YAP的表达水平对氯胺酮诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的调控

发布时间：2021-04-26 00:22

　　目的探讨不同浓度的氯胺酮对人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）的活性和增殖能力的影响,明确氯胺酮的神经毒性;并探索Yes相关蛋白（Yes-associated protein,YAP）的表达量不同时对氯胺酮介导的神经毒性的调控,探索YAP在促进细胞增殖方面的作用。方法实验用SH-SY5Y细胞获赠于上海中医药大学神经退行性疾病研究组,柯尊记实验课题组,根据标准培养方法用DMEM基础培养基（Dulbecco^’s Modified Eagle Medium）进行培养,在后续实验中每两天更换一次新鲜培养液。为保证不同处理条件下的细胞状态大致相同,所有实验均选用复苏后第2-4次传代的细胞。1.按标准培养SH-SY5Y细胞,传代24小时后细胞贴壁时给予氯胺酮处理,使之形成不同的终浓度。实验细胞分为6组,分别为:H₂O₂诱导细胞凋亡的阳性对照组（P组）,即向细胞液中加入H₂O₂试剂,使细胞所处培养液的终浓度为400?M;空白对照组（B组）;根据给予氯胺酮浓度的不同,将实验组分为四个浓度梯度:... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
1.引言
2.实验材料
    2.1 实验细胞
    2.2 实验用抗体
    2.3 主要实验试剂
    2.4 实验仪器
3.实验方法
    3.1 实验细胞培养
    3.2 CCK-8 细胞增殖毒性检测
    3.3 免疫荧光染色
    3.4 流式细胞术
    3.5 蛋白印迹法（Western blotting）
    3.6 siRNA和 Lipofectamine2000 脂质转染
    3.7 YAP-shRNA重组慢病毒感染
    3.8 统计学分析
4.实验结果
    4.1 氯胺酮对SH-SY5Y细胞的毒性作用
    4.2 不同浓度氯胺酮对SH-SY5Y细胞的活性及增殖能力的影响
    4.3 氯胺酮可诱导SH-SY5Y细胞凋亡
    4.4 YAP表达水平上调对氯胺酮所致的SH-SY5Y细胞增殖和活性的影响
    4.5 YAP过表达降低氯胺酮诱导的SH-SY5Y细胞凋亡蛋白的产生
    4.6 YAP过表达降低了氯胺酮诱导的SH-SY5Y细胞凋亡率
    4.7 YAP表达水平下调可促进氯胺酮诱导的SH-SY5Y细胞凋亡
5.讨论
6.结论
参考文献
附录
致谢
综述
    参考文献



本文编号：3160369