模块法构建多级骨组织和新型水凝胶修复软骨缺损的研究
发布时间：2021-03-29 00:12
研究背景：严重创伤、骨肿瘤的切除造成的骨或软骨缺损是临床常见的外科疾病。局部大量或节段性骨缺损造成骨骼力学支撑功能丧失,继而严重影响患者的正常生活。软骨的缺损会导致关节功能下降,同样会严重影响患者的生活质量。目前常用的自体骨、软骨移植,异体骨移植以及骨材料填充,和软骨外科技术修复,都各有优缺点,不能真正满足临床实际的要求。如何更好地修复骨缺损和软骨缺损一直是外科领域,生物材料领域,组织工程领域专家关注的热点。本研究主要围绕骨,软骨的组织工程修复来开展,针对骨,软骨领域中不同的问题采用了不同的解决策略。在利用骨组织工程构建移植体时,必须充分考虑移植体的多级结构和血管化的问题才能实现模拟天然骨结构的目的。传统骨组织工程主要包括支架材料、种子细胞和生物信号分子（生长因子等）。研究主要从优化支架材料的设计,添加使用促进骨修复的生长因子等角度来尝试解决上述问题。但目前这两类措施都未能实现构建有效的血管系统,也无法对骨组织的多级结构和血管化进行调控。因此如何能够实现与骨结构层级关系对应的修复效果,实现血管化,在结构和功能上达到一致,还急需创新组织工程研究方法。近年来随着纳米材料的发展,和微纳米加工...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：130 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．６脂肪干细胞在ｎＨＡ复合纳米纤维膜上的生长情况
????尺＝２〇４ｍ）??Ｆ＂ｉｇ．２．６?ＡＤＳＣｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｏｎ?ｎＨＡ／ＰＣＬ／ｇｅｌａｔｉｎ?ｎａｎｏｆｉｂ巧?ｍｅｓｈｅｓ?化ｒ?２４ｈ?ａｎｄ?３ｄａｙｓ．?Ａ，２４ｈ，Ｂ??３化?ｄａｙｓ，?Ｃ，２４ｈ?ｌｉｖｅ／ｄｅａｄ?化ｓａｙｓ?Ｄ，?２４ｈ?ｌｉｖｅ／ｄｅａｄ?ａｓｓａｙｓ，Ｅ?Ｐａｒｔｉａｌ?ｅｎｌａｒｇｅｄ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?也ｅ?ｓｅｖｅｎ化??ｄａｙ?ｏｆ?ｉｎｄｕｃｅｄ?ｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ．??２３．５．３细胞扫描电镜结果??在细胞种植２４ｈ，３天和诱导培养１４天后，样品戊二酵固定处理，梯度酒??精脫水，至１００％叔了醇冷冻干燥后，喷金扫描。如图２．７Ａ所示细胞种植２４ｈ，??在纳米纤维表面基本呈梭形，纳米纤维互相交叉，形成微纳米孔，与内部连通，??第一天，细胞基本是在纤维表面粘附。第Ｈ天观察细胞如图２．７?Ｂ显示细胞数目??增多，部分细胞伸出伪足至纤维膜内部，是因为纳米纤维膜表面的微纳米巧扑??结构，形成局部的Ｈ维空间，有利细胞的粘附和生长。在成骨诱导１４天后，如??图２．７?Ｃ所示，出现大片细胞，在纳米纤维表面形成近似膜结构，纺丝表面出现??大量巧结节沉巧，放大至局部如图２．７?Ｄ所示，细胞周两可见大量巧结节岀现。??
?第二章成骨性纳米纤维结构单元制备与检测???巧细胞种植后第Ｈ天，Ｃ）细胞成骨诱导培养１４天，Ｄ）细胞成骨诱导Ｍ天后局部放大。??Ｆｉｇ．?２．７?ＳＥＭ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?ＡＤＳＣｓ?０打?ｔｈｅ?ｎＨＡ／ＰＣＬ／ｇｅｌａｔｉｎ?ｆｉｌｍ．?Ａ）?ａｆｔｅｒ?２仙，Ｂ）?ａｆｔｅｒ?３ｄａｙｓ，?Ｃ）??ａｆｔｅｒ?１４ｄａｙｓ，?Ｄ）?Ｅｎｌａｒｇｅｄ?ｉｍａｇｅ?ａｆｔｅｒ?１４ｄａｙｓ?．??２．３．５．４茜素红染色分析??与种植第Ｈ天的细胞染色对比，经过１４天成骨诱导培养，茜素红染色结果??如图２．８Ｂ所示，整个膜片呈深红色，站微镜下观察发现有大量巧结节出现。ｎＨＡ??具有良好的骨诱导能力，加之诱导培养促进脂肪干细胞的分化，有利于巧结节??形成。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]细胞膜片技术在构建工程化血管化组织中的应用进展[J]. 陈佳,马东洋,任利玲. 中国修复重建外科杂志. 2015(03)
[2]我国纳米科学技术发展现状及战略思考[J]. 闫金定. 科学通报. 2015(01)
[3]细胞膜片技术在组织工程和再生医学领域的应用[J]. 马东洋,任利玲,毛天球. 生物医学工程学杂志. 2014(05)
[4]静电纺丝技术制备三维纳米结构研究进展[J]. 韩维华,麻劼,常清,龙云泽,徐现刚,徐胜. 微纳电子技术. 2014(06)
[5]层层自组装膜的研究:从基础到生物医学领域中的应用[J]. 关英,张拥军,张文静,张曦,丁智博,朱晓夏. 高分子通报. 2013(01)
[6]静电纺丝技术制备无机纳米纤维材料的应用[J]. 乜广弟,力尚昆,卢晓峰,王策. 高等学校化学学报. 2013(01)
