MIF促进脊髓损伤后星形胶质细胞中CCL5的产生

发布时间：2021-04-23 08:56

　　目的星形胶质细胞发挥着与神经元功能相关的重要生理作用。在中枢神经系统（CNS）损伤后,它们通过形态学和功能改变（例如反应性胶质增生）被激活以参与神经病理学过程。星形胶质细胞也可以作为免疫效应细胞,在损伤刺激后产生大量趋化因子和细胞因子,这可能加剧组织损伤的程度。巨噬细胞迁移抑制因子（MIF）是一种促炎细胞因子,可促进受损脊髓星形胶质细胞中炎性细胞因子的产生。它是否能够促进星形胶质细胞释放趋化因子仍然未阐述清楚。本文拟研究脊髓损伤后促炎因子MIF和星形胶质细胞释放趋化因子之间的关系及其分子调控机制。方法成年雄性SD大鼠进行脊髓（T8-T10）砸伤,构建脊髓损伤模型;脊髓损伤后0d、1d、4d、7d四个时间点分别取材或灌注后再取材;Western blot检测脊髓损伤后的MIF蛋白表达情况,ELISA、免疫荧光等检测损伤后CCL5的表达情况;采用siRNA干扰CD74受体后,进行转录组测序和生物信息学分析;取新生1-3天的SD大鼠的脊髓进行星形胶质细胞的体外原代培养,用MIF重组蛋白,联合或不联合MIF特异性抑制剂4-IPP处理星形胶质细胞,ELISA检测CCL5的表达,验证转录组测序结果... 

【文章来源】：南通大学江苏省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
第二章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验试剂及相关耗材
        2.1.3 试剂配制
        2.1.4 实验仪器
    2.2 方法
        2.2.1 大鼠脊髓损伤（SCI）砸伤模型的建立
        2.2.2 细胞培养
        2.2.3 Western blot
        2.2.4 ELISA
        2.2.5 组织免疫荧光
        2.2.6 免疫共沉淀
        2.2.7 总RNA提取
        2.2.8 总蛋白提取
        2.2.9 Real-time PCR
        2.2.10 Transwell迁移实验
        2.2.11 mRNA的测序
        2.2.12 生物信息学分析
        2.2.13 统计学分析
第三章 结果
    3.1 MIF促进受损大鼠脊髓星形胶质细胞中趋化因子CCL5的表达
        3.1.1 大鼠脊髓损伤后MIF、CCL5的表达
        3.1.2 大鼠脊髓损伤后CCL5与星形胶质细胞的共定位
    3.2 星形胶质细胞中CCL5的表达是由MIF/CD74轴调控
    3.3 MIF抑制剂衰减了体外星形胶质细胞中CCL5的表达
    3.4 MIF通过JNK通路促进星形胶质细胞中CCL5的产生
    3.5 CCL5主要增强IL-13 处理的巨噬细胞的迁移
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
英文缩写词表
综述
    综述参考文献
致谢



本文编号：3155033