Wnt/β-catenin信号通路对人骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的影响

发布时间：2021-02-24 15:37

　　目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,b FGF）、表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）单独及联合对人骨髓间充质干细胞（human bone marrow mesenchymal stem cells,h BMSCs）向神经细胞分化的影响,并进一步研究Wnt/β-catenin信号通路在h BMSCs向神经细胞分化中的作用。方法:（1）将购自江阴齐氏生物科技有限公司第2代h BMSCs进行传代、纯化,取第4代h BMSCs进行流式细胞仪检测细胞表面骨髓基质标志CD44、CD90和造血细胞标志CD19、CD34。（2）取第4-6代干性维持较好的h BMSCs,以含1%FBS的α-MEM为基础诱导培养基,根据诱导条件不同分为5组:空白对照组（不添加任何物质）、EGF组（添加20 ng/m L EGF）、b FGF组（添加20 ng/m L b FGF）、EGF+b FGF组（添加20 ng/m L EGF及20 ng/m L b FGF）、EGF+b FGF+DKK-1组（添加20 ng/m L E... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞来源
        2.1.2 主要试剂及耗材
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 主要试剂配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 器材的准备
        2.2.2 hBMSCs传代、纯化
        2.2.3 流式细胞仪鉴定hBMSCs
        2.2.4 诱导分化分组
        2.2.5 细胞形态学观察
        2.2.6 RT-PCR检测相关mRNA表达水平
        2.2.7 免疫荧光检测相关蛋白表达情况
        2.2.8 Western blot检测相关蛋白表达水平
    2.3 统计学处理
第3章 结果
    3.1 hBMSCs流式鉴定结果
    3.2 hBMSCs诱导分化后细胞形态观察结果
    3.3 神经细胞标志检测结果
        3.3.1 神经细胞标志mRNA水平检测结果
        3.3.2 神经细胞标志蛋白水平检测结果
    3.4 Wnt/β-catenin信号通路检测结果
        3.4.1 Wnt/β-catenin信号通路关键组件mRNA水平检测结果
        3.4.2 Wnt/β-catenin信号通路关键组件蛋白水平检测结果
第4章 讨论
    4.1 SCI的治疗现状
    4.2 BMSCs概述
    4.3 EGF、bFGF诱导hBMSCs成神经分化的作用
    4.4 Wnt/β-catenin信号通路对hBMSCs成神经分化的影响
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]大鼠BMSCs自发钙化过程中成骨相关基因表达谱的分析[J]. 焦雪峰,黄永灿,黄益洲,吴诚光,邓力.  中国修复重建外科杂志. 2014(02)
[2]Wnt/β-catenin信号通路在大鼠BMSCs神经分化中的作用研究[J]. 何丁文,殷明,邬亚华,周荣平,魏强强,殷嫦嫦.  中国生物工程杂志. 2013(03)
[3]Wnt/β-catenin信号通路对间充质干细胞衰老的影响及其作用机制[J]. 项晓霞,陈律,王骏浩,张余斌,张大勇.  浙江大学学报(医学版). 2011(06)
[4]川芎嗪联合创伤性脑组织匀浆液诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化[J]. 梁峰,马洁华,杨丽娜.  中国组织工程研究与临床康复. 2011(23)
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[7]脊髓损伤治疗药物的研究进展[J]. 邓凤君,杨迎暴,徐江平.  中国药理学通报. 2009(02)
[8]共培养法神经细胞诱导骨髓间充质干细胞向神经元的分化[J]. 杨乃龙,杨芬,徐丽丽.  中国组织工程研究与临床康复. 2008(29)
[9]脊髓损伤的治疗进展[J]. 雷德强,赵洪洋,刘如恩,邓兴力.  中国现代神经疾病杂志. 2008(01)
[10]丹参诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化[J]. 王勇,陆长青,王凡.  解剖学杂志. 2007(02)

硕士论文
[1]高压氧治疗脊髓损伤的疗效评估及影响因素[D]. 张娟.吉林大学 2013



本文编号：3049586