丙泊酚预处理对肝脏缺血再灌注损伤的作用及机制研究
发布时间：2021-07-27 11:11
[研究目的]探索丙泊酚用于预防肝脏缺血再灌注损伤的可行性及其机制,探索一种新型有效副作用小的肝脏缺血再灌注损伤保护药物。临床肝脏手术常需要暂时阻断肝脏供血,当供血恢复,大量自由基生成及脂质过氧化等病理过程导致的肝脏I/R损伤是肝脏外科手术和肝脏移植术中面临的一个亟待解决的问题。肝脏I/R损伤是导致肝移植失败及多器官衰竭的主要原因之一,它是由于肝脏短暂缺血后恢复血流供应,大量有毒代谢产物及炎性介质释放导致严重的代谢紊乱,从而加重肝脏损伤及功能障碍的过程。肝脏I/R损伤是多种机制共同作用的结果,与ROS产生、炎症反应及细胞凋亡等机制密切相关。因此,合理选择用药,干预自由基产生、抑制炎症反应及细胞凋亡或可减轻肝脏I/R损伤。丙泊酚是临床常用静脉麻醉药物,因其化学结构与维生素E相似,被报道具有广泛的抗氧化、抗炎及抗凋亡的效应。大量文献报道,丙泊酚预处理能通过多种分子机制,作用于多条信号通路而有效减轻1/R诱导的多器官损伤。然而,尽管有少数文献报道,丙泊酚在肝脏I/R损伤中的作用及其确切机制尚不明确,其保护效应尚缺乏临床试验佐证。基于此,本研究在前期文献报道的基础上,结合体外实验、动物及临床试验...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：95 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２丙泊酚预处理对细胞凋亡的影响，Ｆｌｏｗｊｏ?６．０软件分析细胞总凋亡率；＞＜０．０５／＞＜０．０１，??
为进一步研究丙泊酚预处理对缺氧再灌注细胞凋亡的影响，我们采用??Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ细胞促凋亡蛋白Ｃａｓｐａｓｅ－３及抗凋亡基因Ｂｃｌ－２蛋白表达水平。结果??如图３所示，缺氧后８ｈ再灌注能显著诱导细胞促凋亡蛋白Ｃａｓｐａｓｅ－３的表达（２．４５??倍）而抑制抗凋亡蛋白Ｂｃｌ－２的表达（２．７倍），而丙泊酚预处理能显著抑制促??凋亡蛋Ｇ?Ｃａｓｐａｓｅ－３的表达而逆转丨／Ｒ对抗凋亡蛋白Ｂｃｌ－２表达的抑制作用（与??１／Ｒ组比较分別降低３１％及增高１．６７倍）。结果表明丙泊酚预处理可通过调控缺??氧再灌注诱导细胞调亡相关蛋白的表达而发挥一定的抗凋亡作用。??３?－??ＯＢＣＩ－２??ｔ?＼?Ｃａｓｐａｓｅ－３?．?｜??ｃｏｎｔｒｏｌ?ｌ／Ｒ?ｐｒｏｐ—?Ｃ２?Ｓ??〇??：??Ｓ???Ｔ??…?Ｒｒｌ．？?Ｉ?，?＝??Ｕ?ＶＩ?Ｃｍ?Ｋ??０???＝＝??０?．：：：三二：?．三三三??細?一?Ｃａｓｐａｓｅ－３?Ｂ?Ｂ??ｐｉ－ｉ??麟？?＿趟?ＧＡＰＤＨ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ｌ／Ｒ?Ｐｒｏｐｏｆｏｌ??图３?ｍ常对照组，Ｉ／Ｒ组及丙泊酚组中促凋亡蛋白ｃａｓｐａｓｅ－３及抗凋Ｉ＇」蛋白Ｂｄ－２的表达情况，??内参蛋白使叫ＧＡＰＤＨ。??１．２．３丙泊酚降低缺氧／再灌注诱导的肝细胞线粒体损伤??（１）线粒体膜电位测定??为研究丙泊酚对缺氧／再灌注诱导的肝细胞线粒体功能的影响，我们采用??ＪＣ－Ｉ荧光探针对处理细胞进行染色，并采用荧光酶标仪测定ｊｃ－ｌ单体的荧光强??度。结果显示（图４）
为研究丙泊酚对缺氧／再灌注诱导的肝细胞线粒体功能的影响，我们采用??ＪＣ－Ｉ荧光探针对处理细胞进行染色，并采用荧光酶标仪测定ｊｃ－ｌ单体的荧光强??度。结果显示（图４），Ｉ／Ｒ组细胞荧光强度显著低于对照组细胞，提示线粒体??膜电位的Ｉ、＇降，线粒体损伤。而不同浓度（５、１０、２０、４０Ｍｍｏｌ／Ｌ）的丙泊酚预??处理，能显著升高细胞线粒体膜电位（ｐ＜０．０１），提示丙泊酚能显著减弱缺氧／??再灌注引起的肝细胞线粒体损伤，且呈现明显的剂量依赖性。??