褪黑素介导人成骨细胞系hFOB 1.19细胞凋亡的机制研究
发布时间：2021-09-30 01:38
目的:探究褪黑素介导的成骨细胞系hFOB 1.19细胞凋亡的机制以及相关保护性因素。方法:对人成骨细胞系hFOB 1.19进行培养,应用不同浓度的褪黑素对其作用不同时间后进行流式细胞检测凋亡是否发生;应用不同浓度的褪黑素对其作用不同时间后进行western blot实验以检测褪黑素受体（MTNR1a、MTNR1b）和内质网应激相关蛋白（GRP78、GRP94）表达水平,应用RT-qPCR和western blotting技术对未折叠蛋白反应相关通路蛋白（ATF4、ATF6α、XBP1、p-eIF2α）的mRNA水平和蛋白表达水平进行检测,对应用不同浓度褪黑素处理相同时长的成骨细胞的POSTN和SEPTIN7的表达水平进行western blot检测,转染POSTN和SEPTIN7过表达质粒和小干扰RNA后对不同处理组的内质网应激和凋亡相关蛋白进行检测。结果:不同浓度褪黑素处理组中与对照组相比早期凋亡细胞和晚期凋亡细胞的数量均有显著增加,但与2 mM和6 mM褪黑素处理组相比,4 m M褪黑素处理组中晚期凋亡细胞数量最少,早期凋亡细胞数量最多,说明4 mM褪黑素作用24小时后成骨细胞hF...
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
不同浓度褪黑素作用成骨细胞不同时间后MTNR1a，MTNR1b表达水平的变化
图 2 不同浓度褪黑素作用不同时间后内质网应激相关蛋白 GRP78 和 GRP94 的表达水平。的数量来评估早起凋亡细胞的数量。观察各组早期凋亡和晚期凋亡的细胞数量，结果显示各组间相比较，第四象限中细胞数量（早期凋亡）有显著差异，图 3A（0mM褪黑素作用 24 小时组）和图 3B（2mM 褪黑素作用 24 小时组）与图 3C（4mM 褪黑素作用 24 小时组）相比较，早起凋亡细胞数显著减少。同时图 3B 和图 3D 中晚期凋亡细胞数较图 3C 中显著增加。褪黑素作用 48 小时后，晚期凋亡细胞数量在各浓度褪黑素处理组中与对照组（0mM 褪黑素处理组）相比均有显著增加。综上证实了高浓度褪黑素可引起成骨细胞凋亡，同时我们选择 4mM 褪黑素作为后续实验的试验条件。
图 2 不同浓度褪黑素作用不同时间后内质网应激相关蛋白 GRP78 和 GRP94 的表达水平。的数量来评估早起凋亡细胞的数量。观察各组早期凋亡和晚期凋亡的细胞数量，结果显示各组间相比较，第四象限中细胞数量（早期凋亡）有显著差异，图 3A（0mM褪黑素作用 24 小时组）和图 3B（2mM 褪黑素作用 24 小时组）与图 3C（4mM 褪黑素作用 24 小时组）相比较，早起凋亡细胞数显著减少。同时图 3B 和图 3D 中晚期凋亡细胞数较图 3C 中显著增加。褪黑素作用 48 小时后，晚期凋亡细胞数量在各浓度褪黑素处理组中与对照组（0mM 褪黑素处理组）相比均有显著增加。综上证实了高浓度褪黑素可引起成骨细胞凋亡，同时我们选择 4mM 褪黑素作为后续实验的试验条件。
【参考文献】：
期刊论文
[1]内质网应激与细胞死亡[J]. 申龙健,殷香宇,孔迪,王建秀. 神经损伤与功能重建. 2015(03)
[2]Correlation between periostin and SNCG and esophageal cancer invasion,infiltration and apoptosis[J]. Jin-Hong Luo,Jun Zhou,Yong Gao. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2013(07)
[3]Runx2通过抑制细胞巨自噬以诱导C2C12细胞向成骨细胞分化[J]. 余守和,洪岸. 中国病理生理杂志. 2013(03)
[4]大鼠急性脊髓损伤后内质网应激相关蛋白CHOP的表达及其意义[J]. 龙智生,马泽民,吕国华,王冰,邓幼文. 中国脊柱脊髓杂志. 2009(06)
[5]septin基因家族的研究进展[J]. 余文博,江松敏,余龙. 遗传. 2008(09)
[6]SEPT7对胶质瘤细胞系TJ905生物学特性的影响[J]. 贾志凡,浦佩玉,康春生,王广秀,张志勇,裘明哲,黄强. 中华外科杂志. 2007(20)
[7]褪黑素受体1A基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸相关性研究[J]. 邱旭升,邓亮生,杨晓恩,郭凯琪,李广文,秦岭,邱勇,郑振耀. 中华外科杂志. 2007(18)
