右美托咪定对巨噬细胞糖酵解的影响及潜在机制研究

发布时间：2021-03-25 02:56

　　研究目的巨噬细胞是固有免疫系统的重要组成部分,对机体的免疫和炎症不可或缺。近年来,巨噬细胞的糖酵解与其功能之间的联系成为人们研究的热点。糖酵解在巨噬细胞炎性激活中发挥关键作用。缺氧诱导因子（HIF-1α）是巨噬细胞的代谢开关,是巨噬细胞糖酵解的关键调控因子。右美托咪定（DEX）已被证明具有抗炎作用,然而,DEX的抗炎作用与HIF-1α依赖的糖酵解是否相关尚不清楚。本文研究了DEX在LPS诱导的巨噬细胞炎性激活中的作用及其机制。研究方法1.观察DEX对巨噬细胞炎性反应的作用体外分离培养小鼠腹腔巨噬细胞（PM）和小鼠骨髓来源的巨噬细胞（BMDM）,用LPS和DEX分别或同时刺激细胞,6h后收集细胞和上清,ELISA法检测炎症因子TNF-α和IL-6的水平,Q-PCR法检测TNF-α和IL-6的mRNA表达水平。2.探讨糖酵解在DEX抗炎中的作用首先观察DEX对糖酵解的影响。体外分离培养PM和BMDM,用LPS和DEX分别或同时刺激细胞,6h后收集细胞和上清,测定上清中的细胞外酸化率（ECAR）,葡萄糖和乳酸的浓度,检测糖酵解关键酶GLUT1、HK2和PFKFB3的mRNA表达水平。随后用粒... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

DEX对LPS诱导的PM释放炎症因子的影响

图 2 DEX 对 LPS 诱导的 PM 释放炎症因子 mRNA 的影响与 LPS 组相比，** P < 0.01，*** P < 0.001（三）DEX 对 LPS 诱导的 BMDM 分泌炎症因子的影响体外分离培养 BMDM，LPS（100ng/μL）与 DEX（1μM）分别或同时处理，6h集上清，ELISA 法检测上清 TNF-α 和 IL-6 的水平。结果显示，在 BMDM 中，LPS 组的 TNF-α 和 IL-6 水平显著增加，LPS+DEX组的 TNF-α 和 IL-6 水平较 LPS 组明显降低（P < 0.01）（图 3）。

图 2 DEX 对 LPS 诱导的 PM 释放炎症因子 mRNA 的影响与 LPS 组相比，** P < 0.01，*** P < 0.001（三）DEX 对 LPS 诱导的 BMDM 分泌炎症因子的影响体外分离培养 BMDM，LPS（100ng/μL）与 DEX（1μM）分别或同时处理，6h集上清，ELISA 法检测上清 TNF-α 和 IL-6 的水平。结果显示，在 BMDM 中，LPS 组的 TNF-α 和 IL-6 水平显著增加，LPS+DEX组的 TNF-α 和 IL-6 水平较 LPS 组明显降低（P < 0.01）（图 3）。


本文编号：3098887