Bcl-xL基因修饰人脐带血干细胞移植修复兔关节软骨损伤的实验研究

发布时间：2021-06-22 21:59

　　研究目的:探讨抑制细胞调亡的B细胞淋巴瘤/白血病-xl基因（Bcl-xL）对人脐带血干细胞定向诱导分化的影响,观察Bcl-xL基因修饰的人脐带血干细胞定向诱导分化以后修复兔关节软骨损伤的疗效。研究内容:（1）人脐带血干细胞的获取,分离培养、定向诱导分化成软骨细胞;（2）慢病毒编码的抑制细胞凋亡基因Bcl-xL转染人脐带血干细胞;（3）检测Bcl-xL基因过表达对干细胞凋亡的影响;（4）检测Bcl-xL基因过表达对干细胞分泌II型胶原蛋白、半胱氨酸蛋白酶-3和基质金属蛋白酶3等蛋白的影响;（5）制造兔膝关节软骨损伤模型;（6）海藻酸钠盐支架包被Bcl-xL基因修饰的人脐带血干细胞,植入并修复兔软骨损伤;（7）检测植入的人脐带血干细胞是否能在异种动物体内存活;（8）HE、MASSON和改良蕃红O-固绿等染色方法观察软骨缺损的修复;（9）免疫组化、实时PCR、WB等方法检测Bcl-xL基因的表达对动物体内软骨细胞分泌II型胶原、半胱氨酸蛋白酶-3以及基质金属蛋白酶3等蛋白影响。材料与方法:（1）在正常分娩过程中获得人脐带血,体外分离获取干细胞,贴壁培养。取P2代细胞用TGF-β1因子联合使用... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：143 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

接种24h，仅见少量梭形贴壁细胞，近似圆形或短梭形；

5d后可见分散的干

安徽医科大学博士学位论文-24-三角形。图1a：接种24h，仅见少量梭形贴壁细胞，近似圆形或短梭形；图1b：5d后可见分散的干细胞小集落，集落细胞呈放射状生长Fig1a:Onlyasmallnumberoffusiformadherentcells,similartoroundorshortfusiformcells,wereobservedat24hours.Fig1b:After5days,Scatteredstemcellcoloniescanbeseen,andcolonycellsgrowradially.图1c：10d细胞呈长梭形，可见细胞集落；图1d：21d后细胞形态逐渐变为多边形或立方形、三角形Fig1c：After10days,thecellswerelongfusiformandcolonycouldbeseen.Fig1d：After21days,themorphologyofthecellsgraduallychangedintopolygonsorcubes,triangles.4．2甲苯胺蓝染色结果：


本文编号：3243597