Hippo/TAZ信号通路在骨肉瘤耐药过程中的机制研究

发布时间：2021-07-05 17:25

　　背景：骨肉瘤（osteosarcoma）是最常见的骨的原发恶性肿瘤,新辅助化疗加手术切除是目前治疗骨肉瘤的通用方法。但有一定比例的患者存在先天或继发的对化疗药物的耐药,其生存率明显低于非化疗耐药的患者。Hioop信号通路是由一系列蛋白激酶和转录共激活因子所组成,负责调控细胞的增殖、分化和凋亡等功能。现在的研究发现Hioop信号通路的失调不仅与多种肿瘤的发生相关,并且在肿瘤细胞产生对化疗的耐药性方面也扮演了重要角色。我们此次主要研究骨肉瘤细胞株MG63细胞中Hippo/TAZ信号通路在接受化疗药物处理后的变化情况,希望能够发现Hippo/TAZ信号通路在骨肉瘤细胞耐药性方面的作用及功能。方法：我们建立了稳定敲低TAZ的骨肉瘤细胞株MG63,用细胞计数仪检测细胞增殖情况,并用流式细胞仪检测了其凋亡情况。我们用蛋白免疫印迹技术检测骨肉瘤细胞株MG63在接受化疗药物甲氨蝶呤和阿霉素处理后,细胞内TAZ蛋白水平的变化。用RT-PCR技术检测骨肉瘤细胞株MG63在接受化疗药物甲氨蝶呤和阿霉素处理后,细胞内TAZ及下游基因CTGF、Cyr61的mRNA水平的变化。结果：敲低TAZ能够抑制骨肉瘤细胞增... 

【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１哺孔动物的Ｈｉｐｐｏ通路示意图??经典Ｈｉｐｐｏ信号通路；ＭＳＴｌ／２和ＬＡＴＳｌ／２通过与ＳＡＶＩ和ＭＯＢｌ的?

为了研巧Ｈｉｐｐｏ通巧中ＴＡＺ蛋白在骨肉瘤细胞对化疗药物产生耐药性方面的??作用，我们建立了稳定巧低ＴＡＺ的ＭＧ６３细胞株，其内ＴＡＺ的蛋白含量与对照组??相比明显降低（图２?Ａ）。??与对照相比，ＴＡＺ巧低的ＭＧ６３细胞生长曲线右移，说明细胞増殖速度受到??抑制（图２?Ｂ）。图２?Ｃ显示ＴＡＺ巧低的ＭＧ６３细胞在化疗药物甲氮碟吟（２０．０?ｍＭ）??和阿霉素（１．０片Ｍ）处理后，其调亡细胞所占百分比要明显高于对照细胞（＂＝３，戶＜??０．０５），提示甲安：煤吟和阿巧素治疗时，ＴＡＺ稳定敲低的ＭＧ６３细胞的调亡増加，??其对化疗药物更敏感。??１５??

为了进一步研巧，我们采用甲気蝶吟不同的浓度（１０?ｍＭ和２０?ｍＭ）处理２４??ｈ，发现ＭＧ６３细胞内的ＴＡＺ蛋白水平显著下调，且随着浓度増髙ＴＡＺ蛋白下降??更甚（图３Ａ）；阿霉素浓度（０．２５ＵＭ和化５?口Ｍ）处理ＭＧ６３细胞２４ｈ，细胞内??的ＴＡＺ蛋白同样降低明显（图３Ｃ）；??进一步，我们采用甲氨蝶吟２０?ｍＭ不同时间（１２?ｈ和２４?ｈ）处理ＭＧ６３细胞，??发现１２ｈ时，细胞内ＴＡＺ蛋白含量己降低，至２４ｈ时，ＴＡＺ蛋白降低程度更大??（图３?Ｂ）。另分别于１２?ｈ和２４?ｈ用阿霉素化５?ＩＸＭ处理ＭＧ６３细胞，发现与甲氨??蝶吟类似结果（图３Ｄ）。??．由此提示，ＭＧ６３细胞经过化疗药物甲氨蝶吟和阿霉素处理后，其内的ＴＡＺ??蛋白表达下调的程度，随药物浓度増加和时间延长而増加。??Ｉ??

【参考文献】：
期刊论文
[1]Hippo signaling:A hub of growth control,tumor suppression and pluripotency maintenance[J]. Mengxin Yin,Lei Zhang~* State Key Laboratory of Cell Biology,Institute of Biochemistry and Cell Biology,Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences,320 Yueyang Road,Shanghai 200031,China.  遗传学报. 2011(10)



本文编号：3266498