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S100-β蛋白在脊髓损伤病理机制中的作用的研究

发布时间:2021-06-24 20:08
  研究背景:脊髓损伤(spinal cord injury,简称SCI)是指由外伤、炎症、肿瘤等不同原因引起,具有相同临床转归的一种高致残率、高死亡率并且至今尚无有效方法可治愈的中枢神经系统疾病,可造成脊髓横断性损伤,致损害平面以下的运动、感觉、括约肌及自主神经功能障碍。脊髓损伤的发生发展伴随着强烈和持续的炎症反应,炎性细胞的浸润与炎性因子的释放可致使损伤范围迅速扩大,加剧周围组织坏死。其中,作为广泛存在于中枢神经系统(central nervous system,CNS)中的小胶质细胞(microglia,简称MG),在脊髓损伤后,可被组织因子激活转化为M1表型,通过吞噬坏死的细胞碎片激活胞内的炎症级联反应,释放大量的促炎因子,包括IL-6(Interleukin-6,白细胞介素-6)、IL-1β(Interleukin-1β,白细胞介素-1β)、TNF-a(tumor necrosis factor-α,肿瘤坏死因子-α)、MHC-II、iNOS(nitric oxide synthase,一氧化碳合酶)和ROS(reactive oxygen species,活性氧分子)等,加剧组... 

【文章来源】:西安医学院陕西省

【文章页数】:57 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

S100-β蛋白在脊髓损伤病理机制中的作用的研究


实验分组细胞实验技术路线

空间分布,小胶质细胞,脊髓损伤,荧光


西安医学院临床医学硕士专业学位论文28行为学改变时间(自伤后闭合起)自主排尿双后肢肌束抽动缓慢爬行自由活动实验组术后24h术后2h术后12h术后24h对照组术后3h术后2h术后2h术后3h表1.小鼠术后行为学改变(组内取均值)。3.2脊髓损伤后,组织S100-β蛋白呈高表达,并与小胶质细胞活化存在一定联系。小鼠脊髓组织的免疫荧光实验中,红色荧光显示S100-β蛋白,绿色荧光显示IbA-1蛋白(IbA-1蛋白为巨噬细胞和小胶质细胞活化的标志性蛋白)。荧光显微镜下观察可见,S100-β蛋白于脊髓损伤后3d时出现明显高表达,14d时表达降低至与NC组相似的水平;IbA-1蛋白在NC组、3d组、14d组着色无明显差异,小胶质细胞活化程度在两个时间点上改变不明显;通过图像merge处理,S100-β蛋白与IbA-1蛋白的空间分布基本重叠,二者可能存在一定相关性。结果表明脊髓损伤早期S100-β蛋白呈现高表达,且可推断其高表达与小胶质细胞的活化之间存在一定相关性。图1.免疫荧光标记脊髓损伤后3d与14d的S100-β与IbA-1表达;红色=S100-β,绿色=小胶质细胞;50μm。

脊髓损伤,蛋白,小胶质细胞


西安医学院临床医学硕士专业学位论文293.3在脊髓损伤的早期,S100-β蛋白出现高表达。小鼠脊髓组织的Westernblot实验结果显示,在脊髓损伤后S100-β蛋白表达呈现先升后降的趋势,于损伤后12h出现表达增多,3d时达到峰值,14d时回落至相较于NC组的正常水平;qRT-PCR分析显示S100-β蛋白的上游mRNA呈现与S100-β蛋白表达相似的趋势。表明在脊髓损伤早期(3d时),S100-β蛋白的上游基因出现高表达,调控S100-β蛋白高表达,并随着时间推移逐渐回落至正常水平。图2.Westernblot与PCR分析脊髓损伤后S100-β蛋白的表达。3.4在脊髓损伤的早期,小胶质细胞M1型活化增多。小鼠脊髓组织的qRT-PCR分析显示,脊髓损伤后组织iNOS和CD16(小胶质细胞M1型活化标志物)呈现高表达,发现二者在时间上均呈现先升后降的趋势,于损伤后12h出现表达增多,于3d时达到峰值,于14d时回落至相较于NC组的正常水平。表明在脊髓损伤的早期,小胶质细胞M1型活化程度逐渐升高,参与脊髓损伤后的病理生理

【参考文献】:
期刊论文
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本文编号:3247748

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