特异结合胶原的红细胞药物载体构建及脊髓损伤修复研究

发布时间：2021-05-23 04:39

　　脊髓损伤（Spinal cord injury,SCI）后导致一系列的病理反应,在损伤部位形成抑制神经再生的微环境,这就给神经组织的再生修复带来了巨大挑战。目前单一的疗法通常仅能导致有限的功能改善,结合药物、生长因子、种子细胞和生物支架材料的复合疗法是目前脊髓损伤修复的主要趋势。近期的研究表明,低剂量的紫杉醇（Paclitaxel,PTX）可以抑制啮齿动物SCI模型中回缩球的形成,刺激轴突延长,对于神经干细胞向神经元细胞的分化和改善抑制性分子的沉积也具有一定的促进作用。然而这些药物分子本身的半衰期较短,且当它们与胶原支架结合时,因脑脊液的快速冲刷等多种因素的作用,导致在损伤部位的过快释放,达不到有效的治疗浓度。基于以上延长药物半衰期和局部浓度维持的两个问题,本文构建了可特异性结合胶原的红细胞载药体系。一方面,利用红细胞（Red blood cell,RBC）作为药物载体,包载紫杉醇,达到延长药物释放时间的目的。另一方面,通过特异性功能连接多肽的引入,实现胶原和红细胞的特异性连接,减少了药物在移植后的快速流失,达到在损伤局部的浓度维持的目的。将上述体系结合胶原支架移植入大鼠的T10全横断... 

【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 绪论
    1.1 脊髓损伤的研究进展
        1.1.1 脊髓损伤的特点与病理机制
        1.1.2 脊髓损伤的修复策略与治疗现状
        1.1.3 脊髓损伤中药物递送的研究进展
    1.2 红细胞载药系统研究进展
        1.2.1 红细胞的生理特点
        1.2.2 红细胞载药方法
        1.2.3 红细胞载药系统研究现状
    1.3 紫杉醇在脊髓损伤修复中的应用
    1.4 本课题的设计思路
第2章 实验材料与方法
    2.1 实验试剂与材料
    2.2 仪器与设备
    2.3 溶液配制
    2.4 实验步骤与方法
        2.4.1 红细胞的分离
        2.4.2 载药红细胞的制备
        2.4.3 红细胞的电镜样品制备
        2.4.4 血液学指标测定
        2.4.5 体外稳定性实验
        2.4.6 PTX的含量测定
        2.4.7 多肽与红细胞结合的亲和性与特异性研究
        2.4.8 胶原支架的制备
        2.4.9 DiI染色
        2.4.10 紫杉醇的体外释放
        2.4.11 大鼠脊髓T10全横断损伤模型的建立
        2.4.12 行为学评价
        2.4.13 动物取材与标本制作
        2.4.14 免疫组织化学染色与分析
        2.4.15 统计方法与数据处理
第3章 可特异结合胶原的红细胞载药体系的构建
    3.1 引言
    3.2 结果与讨论
        3.2.1 红细胞药物载体的构建及形貌表征
        3.2.2 载药红细胞的稳定性分析
        3.2.3 载药红细胞载药指标评价
        3.2.4 载药红细胞的缓释效果评价
        3.2.5 多肽的合成与理化特性分析
        3.2.6 多肽与红细胞结合的亲和性研究
        3.2.7 多肽-红细胞与胶原的结合研究
        3.2.8 支架上紫杉醇的体外释放
    3.3 本章小结
第4章 大鼠脊髓损伤修复的研究
    4.1 引言
    4.2 结果与讨论
        4.2.1 大鼠的T10段脊髓损伤模型的建立
        4.2.2 大鼠损伤区域神经元的生成情况
        4.2.3 大鼠损伤区域神经纤维再生情况
        4.2.4 大鼠损伤区域内胶质化研究
        4.2.5 组织学观察
        4.2.6 大鼠的运动功能恢复评价
    4.3 本章小结
第5章 总结与展望
    5.1 总结
    5.2 展望
参考文献
附录 A 大鼠BBB运动评分表
附录 B 中英文缩略语对照表
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的其它研究成果



本文编号：3202300