负重运动与LIPUS双重干预对去卵巢大鼠股四头肌的影响及生物学机制研究

发布时间：2021-03-20 07:02

　　目的:肌肉萎缩成为一种临床上常见的疾病。女性到一定年龄会出现绝经现象,绝经后人体内雌激素水平急剧下降,肌肉质量和强度的下降对人体生理功能产生一系列负面影响,增加了患多种疾病的风险。骨骼肌是运动系统的动力部分,在神经驱使下,进行正常的收缩,关节作为枢纽,牵动骨活动。肌肉萎缩疾病严重影响绝经女性的日常生活,而科学的体育运动则可以预防肌肉萎缩,并且对肌肉质量、面积、肌力都有良好的改善作用,有针对性的运动方式对骨骼肌有更加积极影响,如抗阻力运动中的一种方式负重运动。低强度脉冲超声（LIPUS）是近几年作为一种被公认的无创伤、安全可靠的治疗工具被广泛运用于损伤部位和骨折愈合的治疗中。作为一种机械刺激,促进细胞增殖与存活,对软组织及骨骼肌的影响而备受关注,其探究空间和价值甚高。采用运动和低强度脉冲超声双重干预手段在预防和治疗肌肉萎缩相关领域研究匮乏。因此本实验建立切除大鼠双侧卵巢模型,采用负重运动和低强度脉冲超声以及二者联合干预手段,从基因、蛋白、组织学、病理学等角度去研究不同干预手段对切除卵巢大鼠股四头肌的影响以及相关机制研究。在细胞层面通过研究四点弯曲力学加载仪模拟运动和低强度脉冲超声两种手段... 

【文章来源】：陕西师范大学陕西省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：85 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１构建大鼠双侧卵巢切除手术模型??１５??

除模型组（０ＶＸ，ｎ＝１４）、??卵巢切除负重运动组（０＋Ｗ，ｎ＝１４）、卵巢切除超声治疗组（０＋Ｕ，?ｎ＝１４）和卵??巢切除负重运动与超声治疗联合组（Ｏ＋Ｗ＋Ｕ，ｎ＝１４）。卵巢切除手术２ｗ雌性大??鼠伤势均疫愈后，０＋Ｗ组和０＋Ｗ＋Ｕ组进行负重运动，雌性大鼠承受的重量约为??自身的３５％。让大鼠进行适应性运动ｌｗ，使其习惯跑台不对其产生抗拒，接着进??行正式跑台运动，负重运动跑台速度设置为２０?ｍ／ｍｈｉ，运动时间为３０?ｍｉｎ，每周??运动６?ｄ，负重运动总周期为１０?ｗ?（图２）。??１０?ｗ负重运动周期结束后，假手术组、模型组和０＋Ｗ组处死８只大鼠，取其??血清和组织进行检测。０＋Ｕ和０＋Ｗ＋Ｕ组则使用ＬＩＰＵＳ干预，０＋Ｗ＋Ｕ组中采用??的运动方案和０＋Ｗ组采用的运动方案一致。超声波强度为３０?ｍＷ／ｃｍ２，占空比为??２０％，中心频率为１．５?ＭＨｚ，脉冲频率为１００?Ｈｚ，将超声治疗仪涂抹医用耦合剂的??双探头放置在大鼠股四头肌上，（大鼠股四头肌两侧毛发每天在实验前剔除），??每天治疗２〇１＾１１，每周治疗６小持续３？。??ｍｍ?－?＾??Ｍｌ／??图２负重运动训练装置（Ａ）和低强度脉冲超声治疗装置（Ｂ）??２．２．４体重和抓力的称量和测试??大鼠重量每周一测。大鼠进食量和饮水量通过电子称和两筒测量，大鼠抓力??采用大小鼠抓力测试器（型号：ＹＳＬ－Ｉ３Ａ），测试前将大鼠双脚放置在测试器的??水平网格上，让其双脚处于稳定，测试前让仪器处于归零状态，提起大鼠尾巴快??１６??

?２材料与方法??速后拉，最终脱离测试器，读取测试器上的数据即为大鼠的抓力大小，抓力的测??试单位为ｇ，每只大鼠抓力重复３次，最后记均值（图３）。??遂，＇層麵一．，??Ｗｍｍ??图３大鼠抓力测试??２．２．５血清和动物组织的采集及生物化学指标检测??将负重运动和ＬＩＰＵＳ治疗结束后对大鼠进行取材，处死前一天晚上禁食，提??前冷冻数个冰盘，高压锡箔纸、装组织的纱布袋，待后期使用。第二天对大鼠实??行果断脱颈、人道主义处死的方法，用无菌无酶的ＥＰ管收集血液，立即放入３７?°Ｃ??恒温水浴锅１５?ｍｉｎ，?３０００ｉ？离心，提取上清层置离心管，记分组，立即存放－８０°Ｃ，??后期检测血清。将取下的股四头肌和子宫放入预冷并有生理盐水的培养皿中，随??后剔除筋膜，待滤纸充分吸干表皮水分后，称量做记录。大鼠左侧的股四头肌组??织放入１０％的中性甲醛中，谨记完全淹没浸泡到甲醛里面，待后期做形态学检测。??右侧股四头肌用锡箔纸包裹，做好记录后，迅速放入液氮，２４?ｈ以后取出放入－８０°Ｃ??冰箱，待后期做Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ和ＲＴ－ｑＰＣＲ实验。订购南京建成生化实验试剂盒检??测各组大鼠ＬＤＨ的血清指标、检测各组大鼠ＣＫ的血清指标。??２．２．６Ｈ＆Ｅ?染色??（１）固定：首先将股四头肌从４％的中性甲醛中随机取出一块，切成１＊１＊０．５?ｃｍ??的组织块，放到组织固定夹里面。??（２）流水冲洗过夜。??１７??


本文编号：3090578