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LncRNA HOTAIR对骨肉瘤细胞增殖与迁移的影响及相关机制研究

发布时间:2021-03-30 07:52
  研究背景骨肉瘤是来源于间叶组织的恶性骨肿瘤,尽管发病率低,但一旦出现肺转移,骨肉瘤患者预后往往较差。骨肉瘤的标准治疗方案包括广泛的手术切除,化疗和放射治疗。然而,尽管采取了这些积极的干预措施,但骨肉瘤患者的整体预后仍然较差,其五年总生存率仅为60-70%,复发率保持在35%左右。远处转移患者预后更差,五年总生存率仅为10-30%。即使有详细的方案调整,化疗耐药患者的预后也未得到明显改善。因此,亟需探讨骨肉瘤的发病机制为骨肉瘤新型有效的治疗方案的设计提供理论基础。长链非编码RNA HOTAIR(Hox反义基因间RNA)位于哺乳动物HOXC基因簇上,它不仅可以与polycomb抑制复合物2(PRC2)和赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶(LSD1)/CoREST/RE1沉默转录因子(REST)复合物相互作用,控制各种基因的表达,而且HOTAIR还可以通过沉默肿瘤抑制因子,激活癌基因和信号通路来促进肿瘤的侵袭和转移。已有文献报道HOTAIR在许多人类癌症中过表达,对多种肿瘤的发生、发展产生重要的作用,但其在骨肉瘤中的作用尚不清楚。目的探索lncRNA HOTAIR对骨肉瘤细胞增殖与迁移的影响及相关... 

【文章来源】:郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】:68 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

LncRNA HOTAIR对骨肉瘤细胞增殖与迁移的影响及相关机制研究


骨肉瘤细胞和人正常成骨细胞中LncRNAHOTAIRmRNA相对表达水平(**P<0.01)

转染,电镜,慢病毒,靶向


图 2A 转染 72 h 后的骨肉瘤细胞在电镜下的绿色荧光表达情况图 2 B 转染 72 h 后的骨肉瘤细胞中转染效率情况3 RT-PCR 评价转染后的 MG63 细胞中 HOTAIR 的抑制效果通过上海吉凯基因公司合成的针对 HOTAIR 敲低的慢病毒载体转染 MG63细胞 72 h 后各组细胞间的 HOTAIR mRNA 相对表达水平,如图 3 所示。相对于非靶向 HOTAIR 片段慢病毒处理的阴性对照组(NC 组)细胞以及未加任何处理的空白对照组(control 组)而言,HOTAIR 在靶向处理目的基因片段慢病毒转染后的细胞(sh-HOTAIR1 组, sh-HOTAIR2 组,sh-HOTAIR3 组)中高表达(P<0.0004,P=0.01, P<0.0001),且 sh-HOTAIR3 组抑制效果最好。NC 组和Control 组的 HOTAIR 相对表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。

转染,效率,情况,慢病毒


图 2A 转染 72 h 后的骨肉瘤细胞在电镜下的绿色荧光表达情况图 2 B 转染 72 h 后的骨肉瘤细胞中转染效率情况3 RT-PCR 评价转染后的 MG63 细胞中 HOTAIR 的抑制效果通过上海吉凯基因公司合成的针对 HOTAIR 敲低的慢病毒载体转染 MG63细胞 72 h 后各组细胞间的 HOTAIR mRNA 相对表达水平,如图 3 所示。相对于非靶向 HOTAIR 片段慢病毒处理的阴性对照组(NC 组)细胞以及未加任何处理的空白对照组(control 组)而言,HOTAIR 在靶向处理目的基因片段慢病毒转染后的细胞(sh-HOTAIR1 组, sh-HOTAIR2 组,sh-HOTAIR3 组)中高表达(P<0.0004,P=0.01, P<0.0001),且 sh-HOTAIR3 组抑制效果最好。NC 组和Control 组的 HOTAIR 相对表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。

【参考文献】:
期刊论文
[1]趋化因子及其受体在肺癌侵袭与转移过程中的作用(英文)[J]. Zeng-hui CHENG,Yu-xin SHI,Min YUAN,Dan XIONG,Jiang-hua ZHENG,Zhi-yong ZHANG.  Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2016(05)



本文编号:3109165

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