Sigma-1受体在小鼠肝缺血再灌注损伤中表达与作用机制研究

发布时间：2021-03-04 15:14

　　目的:研究Sigma-1受体在小鼠肝缺血再灌注损伤中的表达、功能及可能的作用机制。方法:1、将C57BL/6小鼠随机分为对照组和肝缺血再灌注组,建立小鼠肝缺血再灌注模型。分别采用RT-PCR和Western blot分别检测小鼠正常肝组织和缺血1小时再灌注6小时、12小时、24小时小鼠肝组织中Sigma-1受体mRNA表达水平和蛋白表达水平变化。2、C57BL/6小鼠随机分为对照组、肝缺血再灌注组、Sigma-1受体激动剂组及Sigma-1受体激动剂和抑制剂联合组。使用Sigma-1受体激动剂4-PPBP和Sigma-1受体抑制剂NE-100预处理C57BL/6小鼠,对照组和肝缺血再灌注组小鼠注射等体积生理盐水。Western-blot检测各组小鼠肝组织Sigma-1受体的蛋白表达水平变化。3、通过检测对照组、肝缺血再灌注组、Sigma-1受体激动剂组及Sigma-1受体激动剂和抑制剂联合预处理小鼠血清AST和ALT水平和肝组织病理学变化评估肝损伤情况变化。4、通过RT-PCR检测各组小鼠肝组织细胞因子TNF-α、IL-6和IL-10的mRNA表达水平变化,Elisa实验检测小鼠血清T... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
材料与方法
    1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验试剂和耗材
        1.3 实验主要仪器
    2 实验方法
        2.1 药物配制
        2.2 小鼠肝缺血再灌注模型
            2.2.1 实验分组
            2.2.2 小鼠肝缺血再灌注模型的构建
        2.3 实验标本采集处理
            2.3.1 小鼠血液标本采集处理
            2.3.2 小鼠肝组织标本采集处理
        2.4 Real-time PCR操作步骤
            2.4.1 小鼠肝组织总RNA的提取
            2.4.2 RNA纯度及浓度测定
            2.4.3 逆转录反应
            2.4.4 Real-Time PCR
        2.5 蛋白免疫印迹实验
            2.5.1 小鼠肝组织蛋白的提取
            2.5.2 小鼠肝组织蛋白浓度测定
            2.5.3 聚丙烯酰胺凝胶制备
            2.5.4 电泳
            2.5.5 转膜
            2.5.6 封闭
            2.5.7 抗体孵育
            2.5.8 显影
        2.6 小鼠血清AST和 ALT水平检测
        2.7 小鼠肝组织病理学检测
        2.8 Elisa实验步骤
    3 统计学处理
结果
    1 Sigma-1 受体在小鼠肝缺血再灌注损伤后肝组织的表达水平变化
    2 Sigma-1 受体对小鼠肝缺血再灌注损伤的影响
    3 Sigma-1 受体对小鼠肝组织和血清细胞因子表达的影响
    4 Sigma-1 受体调控肝缺血再灌注损伤的作用机制
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
致谢



本文编号：3063446