２７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Effects and mechanisms of store-operated calcium channel blockade on hepatic ischemia-reperfusion injury in rats[J]. Li-Jie Pan,Zi-Chao Zhang,Zhen-Ya Zhang,Zong-Ming Zhang,Department of General Surgery,Digestive Medical Center,The First Affiliated Hospital,School of Medicine,Tsinghua University,Beijing 100016,China Wen-Jun Wang,Yue Xu,Xuyue (Beijing) Science and Technology Co.,Ltd.,Haidian District,Beijing 100080,China. World Journal of Gastroenterology. 2012(04)
[2]白术多糖预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤后肝细胞线粒体结构的影响[J]. 张杰,刘歆农,张培建,苏辉,郎洁,庄卓男,孟中良,伍学艳. 肝胆胰外科杂志. 2011(01)
[3]Impact of hypoxic preconditioning on apoptosis and its possible mechanism in orthotopic liver autotransplantation in rats[J]. Cheng Jin,Pei-Jian Zhang,Xiao-Min Wu,Bin Zhou,Yong Li,Xin-Yan Liu, Min Feng and Li-De Tao Institute of General Surgical Research,Second Affiliated Hospital,Yangzhou University,Yangzhou 225001,China. Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2009(01)
[4]Interaction of L-Arginine-methyl ester and Sonic hedgehog in liver ischemia-reperfusion injury in the rats[J]. Mehmet Cudi Tuncer,Hayrettin Ozturk,Huseyin Buyukbayram,Hulya Ozturk. World Journal of Gastroenterology. 2007(28)
[5]Role of mitochondria in cell apoptosis during hepatic ischemia-reperfusion injury and protective effect of ischemic postconditioning[J]. Kai Sun Zhi-Su Liu Quan Sun Department of General Surgery,Zhongnan Hospital,Wuhan University,Wuhan 430071,Hubei Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(13)
本文编号：3305669
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：95 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２丙泊酚预处理对细胞凋亡的影响，Ｆｌｏｗｊｏ?６．０软件分析细胞总凋亡率；＞＜０．０５／＞＜０．０１，??