[8]青少年特发性脊柱侧凸患者脊柱前后柱骨骺软骨的组织形态学对比研究[J]. 王守丰,邱勇,夏才伟,朱泽章,朱锋,马兆龙. 中国脊柱脊髓杂志. 2007(04)
[9]青少年特发性脊柱侧凸青春期生长发育形态学特征[J]. 王斌,孙强,邱勇,刘臻,邱旭升,马兆龙,孙旭,夏才伟. 中华骨科杂志. 2006(09)
[10]特发性脊柱侧凸患者脊柱前后柱生长板的组织学形态[J]. 邱勇,朱锋. 中国医学科学院学报. 2005(02)
本文编号：3414865
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
不同浓度褪黑素作用成骨细胞不同时间后MTNR1a，MTNR1b表达水平的变化
图 2 不同浓度褪黑素作用不同时间后内质网应激相关蛋白 GRP78 和 GRP94 的表达水平。的数量来评估早起凋亡细胞的数量。观察各组早期凋亡和晚期凋亡的细胞数量，结果显示各组间相比较，第四象限中细胞数量（早期凋亡）有显著差异，图 3A（0mM褪黑素作用 24 小时组）和图 3B（2mM 褪黑素作用 24 小时组）与图 3C（4mM 褪黑素作用 24 小时组）相比较，早起凋亡细胞数显著减少。同时图 3B 和图 3D 中晚期凋亡细胞数较图 3C 中显著增加。褪黑素作用 48 小时后，晚期凋亡细胞数量在各浓度褪黑素处理组中与对照组（0mM 褪黑素处理组）相比均有显著增加。综上证实了高浓度褪黑素可引起成骨细胞凋亡，同时我们选择 4mM 褪黑素作为后续实验的试验条件。
图 2 不同浓度褪黑素作用不同时间后内质网应激相关蛋白 GRP78 和 GRP94 的表达水平。的数量来评估早起凋亡细胞的数量。观察各组早期凋亡和晚期凋亡的细胞数量，结果显示各组间相比较，第四象限中细胞数量（早期凋亡）有显著差异，图 3A（0mM褪黑素作用 24 小时组）和图 3B（2mM 褪黑素作用 24 小时组）与图 3C（4mM 褪黑素作用 24 小时组）相比较，早起凋亡细胞数显著减少。同时图 3B 和图 3D 中晚期凋亡细胞数较图 3C 中显著增加。褪黑素作用 48 小时后，晚期凋亡细胞数量在各浓度褪黑素处理组中与对照组（0mM 褪黑素处理组）相比均有显著增加。综上证实了高浓度褪黑素可引起成骨细胞凋亡，同时我们选择 4mM 褪黑素作为后续实验的试验条件。
【参考文献】：
期刊论文
[1]内质网应激与细胞死亡[J]. 申龙健,殷香宇,孔迪,王建秀. 神经损伤与功能重建. 2015(03)
[2]Correlation between periostin and SNCG and esophageal cancer invasion,infiltration and apoptosis[J]. Jin-Hong Luo,Jun Zhou,Yong Gao. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2013(07)
[3]Runx2通过抑制细胞巨自噬以诱导C2C12细胞向成骨细胞分化[J]. 余守和,洪岸. 中国病理生理杂志. 2013(03)
[4]大鼠急性脊髓损伤后内质网应激相关蛋白CHOP的表达及其意义[J]. 龙智生,马泽民,吕国华,王冰,邓幼文. 中国脊柱脊髓杂志. 2009(06)
[5]septin基因家族的研究进展[J]. 余文博,江松敏,余龙. 遗传. 2008(09)
[6]SEPT7对胶质瘤细胞系TJ905生物学特性的影响[J]. 贾志凡,浦佩玉,康春生,王广秀,张志勇,裘明哲,黄强. 中华外科杂志. 2007(20)
[7]褪黑素受体1A基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸相关性研究[J]. 邱旭升,邓亮生,杨晓恩,郭凯琪,李广文,秦岭,邱勇,郑振耀. 中华外科杂志. 2007(18)
[8]青少年特发性脊柱侧凸患者脊柱前后柱骨骺软骨的组织形态学对比研究[J]. 王守丰,邱勇,夏才伟,朱泽章,朱锋,马兆龙. 中国脊柱脊髓杂志. 2007(04)
[9]青少年特发性脊柱侧凸青春期生长发育形态学特征[J]. 王斌,孙强,邱勇,刘臻,邱旭升,马兆龙,孙旭,夏才伟. 中华骨科杂志. 2006(09)
[10]特发性脊柱侧凸患者脊柱前后柱生长板的组织学形态[J]. 邱勇,朱锋. 中国医学科学院学报. 2005(02)
本文编号：3414865
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