[7]静电纺丝复合纳米纤维研究进展[J]. 李岩,周治南,仇天宝. 高分子材料科学与工程. 2012(10)
[8]贝壳珍珠层及其仿生材料的研究进展[J]. 孙娜,吴俊涛,江雷. 高等学校化学学报. 2011(10)
[9]静电纺丝法制备图案化微纳米纤维薄膜[J]. 龙云泽,刘抗抗,曹珂,李蒙蒙,尹志华,唐成春,尹红星. 青岛大学学报(自然科学版). 2009(03)
[10]静电纺丝原理研究进展[J]. 薛聪,胡影影,黄争鸣. 高分子通报. 2009(06)
本文编号：3106511
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：130 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．６脂肪干细胞在ｎＨＡ复合纳米纤维膜上的生长情况
????尺＝２〇４ｍ）??Ｆ＂ｉｇ．２．６?ＡＤＳＣｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｏｎ?ｎＨＡ／ＰＣＬ／ｇｅｌａｔｉｎ?ｎａｎｏｆｉｂ巧?ｍｅｓｈｅｓ?化ｒ?２４ｈ?ａｎｄ?３ｄａｙｓ．?Ａ，２４ｈ，Ｂ??３化?ｄａｙｓ，?Ｃ，２４ｈ?ｌｉｖｅ／ｄｅａｄ?化ｓａｙｓ?Ｄ，?２４ｈ?ｌｉｖｅ／ｄｅａｄ?ａｓｓａｙｓ，Ｅ?Ｐａｒｔｉａｌ?ｅｎｌａｒｇｅｄ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?也ｅ?ｓｅｖｅｎ化??ｄａｙ?ｏｆ?ｉｎｄｕｃｅｄ?ｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ．??２３．５．３细胞扫描电镜结果??在细胞种植２４ｈ，３天和诱导培养１４天后，样品戊二酵固定处理，梯度酒??精脫水，至１００％叔了醇冷冻干燥后，喷金扫描。如图２．７Ａ所示细胞种植２４ｈ，??在纳米纤维表面基本呈梭形，纳米纤维互相交叉，形成微纳米孔，与内部连通，??第一天，细胞基本是在纤维表面粘附。第Ｈ天观察细胞如图２．７?Ｂ显示细胞数目??增多，部分细胞伸出伪足至纤维膜内部，是因为纳米纤维膜表面的微纳米巧扑??结构，形成局部的Ｈ维空间，有利细胞的粘附和生长。在成骨诱导１４天后，如??图２．７?Ｃ所示，出现大片细胞，在纳米纤维表面形成近似膜结构，纺丝表面出现??大量巧结节沉巧，放大至局部如图２．７?Ｄ所示，细胞周两可见大量巧结节岀现。??
?第二章成骨性纳米纤维结构单元制备与检测???巧细胞种植后第Ｈ天，Ｃ）细胞成骨诱导培养１４天，Ｄ）细胞成骨诱导Ｍ天后局部放大。??Ｆｉｇ．?２．７?ＳＥＭ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?ＡＤＳＣｓ?０打?ｔｈｅ?ｎＨＡ／ＰＣＬ／ｇｅｌａｔｉｎ?ｆｉｌｍ．?Ａ）?ａｆｔｅｒ?２仙，Ｂ）?ａｆｔｅｒ?３ｄａｙｓ，?Ｃ）??ａｆｔｅｒ?１４ｄａｙｓ，?Ｄ）?Ｅｎｌａｒｇｅｄ?ｉｍａｇｅ?ａｆｔｅｒ?１４ｄａｙｓ?．??２．３．５．４茜素红染色分析??与种植第Ｈ天的细胞染色对比，经过１４天成骨诱导培养，茜素红染色结果??如图２．８Ｂ所示，整个膜片呈深红色，站微镜下观察发现有大量巧结节出现。ｎＨＡ??具有良好的骨诱导能力，加之诱导培养促进脂肪干细胞的分化，有利于巧结节??形成。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]细胞膜片技术在构建工程化血管化组织中的应用进展[J]. 陈佳,马东洋,任利玲. 中国修复重建外科杂志. 2015(03)
[2]我国纳米科学技术发展现状及战略思考[J]. 闫金定. 科学通报. 2015(01)
[3]细胞膜片技术在组织工程和再生医学领域的应用[J]. 马东洋,任利玲,毛天球. 生物医学工程学杂志. 2014(05)
[4]静电纺丝技术制备三维纳米结构研究进展[J]. 韩维华,麻劼,常清,龙云泽,徐现刚,徐胜. 微纳电子技术. 2014(06)
[5]层层自组装膜的研究:从基础到生物医学领域中的应用[J]. 关英,张拥军,张文静,张曦,丁智博,朱晓夏. 高分子通报. 2013(01)
[6]静电纺丝技术制备无机纳米纤维材料的应用[J]. 乜广弟,力尚昆,卢晓峰,王策. 高等学校化学学报. 2013(01)
[7]静电纺丝复合纳米纤维研究进展[J]. 李岩,周治南,仇天宝. 高分子材料科学与工程. 2012(10)
[8]贝壳珍珠层及其仿生材料的研究进展[J]. 孙娜,吴俊涛,江雷. 高等学校化学学报. 2011(10)
[9]静电纺丝法制备图案化微纳米纤维薄膜[J]. 龙云泽,刘抗抗,曹珂,李蒙蒙,尹志华,唐成春,尹红星. 青岛大学学报(自然科学版). 2009(03)
[10]静电纺丝原理研究进展[J]. 薛聪,胡影影,黄争鸣. 高分子通报. 2009(06)
本文编号：3106511
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