SPARC蛋白在动物模型及人瘢痕组织纤维化中的表达和意义

发布时间：2021-04-28 23:53

　　背景:SPARC蛋白（Secreted Protien Acidic and Rich in Cysteine）是由内皮细胞、成纤维细胞等分泌的具有抑制细胞黏附、调控细胞周期并促进组织纤维化等功能的小分子糖蛋白。文献报道其与细胞增殖、血管新生、创伤修复及更新密切相关,SPARC蛋白可以通过调节血管生成、抑制细胞黏附、促进细胞增殖来促进肿瘤组织的生长及侵袭和转移。随着研究的深入,已经有大量实验证明SPARC蛋白在心脏、肺、肾脏、肝脏、真皮、肠、眼睛等纤维化病变组织中呈现高表达,在各种乳腺癌、胃癌等肿瘤性疾病里也有着特定的作用。在小鼠肝纤维化模型中,SPARC蛋白基因敲除的小鼠胶原含量较低、炎症反应减轻、MMP-2表达增加,肝脏纤维化程度明显改善。更有学者提出外源性si RNA干扰SPARC蛋白的小鼠模型中可有效抑制皮肤成纤维细胞及小鼠SPARC蛋白基因表达,试验中发现成纤维细胞胶原合成明显减低,经博来霉素诱导的缺失SPARC基因的小鼠模型中小鼠的皮肤及肺纤维化病变也能得以抑制。皮肤瘢痕的发生是成纤维细胞过度增生、胶原蛋白过度沉积及TGF-β1、MMPs家族、TSG-6等多种细胞因子相互作... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：99 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
英文缩略词表(Abbreviation)
摘要
Abstract
第一部分 SPARC蛋白在正常皮肤组织及皮肤瘢痕组织中的表达
    1.1 引言
    1.2 材料和方法
        1.2.1 研究对象的一般资料
        1.2.2 实验材料
        1.2.3 试剂
        1.2.4 主要试剂配制(按说明书要求进行配制)
        1.2.5 实验步骤
            1.2.5.1 组织标本处理
            1.2.5.2 Ki67 免疫组化染色
    1.3 结果
    1.4 讨论
第二部分 SPARC蛋白对人成纤维细胞增殖和TGF-β1、MMPs瘢痕相关因子的影响作用
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 组织标本
        2.2.2 主要试剂与仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 皮肤和瘢痕成纤维细胞的原代培养
        2.3.2 正常皮肤成纤维细胞的原代培养
        2.3.3 MTT法检测细胞增殖与SPARC蛋白对KFs的细胞作用..
        2.3.4 流式细胞术检测细胞周期
        2.3.5 利用流式细胞仪来检测正常成纤维细胞实验组SPARC蛋白作用后的成纤维细胞的凋亡
        2.3.6 蛋白印迹(Western blot)法检测细胞因子TGFβ-1/MMP-2/MMP-9 的表达
        2.3.7 统计学处理
    2.4 .结果
        2.4.1 SPARC蛋白促进皮肤成纤维细胞的增殖
        2.4.2 SPARC蛋白对成纤维细胞周期的影响
        2.4.3 SPARC蛋白抑制NFs/KFs凋亡
        2.4.4 SPARC蛋白对各组细胞中TGFβ-1、MMP-2、MMP-9 表达的影响及相关性
    2.5 讨论
    2.6 结论
第三部分 SPARC蛋白对兔耳瘢痕模型增生的影响和TGF-β1/MMPs瘢痕相关因子的变化
    3.1 引言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 主要试剂与仪器
        3.2.2 兔耳瘢痕模型的建立及给药
        3.2.3 HE染色
        3.2.4 Ki67 免疫组化染色
        3.2.5 天狼星红染色
        3.2.6 Western Blot检测实验组于对照组中TGF-β1、MMP-2、MMP-9 的表达
    3.3 结果
        3.3.1 肉眼大体观察及瘢痕指数的检测结果
        3.3.2 SPARC蛋白对兔耳瘢痕组织中成纤维细胞增生和胶原沉积的影响
        3.3.3 SPARC蛋白对各组标本中TGFβ-1/MMP-2/MMP-9 表达的影响及相关性
    3.4 讨论
    3.5 结论
第四部分 总结
参考文献
附录
致谢
综述 SPARC 调节组织器官纤维化中的作用及研究进展
    参考文献



本文编号：3166417