为进一步研究丙泊酚预处理对缺氧再灌注细胞凋亡的影响，我们采用??Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ细胞促凋亡蛋白Ｃａｓｐａｓｅ－３及抗凋亡基因Ｂｃｌ－２蛋白表达水平。结果??如图３所示，缺氧后８ｈ再灌注能显著诱导细胞促凋亡蛋白Ｃａｓｐａｓｅ－３的表达（２．４５??倍）而抑制抗凋亡蛋白Ｂｃｌ－２的表达（２．７倍），而丙泊酚预处理能显著抑制促??凋亡蛋Ｇ?Ｃａｓｐａｓｅ－３的表达而逆转丨／Ｒ对抗凋亡蛋白Ｂｃｌ－２表达的抑制作用（与??１／Ｒ组比较分別降低３１％及增高１．６７倍）。结果表明丙泊酚预处理可通过调控缺??氧再灌注诱导细胞调亡相关蛋白的表达而发挥一定的抗凋亡作用。??３?－??ＯＢＣＩ－２??ｔ?＼?Ｃａｓｐａｓｅ－３?．?｜??ｃｏｎｔｒｏｌ?ｌ／Ｒ?ｐｒｏｐ—?Ｃ２?Ｓ??〇??：??Ｓ???Ｔ??…?Ｒｒｌ．？?Ｉ?，?＝??Ｕ?ＶＩ?Ｃｍ?Ｋ??０???＝＝??０?．：：：三二：?．三三三??細?一?Ｃａｓｐａｓｅ－３?Ｂ?Ｂ??ｐｉ－ｉ??麟？?＿趟?ＧＡＰＤＨ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ｌ／Ｒ?Ｐｒｏｐｏｆｏｌ??图３?ｍ常对照组，Ｉ／Ｒ组及丙泊酚组中促凋亡蛋白ｃａｓｐａｓｅ－３及抗凋Ｉ＇」蛋白Ｂｄ－２的表达情况，??内参蛋白使叫ＧＡＰＤＨ。??１．２．３丙泊酚降低缺氧／再灌注诱导的肝细胞线粒体损伤??（１）线粒体膜电位测定??为研究丙泊酚对缺氧／再灌注诱导的肝细胞线粒体功能的影响，我们采用??ＪＣ－Ｉ荧光探针对处理细胞进行染色，并采用荧光酶标仪测定ｊｃ－ｌ单体的荧光强??度。结果显示（图４）
为研究丙泊酚对缺氧／再灌注诱导的肝细胞线粒体功能的影响，我们采用??ＪＣ－Ｉ荧光探针对处理细胞进行染色，并采用荧光酶标仪测定ｊｃ－ｌ单体的荧光强??度。结果显示（图４），Ｉ／Ｒ组细胞荧光强度显著低于对照组细胞，提示线粒体??膜电位的Ｉ、＇降，线粒体损伤。而不同浓度（５、１０、２０、４０Ｍｍｏｌ／Ｌ）的丙泊酚预??处理，能显著升高细胞线粒体膜电位（ｐ＜０．０１），提示丙泊酚能显著减弱缺氧／??再灌注引起的肝细胞线粒体损伤，且呈现明显的剂量依赖性。??２７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Effects and mechanisms of store-operated calcium channel blockade on hepatic ischemia-reperfusion injury in rats[J]. Li-Jie Pan,Zi-Chao Zhang,Zhen-Ya Zhang,Zong-Ming Zhang,Department of General Surgery,Digestive Medical Center,The First Affiliated Hospital,School of Medicine,Tsinghua University,Beijing 100016,China Wen-Jun Wang,Yue Xu,Xuyue (Beijing) Science and Technology Co.,Ltd.,Haidian District,Beijing 100080,China. World Journal of Gastroenterology. 2012(04)
[2]白术多糖预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤后肝细胞线粒体结构的影响[J]. 张杰,刘歆农,张培建,苏辉,郎洁,庄卓男,孟中良,伍学艳. 肝胆胰外科杂志. 2011(01)
[3]Impact of hypoxic preconditioning on apoptosis and its possible mechanism in orthotopic liver autotransplantation in rats[J]. Cheng Jin,Pei-Jian Zhang,Xiao-Min Wu,Bin Zhou,Yong Li,Xin-Yan Liu, Min Feng and Li-De Tao Institute of General Surgical Research,Second Affiliated Hospital,Yangzhou University,Yangzhou 225001,China. Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2009(01)
[4]Interaction of L-Arginine-methyl ester and Sonic hedgehog in liver ischemia-reperfusion injury in the rats[J]. Mehmet Cudi Tuncer,Hayrettin Ozturk,Huseyin Buyukbayram,Hulya Ozturk. World Journal of Gastroenterology. 2007(28)
[5]Role of mitochondria in cell apoptosis during hepatic ischemia-reperfusion injury and protective effect of ischemic postconditioning[J]. Kai Sun Zhi-Su Liu Quan Sun Department of General Surgery,Zhongnan Hospital,Wuhan University,Wuhan 430071,Hubei Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(13)
本文编号：3305669
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