳孵箱培养过夜。过夜后可见培养皿中菌落形??成,送南方医院检验科鉴定细菌种属。结果显示,所鉴定出的金葡菌与实验所??用菌株一致。(图2-2)??2.2.8细菌梯度培养??我们从心脏采集的外周血和股骨的髓腔内容物分别进行琼脂平板细菌梯度??培养,预实验中,首先把外周血和股骨髓腔内容物悬液作一系列的稀释倍数(如??1:10、1:100、1:1000、1:10000、1:100000、1:1000000),然后分别取不同稀释液??各100ul,滴入制作好的琼脂培养皿表面,摇勾。在37°C恒温孵箱培养24小时后,??在琼脂培养皿表面出现了表面凸起、圆形、湿润的细菌菌落,颜色呈黄色,菌??落直径约2mm到3mm之间(对照组,感染组培养结果见下图)。按操作说明,选??择琼脂培养皿表面长有30-300个菌落的稀释度计算菌落数。同时我们取样送南方??医院检验科鉴定菌种,结果显示培养出的细菌菌种为金黄色葡萄球菌(鉴定结??果见下图),且与试验造模用金黄色葡萄球菌为同一菌种。(图2-3)??姓名:*?和?科別:?分》物??Hi?号:?149661??l|:?:?IW;?itK:??峰??H


本文编号:2995476

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