LncRNA IGFBP7-OT通过上调IGFBP7表达促进骨关节炎的发生发展

发布时间：2021-10-10 23:45

　　目的:探究lncRNA IGFBP7-OT及其下游基因IGFBP7在骨关节炎发生发展中的作用和分子机制。方法:用免疫组化和番红O染色的方法对人正常软骨组织和OA软骨组织进行鉴定。用Real-time PCR的方法检测lncRNA IGFBP7-OT和IGFBP7在OA软骨组织中的表达情况。用免疫组化的方法检测IGFBP7在OA软骨组织中蛋白水平的表达。构建lncRNA IGFBP7-OT和IGFBP7的表达质粒,瞬时转染分离自人正常软骨组织的原代软骨细胞,Real-time PCR和Western blot检测表达效率。使用siRNA干扰内源性IGFBP7表达,Western blot检测敲低效率。CCK8实验检测转染后原代软骨细胞的增殖能力。流式细胞术检测转染后原代软骨细胞的凋亡率。Western blot检测细胞外基质合成和分解代谢相关蛋白COL2A1,ACAN,MMP13和ADAMTS5以及凋亡相关蛋白PARP、Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl2和Survivin的表达情况。结果:与人正常软骨组织相比,lncRNA IGFBP7-OT和IGFBP7在OA软骨... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

LncRNAIGFBP7一OT在人OA软骨组织中表达显著上调

过表达lncRNAIGFBP7-OT促进细胞外基质降解

264. LncRNAIGFBP7-OT 调控下游基因 IGFBP7 的表达为了探讨 IGFBP7-OT 在 OA 发生发展中发挥功能的分子机制，我们进行了生物信息学分析，从基因定位和序列比对两个方面综合考虑，确定 IGFBP7 为IGFBP7-OT 潜在的下游靶基因。LncRNA IGFBP7-OT 和 IGFBP7 均定位于 4q12（图 4A），存在大段重叠序列（图 4B）。在原代软骨细胞中过表达 IGFBP7-OT后，上调了 IGFBP7 的蛋白表达（图 4C）。以上结果表明，IGFBP7 的表达受IGFBP7-OT 调控，IGFBP7-OT 可能通过调控 IGFBP7 的表达而发挥其功能。

【参考文献】：
期刊论文
[1]长链非编码RNA生物学特性和功能研究进展[J]. 计红,李悦,牛春阳,詹雪龙,郭景茹,甄莉,杨焕民,李士泽.  黑龙江八一农垦大学学报. 2019(02)
[2]骨关节炎相关生物标志物[J]. 陈则亦,康翼,付维力.  中国生物化学与分子生物学报. 2018(11)
[3]蛋白聚糖酶在骨关节炎中的研究进展[J]. 徐凡,满城.  临床口腔医学杂志. 2018(06)
[4]胰岛素样生长因子结合蛋白7在肝硬化患者急性肾损伤时的诊断价值[J]. 袁剑峰,张翠芳,苏振宏.  皖南医学院学报. 2018(03)
[5]大鼠骨关节炎模型的建立及软骨组织中MMP-13和ADAMTS-5的表达[J]. 祁雷,姚运峰,李子煜,吴晗,荆珏华.  局解手术学杂志. 2018(03)



本文编号：3429378