人尿源干细胞外泌体对退变髓核细胞生物学功能的影响

发布时间：2021-08-31 11:02

　　背景:下腰痛（Low Back Pain）为现代社会中最常见疾患之一,对患者的生活造成了严重的影响。流行病学研究显示,超过80%的人在其一生中出现过一次或多次下腰痛的经历,超过15%的人疼痛程度需要住院治疗才能得到缓解。目前的病因学研究显示超过40%的下腰痛来源于椎间盘退变（Intervertebral Disc Degeneration,IDD）的继发病变。椎间盘退变是人体的一种自然衰老过程,但它可引起腰椎间盘突出症、腰椎管狭窄症、腰椎滑脱症等疾病。椎间盘退变是多层面、缓慢进展的过程,其中由于退变椎间盘中髓核细胞（nucleus pulposus cells,NPCs）数量减少和活性降低而导致细胞外基质合成减少是导致椎间盘退变的重要因素之一。因此,寻找减缓甚至逆转椎间盘退变的方法,一直是该领域的研究热点之一。间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）是具有自我更新及多项分化潜能的成体干细胞。近年来有研究证明,可通过干细胞移植抑制髓核细胞退变及凋亡,并有研究报道间充质干细胞可通过其分泌的外泌体（Exosome）调节NPCs中蛋白聚糖（ACAN）、Ⅱ型胶原（C... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

倒置显微镜下（×100）观察a接种后第5d可见3-5个类圆形细胞贴壁生长b接种后第10d，细胞生长增殖形成集落，达80-90%融合图2WB检测干细胞阳性标志物CD29、CD44、CD73和CD90呈高表达，未检出干细胞阴性标志物CD34和CD45图3倒置显微镜下（×200）观察a经3a3b3c

青岛大学硕士学位论文163.USC-Exos荧光标记及NPCs摄取USC-Exos结果图5a激光共聚焦显微镜下（×60）DAPI染色的P6NPCs细胞核bPKH26红色荧光标记的USC-ExoscP6NPCs摄取USC-Exos于胞内4.绘制NPCs生长曲线经USCs外泌体刺激后实验组NPCs较对照组增殖速度变快。细胞在最初1d增殖速度均缓慢，在2d后增殖速度加快，3d时呈对数生长状态。生长至第5d时，细胞密度已接近80%融合，细胞生长进入平台期，细胞生长与衰亡接近动态平衡（图5）。图6CCK8法检测两组细胞不同时间点吸光度,以培养时间为横坐标，以NPCs在A450nm波长下吸光度为纵坐标，绘制细胞生长曲线5a65b5c

青岛大学硕士学位论文163.USC-Exos荧光标记及NPCs摄取USC-Exos结果图5a激光共聚焦显微镜下（×60）DAPI染色的P6NPCs细胞核bPKH26红色荧光标记的USC-ExoscP6NPCs摄取USC-Exos于胞内4.绘制NPCs生长曲线经USCs外泌体刺激后实验组NPCs较对照组增殖速度变快。细胞在最初1d增殖速度均缓慢，在2d后增殖速度加快，3d时呈对数生长状态。生长至第5d时，细胞密度已接近80%融合，细胞生长进入平台期，细胞生长与衰亡接近动态平衡（图5）。图6CCK8法检测两组细胞不同时间点吸光度,以培养时间为横坐标，以NPCs在A450nm波长下吸光度为纵坐标，绘制细胞生长曲线5a65b5c

【参考文献】：
期刊论文
[1]大鼠骨髓间充质干细胞来源外泌体对退变髓核细胞的影响[J]. 蒋长青,蓝蔚仁,李海音,路康,李长青.  中国脊柱脊髓杂志. 2019(02)
[2]人尿源干细胞及其在骨组织工程中应用的研究进展[J]. 高鹏,姜大朋,李昭铸.  中华外科杂志. 2016 (04)

硕士论文
[1]非接触式共培养条件下两种间充质干细胞对同源退变髓核细胞生物学影响的比较研究[D]. 姜刚强.第二军医大学 2014



本文编号：3374776