Progerin在椎间盘退变中的作用及相关机制研究

发布时间：2021-03-27 17:49

　　背景下腰痛（Lowback pain）是一种临床上广泛存在的骨骼肌肉疾病。据报道,高达80%的人在其一生中会受到下腰痛的影响,造成了巨大的经济和医疗负担。椎间盘退变是引起下腰痛最常见的原因。髓核（nucleus pulposus,NP）细胞是椎间盘的重要组成部分,能够通过调节细胞外基质的动态平衡,从而维持椎间盘的形态和功能。椎间盘退变的发病机制十分复杂,受到遗传背景、免疫系统状态、异常应力和衰老等多种危险因素的影响。这些因素最终会通过诱导髓核细胞衰老和凋亡,引起椎间盘退变的发生和发展。因此,阐明髓核退变损伤的机制将有助于更好地理解椎间盘退变的发病机制。Progerin的蓄积会在早老症（Hutchinson-Gilford Progeria Syndrome,HGPS）细胞中引起各种细胞缺陷,如核结构完整性受损、DNA损伤增加、氧化还原稳态受损和线粒体功能障碍等。值得注意的是,多种早衰综合症与衰老相关疾病具有显著的共性,一般人群中的progerin表达也与生理衰老有关。研究表明,progerin是一种被截短的、未成熟的Lamin A蛋白,参与多种疾病的发病机制,如骨关节炎、扩张性心肌病以... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

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椎间盘组织的结构

空军军医大学博士学位论文-36-QuickBlock免疫染色一抗稀释液碧云天生物技术有限公司，上海DAPI染色液碧云天生物技术有限公司，上海荧光抗淬灭封片剂碧云天生物技术有限公司，上海免疫组化染色试剂盒中杉金桥生物技术公司，北京DAB显色剂碧云天生物技术有限公司，上海TUNEL细胞凋亡检测试剂盒碧云天生物技术有限公司，上海2方法2.1髓核样本获取在椎间盘摘除术中收集了20例椎间盘退变或脊柱侧弯患者的髓核组织（10名男性，10名女性；平均年龄为36.4±17.4岁），取材节段位于L2和L3，L3和L4，L4和L5，L5和S1之间。以上实验过程均经过空军军医大学西京医院伦理委员会的批准及标本捐献者或家属的知情同意。椎间盘退变的程度是根据优化的Pfirrmann的核磁共振成像（magneticresonanceimaging，MRI）分级方法对髓核样本进行评级[179]。II级（5例）和III级（5例）纳入GradeII/III组，IV级（4例）和V级（6例）被纳入GradeIV/V组（图1-1）。图1-1人腰椎MRI图像2.2Westernblot检测1）髓核组织总蛋白提取：配置蛋白抽提试剂，与髓核组织的比例为1：10加入蛋白裂解液RIPA，同时各加入1/50体积的磷酸酶抑制剂及蛋白酶抑制剂。将髓核组

空军军医大学博士学位论文-39-2.6统计学分析实验数据用均数±标准误（Mean±SEM）表示，两组间的差异用Student’st检验比较，运用GraphPadPrism6.0进行数据分析并绘制图表，P<0.05认为差异有显著性。3结果3.1退变的人髓核细胞凋亡和衰老增多人的髓核组织切片的免疫荧光和免疫组化结果显示，与对照组GradeⅡ/Ⅲ组相比，GradeⅣ/Ⅴ组的基质蛋白aggrecan表达量显著降低，TUNEL及p16INK4a阳性髓核细胞数目显著增多（图1-2），表明人的退变髓核组织基质降解，髓核细胞凋亡和衰老增多。图1-2人的退变髓核组织基质降解，髓核细胞凋亡和衰老增多髓核组织冰冻切片显示aggrecan免疫荧光（绿色）表达在GradeⅣ/Ⅴ组显著降低，而TUNEL染色及免疫组化结果显示GradeⅣ/Ⅴ组TUNEL阳性（绿色）和p16INK4a阳性（棕色）髓核细胞数显著增多。3.2Progerin阳性髓核细胞数在退变的人髓核组织中显著增高髓核组织冰冻切片免疫荧光结果显示，progerin阳性髓核细胞核呈现多种改变，

【参考文献】：
期刊论文
[1]Ciliary parathyroid hormone signaling activates transforming growth factor-β to maintain intervertebral disc homeostasis during aging[J]. Liwei Zheng,Yong Cao,Shuangfei Ni,Huabin Qi,Zemin Ling,Xin Xu,Xuenong Zou,Tianding Wu,Ruoxian Deng,Bo Hu,Bo Gao,Hao Chen,Yusheng Li,Jianxi Zhu,Francis Tintani,Shadpour Demehri,Amit Jain,Khaled M.Kebaish,Shenghui Liao,Cheryle A.Séguin,Janet L.Crane,Mei Wan,Hongbin Lu,Paul D.Sponseller,Lee H.RileyⅢ,Xuedong Zhou,Jianzhong Hu,Xu Cao.  Bone Research. 2018(03)
[2]Mechanosignaling activation of TGFβ maintains intervertebral disc homeostasis[J]. Qin Bian,Lei Ma,Amit Jain,Janet L Crane,Khaled Kebaish,Mei Wan,Zhengdong Zhang,X Edward Guo,Paul D Sponseller,Cheryle A Séguin,Lee H Riley,Yongjun Wang,Xu Cao.  Bone Research. 2017(01)



本文编号：3103930