脊髓水平CREB/CRTC1信号在骨癌痛维持中的作用

发布时间：2021-06-21 06:49

　　背景与目的:疼痛是癌症患者最常见的症状,流行病学调查表明,近90%的癌症患者在病程中都有疼痛的发生。尽管按照世界卫生组织（WHO）于1982年提出的的"疼痛三阶梯疗法"治疗癌痛,仍有约45%的癌症患者其疼痛不能得到有效控制。骨癌痛是严重的难治性癌性疼痛之一,严重影响患者的生活质量,因此研究其机制,寻找有效的镇痛方法,具有重要理论价值和临床意义。研究发现,脊髓背角 N-甲基-D-天冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartatereceptor,NMDAR）在包括骨癌痛在内的多种疼痛中起重要作用。NMDAR激活后,钙离子内流,继而激活多条细胞内信号转导通路,引起cAMP反应元件结合蛋白（cAMP response element binding protein,CREB）丝氨酸-133 位点（Ser-133）磷酸化,启动其下游多种疼痛相关基因的转录,从而使其信号持续发挥作用,在疼痛的中枢敏化过程中起重要作用。最近有研究发现,cAMP调节的转录共激活因子1（cAMP-regulated transcriptional co-activator 1,CRTC1）是 CREB 调节转录所必... 

【文章来源】：南京大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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图１细胞复苏后１０分钟（Ａ：ｘ１〇〇；Ｂ：ｘ２〇〇）??ＮＣＴＣ?２４７２，，

ＮＣＴＣ?２４７２纤维肉瘤细胞贴壁生长，星形，多突触??２．１．３细胞计数??（１）按细胞传代步骤（１）?－?（４）获得细胞沉淀。??（２）加入少许最小必须培养基（ａ－ｍｉｎｉｍａｌ?ｅｓｓｅｎｃｅ?ｍｅｄｉａ，?ａ－ＭＥＭ），用滴管轻??轻吹打混匀细胞悬液。??（３）酒精棉球擦洗计数板和盖玻片后用擦镜纸擦干，将盖玻片覆盖于计数板上，??稍稍移向一侧，露出计数板台面少许。??（４）用滴管巧巧吹打细胞悬液后，立即从盖玻片边缘滴入细胞悬液１０叫，使之??充满盖玻片与计数板之间的间隙。??（５）将计数板置于光学显微镜下观察，可见细胞均匀分布。??（６）计数四大格内的细胞量，压中线者只记左侧和上方的细胞，右侧和下方不??计算在内。（见图３）??（７）按公式计算：细胞数／毫升＝４大格细胞总数／４Ｘ１００００。??

图３细施计数（ｘｌＯＯ）??置于计数板上的细胞??２丄４细胞活力测试??（０按细胞传代步骤（〇?－?（４）获得细胞沉淀（２）加入少许（Ｘ－ＭＥＭ，用滴管轻较吹打混匀。??（３）加入等体积的０．４％台盼蓝染液，染色２－３?ｍｉ（４）酒精棉球擦洗计数板和盖玻片后用擦镜纸稍稍移向一侧，露出计数板台面少许。??（５）用滴管轻轻吹打细胞悬液后，立即从盖玻充满盖玻片和计数板之间的间隙。??（６）光学显微镜下计数死亡细胞（被台盼蓝染计算细胞巧力。??２丄５

【参考文献】：
期刊论文
[1]脊髓神经元微小RNA-132在小鼠骨癌痛中的作用[J]. 刘玥,侯百灵,刘明,夏天娇,孙蓓,张羽,冷鑫,石林玉,顾小萍,马正良.  中华麻醉学杂志. 2014 (06)



本文编号：3240202