以黄原胶为媒介的干细胞治疗骨关节炎的研究

发布时间：2021-04-11 21:37

　　研究目的骨关节炎（osteoarthritis,OA）是一种软骨磨损破坏和滑膜炎症为主的慢性退行性疾病。因关节软骨没有血管,软骨细胞再生能力较弱,受损的软骨很难修复。OA发病与年龄、肥胖、职业、基因多态性、激素水平等多种因素有关,其发病过程复杂,具体机制尚不明确。目前治疗OA常用方法有非药物辅助治疗、药物治疗、手术治疗和新型的再生治疗法。但前三者均以缓解病情,改善功能为主,而再生治疗法有希望修复受损的软骨。再生治疗法包括关节腔注射干细胞法、软骨组织工程法和为骨折术,但后两者还需要手术来完成。关节腔注射干细胞是最为便捷的方法。关节腔注射所用的干细胞一般都是间充质干细胞（MSCs）。在较多种干细胞中脂肪组织来源干细胞（adipose tissue derived stem cells,ADSCs）由于其来源丰富、取材方便、含量高等优点,已成为研究最多的干细胞。多项研究证实关节腔注射ADSCs治疗OA的有效性,但目前还是在研究阶段,并没有在临床上广泛应用,仍有较多问题需要解决。已有的动物实验和临床研究主要集中于自体来源ADSCs,同种异体体外扩增的ADSCs治疗OA的研究并不多。ADSCs不... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：161 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图２－１?ＡＤＳＣｓ提取分离步骤??

４８?ｈ；?Ｄ．?ＡＤＳＣｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｆｏｒ?７２?ｈ；?Ｅ．?ＡＤＳＣｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｆｏｒ?９６?ｈ；?Ｂａｒ：?１００?（ｘｍ?（见实验??记录Ｉ－ｐｌｌ）??传代培养的ＡＤＳＣｓ如图２－３所示。Ａ图为ＰＩ?ＡＤＳＣｓ，Ｂ图为Ｐ?２?ＡＤＳＣｓ，??Ｃ图为ｐ?３?ＡＤＳＣｓ，均为１００倍照片。各代数的ＡＤＳＣｓ均呈长梭型并有较多正??在分裂着的细胞，说明生长比较旺盛。传代培养的ＡＤＳＣｓ具有良好的生长活性，??仍保持长梭型形态，生长速度比原代细胞快，３？４?ｄ能达到８０％融合度。本实验??所用的细胞为第三代的细胞。??３６??

Ａ．?ＰＩ?ＡＤＳＣｓ；Ｂ．?Ｐ２ＡＤＳＣｓ；Ｃ．Ｐ３ＡＤＳＣｓ；Ｂａｒ：１０〇Ｈｍ．（见实验记录?Ｉ－ｐｌ２）??３．２?ＡＤＳＣｓ表面标志物表达??流式细胞仪检测Ｐ３代ＡＤＳＣｓ表面抗原，结果如图２－４所示。ＡＤＳＣｓ高表??达间充质干细胞（ＭＳＣｓ）特异性表面抗原ＣＤ９０和ＣＤ４４，而不表达造血细胞表??面抗原ＣＤ４５和ＣＤｌｌｂ。结果证明本实验分离培养的ＡＤＳＣｓ具有ＭＳＣｓ的明显??特征。??２１１?Ｔ１?３８８｜—ｊ??３６８ｉ—ｊ１?规????Ｍ?；：：?１?５７２％?；ｉｉ?２，３％??ｕ?５３ｉ＾－ＡＩ?：ｌｌｔｉ?：ｉａ??１０°?１０１?１０２?１０５?１〇ｘ?１０°?１０１?１〇２?１０３?１０Ｘ?１０°?１０１?１０：?１０３?１０４?１０Ｌ?１０１?１０‘?１０。１（Ｔ??ＣＤ９０?ＣＤ４４?ＣＤ４５?ＣＤｌｌｂ??图２－４用流式细胞仪分析大鼠Ｐ３?ＡＤＳＣｓＣＤ４５、ＣＤｌｌｂ、ＣＤ９０和ＣＤ４４的??表达量??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４．?Ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ?ｏｆ?ＣＤ４５，?ＣＤｌｌｂ，?ＣＤ９０?ａｎｄ?ＣＤ４４?ｏｎ?ｒａｔ?Ｐ３??ＡＤＳＣｓ?ａｎａｌｙｚｅｄ?ｂｙ?ｆｌｏｗ?ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．（见实验记录?Ｉ－ｐ５７?）??３．３?ＡＤＳＣｓ多项分化潜能??大鼠ＡＤＳＣｓ向脂肪细胞诱导分化结果如图２－５所示。大鼠ＡＤＳＣｓ向脂肪细??胞诱导培养后，细胞生长速度变缓慢，细胞形态开始变短而偏圆形，４?ｄ左右开??始出现小脂滴。随着诱导时间延长，脂滴越来越多并融合形成大脂滴。诱导１４ｄ??后

【参考文献】：
期刊论文
[1]早期兔骨关节炎软骨CD105+/CD166+细胞及其软骨分化潜能的实验研究[J]. 王敏,Peter Chen,刘超,郝勇,张瑗,张峡.  中国修复重建外科杂志. 2013(07)



本文编号：3131999