TSG-6调控PI3K/Akt-Bcl-2通路影响人瘢痕疙瘩凋亡机制的研究

发布时间：2021-08-12 16:07

　　目的研究瘢痕疙瘩形成中肿瘤坏死因子α刺激基因6（TSG-6）调控3-磷酸肌醇激酶/丝/苏氨酸蛋白激酶-B淋巴细胞瘤-2基因（PI3K/Akt-Bcl-2）信号通路对成纤维细胞表达和凋亡的关联性。方法构建p LVX-puro-TSG-6、p LVX-shRNA1-TSG-6及其对应空质粒重组慢病毒载体转入人瘢痕疙瘩成纤维（HKF）细胞,建立稳定转染的过表达细胞株、干扰细胞株、过表达对照细胞株、干扰对照细胞株,用流式细胞术和CCK-8法分别检测相应细胞株与HKF细胞凋亡与增殖。应用RT-PCR及Western blot分别检测TSG-6过表达细胞株、TSG-6干扰组细胞株及前两组对应对照组细胞株、HKF细胞株中PI3K、Akt、鼠双微基因2（MDM2）、P53基因、Bcl-2的信使核糖核酸及蛋白表达变化。结果与HKF组对比,TSG-6过表达组细胞增殖减缓,凋亡显著增加（t=-4.443,P=0.011）;TSG-6干扰组则相反（t=3.827,P=0.019）;其余各组间差异无统计学意义。RT-PCR、Western blot检测结果显示TSG-6过表达组抑制PI3K、Akt、MDM2、B... 

【文章来源】：安徽医科大学学报. 2018,53(04)北大核心

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 主要试剂
    1.3 实验方法
        1.3.1 HKF的原代培养及鉴定
        1.3.2 构建重组慢病毒表达载体p LVX-pour-TSG-6及干扰载体p LVX-shRNA1-TSG-6
        1.3.3 慢病毒包装及转染、细胞分组
        1.3.4 流式细胞术检测细胞凋亡
        1.3.5 CCK-8法检测各组细胞增殖能力
        1.3.6 RT-PCR
        1.3.7 Western blot
    1.4 统计学处理
2 结果
    2.1 TSG-6对HKF细胞凋亡的影响
    2.2 TSG-6对HKF细胞增殖能力的影响
    2.3 TSG-6对HKF细胞PI3K/Akt-Bcl-2信号通路的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]TSG-6促进瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡及其NF-κB信号通路影响的实验研究[J]. 王佳妮,李小静,李涛,王瑜.  安徽医科大学学报. 2017(09)
[2]下调miR-21通过PDCD4抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖并抑制PI3K/Akt信号通路[J]. 慕生枝,孙要文,王国栋.  中国美容医学. 2015(23)
[3]TSG-6在病理性瘢痕中的表达及意义[J]. 洪学哲,李小静,宁金龙.  安徽医科大学学报. 2013(06)
[4]PI3K/PKB信号通路参与结缔组织生长因子促人增生性瘢痕纤维化[J]. 刘剑毅,李世荣.  重庆医学. 2008(09)



本文编号：3338634