AMD3100阻断CXCR4/β-catenin通路抑制脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖分化的实验研究

发布时间：2021-05-23 02:38

　　目的:探讨SDF-1/CXCR4趋化轴抑制剂AMD3100在脊髓损伤后对内源性神经干细胞增殖、分化的作用及其分子机制。方法:36只雌性SD成年大鼠,随机分成假手术组（A组,n=12）、对照组（B组,n=12）、实验组（C组,n=12）。B、C组均给予Allen’s打击,C组术后给予AMD3100。术后行双下肢运动功能评分（参照BBB评分标准）,均于造模后7天取材,所有标本取行HE染色及免疫组化检测,检测神经干细胞、SDF-1/CXCR4轴及Wnt/β-catenin信号通路相关表达变化,统计分析各组之间的相关性。结果:B、C组大鼠出现明显的双下肢运动功能障碍,BBB评分与A组相比显著降低;双下肢功能随着时间而缓慢恢复,但恢复程度非常有限。qRT-PCR及免疫组化检测:损伤脊髓组织损伤区域SDF-1蛋白表达明显增加,损伤区域内神经干细胞标记物Nestin、Wnt/β-catenin信号通路相关基因、蛋白显著增加,β-tubulin阳性细胞数量明显增多,出现明显增殖分化等表现,应用CXCR4抑制剂后nestin、β-catenin相关表达明显降低,β-tubulin阳性新生神经元数量减少。... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：40 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要试剂与药品
        2.1.3 主要器材
    2.2 实验方法
        2.2.1 实验室环境
        2.2.2 实验分组
        2.2.3 动物模型建立
        2.2.4 标本取材及处理
    2.3 检测方法
        2.3.1 双下肢神经功能
        2.3.2 HE染色
        2.3.3 免疫组织化学
        2.3.4 qRT-PCR 检测损伤区域细胞 Nestin、β-catenin、β-tubulin 的 mRNA表达
    2.4 统计方法
第3章 结果
    3.1 大鼠脊髓损伤模型建立及双下肢运动功能评分
    3.2 HE染色
    3.3 免疫组织化学
        3.3.1 检测各组大鼠脊髓损伤后损伤区域SDF-1 的表达
        3.3.2 检测各组损伤区域Nestin的表达
        3.3.3 检测各组损伤区域 β-tubulin的表达
        3.3.4 检测各组损伤区域Wnt/β-catenin通路相关表达
    3.4 qRT-PCR验证差异基因表达量
第4章 讨论
第5章 结论和展望
    5.1 结论
    5.2 展望
致谢
参考文献
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]Stem cells for spine surgery[J]. Joshua Schroeder,Janina Kueper,Kaplan Leon,Meir Liebergall.  World Journal of Stem Cells. 2015(01)
[2]神经干细胞迁移的研究进展[J]. 刘靖,曲静,徐晓静,张焕相.  中国细胞生物学学报. 2012(03)
[3]神经干细胞的鉴定方法[J]. 顾恩妍,哈福,李林凤,张艳艳,吕春荣,关伟军,马月辉.  中国组织工程研究与临床康复. 2009(10)



本文编号：3202123