Hsp70通过调控p38MAPK信号介导细胞内钙超载与凋亡参与原代大鼠心肌细胞氧糖剥夺-复氧损伤

发布时间：2021-07-20 05:03

　　第一部分:p38MAPK介导细胞内钙超载与凋亡参与原代大鼠心肌细胞氧糖剥夺-复氧损伤目的 探讨原代大鼠心肌细胞氧糖剥夺-复氧损伤中p38MAPK与钙超载及凋亡的关系方法 取出生1～3d的SD大鼠,分离培养心肌细胞,采用随机数字表法分为3组:对照组（C组）、氧糖剥夺-复氧组（OGD/R组）、SB203580预处理组（OGD/R+SB组）。OGD/R组采用缺氧小室对细胞进行氧糖剥夺6h复氧2h。OGD/R+SB组氧糖剥夺前采用10μmol/L的p38MAPK抑制剂SB203580孵育1h。倒置显微镜下观察心肌细胞形态,采用CCK-8法检测细胞活力,2,4-二硝基苯肼显色法测定培养基上清液乳酸脱氢酶释放率,流式细胞术测定细胞内钙离子浓度,TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡率,western blot法检测心肌细胞内p-p38MAPK,p-STAT3、SERCA2以及Cleaved-caspase 3蛋白表达,荧光定量PCR法检测细胞内IL-6、IL-1β、SERCA2 mRNA表达。结果 与C组比较,OGD/R组心肌细胞胞质回缩、细胞膜折光率降低、细胞坏死,细胞活力明显降低（P<0.01... 

【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２?ＯＧＤ／Ｒ损伤中心肌细胞活力的变化??？“＃

Ｈｓｐ７０通过调控ｐ３８ＭＡＰＫ■信号介导细胞内钙超载与凋亡参与原代大鼠心肌细胞氧糖剥夺－复氧损伤?第一部分??３．０ＧＤ／Ｒ损伤各时间点培养基上清中ＬＤＨ释放率的变化??与Ｃ组比较，ＯＧＤ／Ｒ各组培养基上清中ＬＤＨ释放率显著升高（Ｐ＜０．０１）。与??ＯＧＤ６／Ｒ２组相比，随着复氧时间的延长ＬＤＨ释放率有所下降（Ｐ＜０．０１），见图３，提??示ＯＧＤ６／Ｒ２组时间点为氧糖剥夺－复氧损伤最严重的时间点。??〇?２．５ｎ??ｘ??Ｓ）?２．０－?Ｖ??ｓ?－／＃＃??２?１．５－?ｙ?丄??＃??〇?１．０－?ｒ??（Ｄ??＞?０．５－??圣?ｏ．ｏ－ｌ?．?？?．?．???°，??ｙ，??图３?ＯＧＤ／Ｒ损伤中心肌细胞ＬＤＨ释放率的变化??注：与?Ｃ?组比较，＞＜０．０５，?”Ｐ＜０．０ｌ；与?ＯＧＤ６／Ｒ２?组比较，＃Ｐ＜０．０５，ｗＰ＜０．０ｌ??４．０ＧＤ／Ｒ损伤各时间点细胞内钙离子浓度的变化??与Ｃ组比较，ＯＧＤ／Ｒ各组细胞内相对钙离子荧光强度显著升高（Ｐ＜０．０ｌ）。与??ＯＧＤ６／Ｒ２组相比，随着复氧时间的延长细咆内钙离子荧光强度有所下降（Ｐ＜０．０１），??表明ＯＧＤ／Ｒ损伤导致的钙超载在复氧２ｈ达到高峰，见图４。??＾?３－１?＊＊??Ｅ?ｔ??３匚?Ｔ??｜｜２．?入，??巾?〇）?／??▼??Ｉ?＾?／??１?ｓ?１．?Ｚ??２?〇??Ｕ．??￡?０??￣?〇Ｊ?１?１?１?１???。夕／?／??图４?ＯＧＤ／Ｒ损伤中心肌细胞内钙离子浓度的变化??注：与?Ｃ?组比较，汐＜０．０５，”Ｐ＜０．０１；与?ＯＧＤ６／Ｒ２?组比较，＃Ｐ＜０．０５，

ｏ－ｌ?．?？?．?．???°，??ｙ，??图３?ＯＧＤ／Ｒ损伤中心肌细胞ＬＤＨ释放率的变化??注：与?Ｃ?组比较，＞＜０．０５，?”Ｐ＜０．０ｌ；与?ＯＧＤ６／Ｒ２?组比较，＃Ｐ＜０．０５，ｗＰ＜０．０ｌ??４．０ＧＤ／Ｒ损伤各时间点细胞内钙离子浓度的变化??与Ｃ组比较，ＯＧＤ／Ｒ各组细胞内相对钙离子荧光强度显著升高（Ｐ＜０．０ｌ）。与??ＯＧＤ６／Ｒ２组相比，随着复氧时间的延长细咆内钙离子荧光强度有所下降（Ｐ＜０．０１），??表明ＯＧＤ／Ｒ损伤导致的钙超载在复氧２ｈ达到高峰，见图４。??＾?３－１?＊＊??Ｅ?ｔ??３匚?Ｔ??｜｜２．?入，??巾?〇）?／??▼??Ｉ?＾?／??１?ｓ?１．?Ｚ??２?〇??Ｕ．??￡?０??￣?〇Ｊ?１?１?１?１???。夕／?／??图４?ＯＧＤ／Ｒ损伤中心肌细胞内钙离子浓度的变化??注：与?Ｃ?组比较，汐＜０．０５，”Ｐ＜０．０１；与?ＯＧＤ６／Ｒ２?组比较，＃Ｐ＜０．０５，＊＂Ｐ＜０．０ｌ??２１??

【参考文献】：
期刊论文
[1]艾塞那肽预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 白羽,王雄.  中国临床药理学杂志. 2017(21)
[2]心肌缺血再灌注损伤诱发细胞凋亡的研究进展[J]. 刘静,李树青.  中国心血管病研究杂志. 2005(12)
[3]心肌缺血再灌注损伤与钙超载[J]. 鲜玉琼.  四川生理科学杂志. 1998(02)



本文编号：3292188