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15-LOX-1调控骨性关节炎软骨下骨中TGF-β1表达的研究

发布时间:2021-10-02 07:04
  背景:骨性关节炎(osteoarthritis)是最常见的慢性退化性的关节疾病,病变特点是关节软骨的退化,软骨下骨的异常重塑以及硬化,骨赘的生成和关节滑膜的炎性变等。以往的研究焦点在于关节软骨,但是近期的研究表明软骨下骨在骨性关节炎中的病变早于关节软骨,同时软骨下骨异常重塑以及硬化等病变会引发其对软骨机械支撑特性的改变,影响覆盖其表面的关节软骨的稳定,使软骨发生病变,最终引发骨性关节炎。所以软骨下骨的病变在骨性关节炎的发病和病程的进展中扮演着重要的角色,研究软骨下骨的病变机制具有重要的实际意义。在骨性关节炎的软骨下骨所含有的细胞中,成骨细胞占有大部分的比例,在软骨下骨病变中所发挥的作用也最为关键,成骨细胞中过度表达的TGF-β1可以直接导致软骨下骨的异常重塑以及硬化,最终引发骨性关节炎,而降低软骨下骨中TGF-β1的表达能够明显的减轻骨性关节炎中软骨下骨的病变。故针对骨性关节炎软骨下骨中TGF-β1表达的研究在未来治疗骨性关节炎中显得尤为重要。15-脂氧合酶-1(15-lipoxygenase-1,15-LOX-1),属于脂氧合酶家族,涉及很多疾病的病理过程并且可以加重疾病的炎性反应,... 

【文章来源】:安徽医科大学安徽省

【文章页数】:105 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

15-LOX-1调控骨性关节炎软骨下骨中TGF-β1表达的研究


原代成骨细胞的鉴定。(1a)茜素红染色后在200倍和400倍镜下观察。(1b)碱性磷酸酶染色后在200倍和400倍镜下观察。Scale bar=100μm(200 x),Scale bar=50μm(400 x).

茜素,碱性磷酸酶,细胞,骨性关节炎


图1 原代成骨细胞的鉴定。(1a)茜素红染色后在200倍和400倍镜下观察。(1b)碱性磷酸酶染色后在200倍和400倍镜下观察。Scale bar=100μm(200 x),Scale bar=50μm(400 x).3.2 15-LOX-1,TGF-β1 的表达在骨性关节炎软骨下骨的成骨细胞中是增加的

骨性关节炎,软骨,病人,标本


进一步通过western blot实验验证TGF-β1在骨性关节炎软骨下骨的表达相对于正常的软骨下骨也是增高的,且具有统计学差异,qRT-PCR实验也表现出类似的结果,这一结果和文献报道相同[6],故此说明所取的样品是可靠的(图2c,图2d)。图2 在骨性关节炎的软骨下骨的成骨细胞中15-LOX-1,TGF-β1的表达水平是增多的。(2a)通过western blot实验测定15-LOX-1在骨性关节炎软骨下骨负重区,骨性关节炎软骨下骨非负重区以及正常软骨下骨中的含量。正常软骨下骨标本来自于下肢截肢的病人,且没有患骨性关节炎。骨性关节炎软骨下骨标本来自于患有骨性关节炎进行全膝关节置换术的病人,*P<0.05,**P<0. 0 1。蛋白浓度被ImageJ软件所分析。(2b)通过qRT-PCR实验测定15-LOX-1在骨性关节炎软骨下骨负重区,骨性关节炎软骨下骨非负重区以及正常软骨下骨中的含量。正常软骨下骨标本来自于下肢截肢的病人,且没有患骨性关节炎。骨性关节炎软骨下骨标本来自于患有骨性关节炎进行全膝关节置换术的病人,*P<0.05,**P<0. 0 1。(2c)通过western blot实验测定TGF-β1在骨性关节炎软骨下骨负重区和正常软骨下骨中蛋白的含量,**P<0. 0 1。蛋白浓度被ImageJ软件所分析。(2d)通过qRT-PCR实验测定TGF-β1在骨性关节炎软骨下骨负重区和正常软骨下骨中的含量,**P<0. 0 1。(2e)通过免疫组化观察15-LOX-1在骨性关节炎组和正常组中的表达差异。Scale bar=75μm。

【参考文献】:
期刊论文
[1]Activation of mTORC1 in subchondral bone preosteoblasts promotes osteoarthritis by stimulating bone sclerosis and secretion of CXCL12[J]. Chuangxin Lin,Liangliang Liu,Chun Zeng,Zhong-Kai Cui,Yuhui Chen,Pinling Lai,Hong Wang,Yan Shao,Haiyan Zhang,Rongkai Zhang,Chang Zhao,Hang Fang,Daozhang Cai,Xiaochun Bai.  Bone Research. 2019(01)
[2]mTOR signaling in skeletal development and disease[J]. Jianquan Chen,Fanxin Long.  Bone Research. 2018(01)



本文编号:3418194

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