骨形成过程中Wnt/β-catenin信号通路的作用与机制

发布时间：2021-03-17 12:54

　　目的使用不同方法以激活Wnt/β-catenin通路,观察其对骨形成和骨愈合的影响,并探讨其机制。方法1.制作大鼠股骨骨折模型,将SB-415286注射于骨折端。采用western blotting方法检测骨痂内β-连环蛋白（β-catenin）、核增殖抗原（PCNA）、骨形态发生蛋白-2（BMP-2）的蛋白表达;免疫组化检测成骨细胞增殖和成骨作用;使用Micro-CT测量骨痂骨量和骨密度;术后3周,骨折标本行生物力学测试。2.构建表达mi R-199a基因的慢病毒载体,体外预感染MC3T3-E1细胞,检测其感染效率。将慢病毒注射于萎缩性骨不连骨折端,采用实时定量RT-PCR的方法检测其对骨痂内β-catenin基因表达的影响。使用组织学、免疫组化、MicroCT、放射学方法检测其对萎缩性骨不连愈合的影响。3.建立大鼠卵巢切除骨质疏松模型,经尾静脉注射慢病毒载体,取股骨做相应检测。使用Micro-CT检测右股骨颈的骨微结构和骨量变化;检测右股骨干生物力学变化。4.制作大鼠右股骨开放骨折模型,术后注射Sclerostin单克隆抗体（Scl-Ab）。观察其对骨折愈合的影响;并观察其对左侧完... 

【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：134 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

术中照片，显示手术切口、克氏针的插入和股骨骨折线

Westernblotting分析β-连环蛋白(β-catenin)、增殖细胞核抗原(PCNA)和骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的表达

免疫组化分析增殖细胞核抗原(PCNA)的表达(A)术后1周(a,b)和2周(c,d)，PCNA标记对照组(a,c)和SB-415286组(b,d)骨痂内增殖细胞(B)外骨痂内PCNA阳性细胞数分析数据为均数±标准差Figure3.Immunohistochemicalanalysisofproliferatingcellnuclearantigen

【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-199a在肾细胞癌中的表达与临床病理特征及预后的关系[J]. 司彤,刘春晓,许凯,桂耀庭.  南方医科大学学报. 2012(11)



本文编号：3087174